Sanshibio 2× Probe Campuran qPCR

2× Selidiki Campuran qPCR

Nomor Barang：EH002 Spesifikasi：1mL Penyimpanan: Simpan pada suhu -20°C

Perkenalan produk：

Produk ini merupakan reagen khusus untuk qPCR Real-Time dengan menggunakan metode probe. Ini mengandung enzim hot-start yang diblokir antibodi yang secara efektif menekan amplifikasi non-spesifik yang disebabkan oleh misannealing primer atau pembentukan dimer primer pada suhu rendah, sehingga meningkatkan spesifisitas reaksi amplifikasi. Produk ini menunjukkan efisiensi amplifikasi dan sensitivitas deteksi yang tinggi, memungkinkan pembuatan kurva standar yang kuat pada rentang kuantifikasi yang luas, memungkinkan kuantifikasi yang akurat. Lebih-lebih lagi, ini kompatibel dengan berbagai kuantitatif fluoresensi PCR instrumen, termasuk yang dari Applied Biosystems, Eppendorf, Bio-Rad, Roche, dan merek dalam negeri lainnya.

Isi produk：

Catatan：Pewarna Referensi ROX dapat diperoleh secara terpisah atau melalui produsen untuk memperbaiki perbedaan sinyal fluoresensi antar sumur pada amplifier PCR Real-Time perusahaan tertentu. ROX Referrence Dye I cocok untuk Sistem PCR Real-Time ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT dan Step One Plus, dll.. ROX Referensi Pewarna II cocok untuk 7500 Sistem PCR Waktu Nyata, 7500 Sistem PCR Waktu Nyata yang Cepat, Stratagene Mx3000P, Mx3005P, dan Mx4000, dll.. Konsentrasi akhir Pewarna Referensi ROX I dan II adalah 1×. Amplifier PCR kuantitatif fluoresensi waktu nyata seperti LightCycler, Sistem Waktu Nyata Dadu Pengendara Sepeda Termal II, dan Sistem Smart Cycler tidak memerlukan penggunaan Pewarna Referensi ROX.

Penyimpanan:

Simpan pada suhu -20°C, dengan umur simpan minimum 12 bulan.

Definisi Aktivitas:

Menggunakan DNA sperma mahi-mahi teraktivasi sebagai cetakan/primer, kegiatan tersebut didefinisikan sebagai 1 satuan (kamu) dari bahan yang tidak larut dalam asam dimasukkan, dengan mengambil 10 nmol nukleotida di dalamnya 30 menit pada suhu 74°C.

Kontrol Kualitas:

Produk ini telah menjalani pengujian kualitas dan bebas dari aktivitas deoksiribonuklease endonuklease, aktivitas eksonuklease deoksiribonuklease, dan kontaminasi ribonuklease. Konten sisa DNA genom inang ada di bawah 10 salinan.

Kegunaan Produk:

Singleplex atau multipleks kuantitatif fluoresensi waktu nyata (2-4 saluran) qPCR (metode penyelidikan) amplifikasi DNA atau cDNA; kuantifikasi absolut qPCR.

Petunjuk Penggunaan:

• Setarakan reagen yang diperlukan pada suhu kamar sampai larut sepenuhnya, aduk rata dengan lembut (jangan pusaran), gunakan setelah sentrifugasi singkat untuk mencegah pembentukan gelembung berlebihan, dan menghindari siklus pembekuan-pencairan yang berulang. Jika sering digunakan, simpan pada suhu 4°C. Siapkan campuran reaksi PCR sesuai dengan komponen yang tercantum di bawah ini (siapkan campuran reaksi pada kotak es):

Catatan：Jumlah masing-masing komponen dalam sistem reaksi dapat disesuaikan dengan kebutuhan sebenarnya. Pengguna perlu memutuskan apakah akan menambahkan Pewarna Referensi ROX berdasarkan model sebenarnya yang digunakan.

• Umumnya, metode dua langkah dapat digunakan untuk reaksi; jika amplifikasi dua langkah tidak memuaskan, metode tiga langkah dapat digunakan untuk menyiapkan program reaksi PCR.

Catatan: Kondisi reaksi dapat disesuaikan dan dioptimalkan sesuai dengan kebutuhan sebenarnya.

• Setelah reaksi selesai, menganalisis hasil percobaan. Untuk metode analisis terperinci, mengacu pada panduan pengoperasian instrumen amplifikasi PCR.

Tindakan pencegahan:

1. Konsentrasi primer yang digunakan dapat disesuaikan dalam kisaran 0.2-1.0 μM, dan cetakan DNA dapat disesuaikan dengan tepat berdasarkan konsentrasinya.
2. Pilih anil yang sesuai (perpanjangan) suhu berdasarkan desain primer. Khas, nilai Tm primer dirancang sekitar 60°C. Untuk primer dengan suhu anil yang lebih rendah atau untuk memperkuat fragmen yang panjangnya melebihi 200 bp, metode tiga langkah direkomendasikan.
3. Konsentrasi probe yang digunakan dapat dioptimalkan dalam kisaran 0.1-0.4 μM. Lakukan eksperimen dengan konsentrasi gradien untuk menemukan kombinasi primer dan probe yang optimal. Penggunaan probe bergantung pada instrumen Real Time PCR, jenis penyelidikan, dan jenis label neon. Lihat manual instrumen atau persyaratan khusus untuk setiap probe fluoresen untuk penyesuaian.
4. Gunakan area khusus dan pipettor sebelum dan sesudah amplifikasi, memakai sarung tangan, dan sering-seringlah mengubahnya. Setelah amplifikasi PCR, jangan membuka tabung reaksi secara langsung. Tempatkan pada suhu 4°C atau -20°C hingga cukup dingin sebelum dibuka untuk meminimalkan risiko kontaminasi produk PCR di lingkungan percobaan.