Petunjuk:
-
Pengumpulan sampel:
- Mengumpulkan 0.1-1 Sampel darah ML.
-
Persiapan Sampel:
- Menambahkan 2-3 times the volume of 1x erythrocyte lysate to the blood sample.
- Terbalik dan aduk sepenuhnya.
- Sentrifugasi di 12,000 rpm untuk 1 menit.
- Hati -hati lepaskan supernatan. Endapannya harus putih atau merah muda.
- Menambahkan 400 μL buffer reagen I dan 10 μl proteinase k (10 mg/ml) ke endapan.
- Vortex dan aduk untuk 15 detik, Kemudian diamkan pada suhu kamar untuk 2 menit.
-
Kasus khusus: Organisme tingkat rendah:
- Jika memproses darah dari unggas, burung, atau organisme tingkat rendah lainnya di mana sel darah merah mengandung inti:
- No need to add 1x erythrocyte lysate.
- Langsung Tambahkan 200 μl buffer reagen i (volume total tidak melebihi 500 μl).
- Diamkan pada suhu kamar untuk 2 menit.
-
Pencernaan:
- Menambahkan 10 μl proteinase k (10 mg/ml) ke campuran.
- Campur secara menyeluruh dengan inversi.
- Dicerna pada 65 ° C untuk 10 menit.
- Balik dan campur 6-7 kali selama pencernaan sampai selesai.
-
Transfer ke pelat reagen:
- Tambahkan lisat dari langkah sebelumnya ke pelat reagen 96-well.
- Ikuti langkah -langkah spesifik yang diuraikan dalam protokol ekstraksi otomatis untuk pemrosesan lebih lanjut.