Oral Swab Genomic DNA Extraction Kit

1. Komponente kompleta reagensa

Tehnički podaci	50T	100T
Mačka. Ne.	SN0233	SN0234
Stupovi za ekstrakciju DNK (set)	50 (set)	100 (set)
Pufer reagensa b	20 ml	2×20 ml
Pufer reagensa c	30 ml	2×30 ml
Pufer za pranje 1	15 ml	2 × 15 ml
Elucijski pufer	20 ml	20 ml
Proteinaza K	1ml	1ml
RNaza A	1ml	1ml
Priručnik za upute	1	1

 

2. Skladištenje

Ovaj se komplet reagensa treba čuvati na sobnoj temperaturi (15-25℃) I u suhim uvjetima, s rokom trajanja 12 mjeseca. Stupovi za pročišćavanje DNK mogu se pohraniti za 1 godina u hladnom i suhom okruženju. Proteinase K and RNaza A contain preservatives, omogućavajući prijevoz na sobnoj temperaturi, Ali za dugoročno skladištenje, Treba ih držati na -20 ℃.

3. Upute za korištenje kompleta reagensa

3.1 Ovaj komplet reagensa namijenjen je istraživanju molekularne biologije i ne smije se koristiti za dijagnozu ili liječenje bolesti.

3.2 Neke komponente u kompletu reagensa sadrže iritante. Preporučuju se zaštitne mjere poput nošenja zaštitne odjeće i naočala.

3.3 Tijekom upotrebe ovog kompleta reagensa, brza centrifuga, vodena kupelji (metalna kupka), vrtlog miksera, bezvodni etanol, sterilna deionizirana voda, i EP epruvete treba pripremiti korisnik.

4. Uvod u komplet reagensa

 

The Oral Swab Pročišćavanje DNK Kit provides a rapid and efficient method for purifying DNA from oral swabs, widely used for the extraction of epithelial cells such as oral epithelium.

 

The Oral Swab DNA Rapid Purification Kit can extract total DNA from oral epithelial cells within 30 minuta. Cijeli postupak pročišćavanja ne zahtijeva toksične reagense kao što je fenol-kloroform. The extracted DNA can be directly used for PCR, Južni blot, and other applications.

5. Eksperimentalni principi i postupci

6. Ekstrakcijski postupak

Prije početka eksperimenta:

A. Pufer reagensa b i c može se taložiti u uvjetima niske temperature. Preporučujemo grijanje na 65 ℃ za 5 minuta. Nakon što se talog otopi, Može se normalno koristiti.

B. Prije upotrebe, Dodajte navedenu količinu bezvodnog etanola u Pufer za pranje 1Kao što je naznačeno na etiketi boca. Označite ček na etiketi kako biste naznačili dodavanje bezvodnog etanola.

C. Buffer za eluciju je a0.1X TE otopinaSadrži minimalne količine EDTA. Ako EDTA može utjecati na naknadne eksperimente, Preporučljivo je zamijeniti pufer za eluciju sterilnom deioniziranom vodom.

1. Rukovanje uzorkom:
2. Sampling: Take a sterilized cotton swab, insert it into the mouth, rub against the inner cheek back and forth for more than 20 vrijeme.
3. Use scissors to cut the head of the cotton swab, place it into a 2 ml centrifuge tube, and add 400μl of Reagens Buffer B.
4. Dodati10μl Proteinase K (10 mg/ml) and 10μl RNase A (10 mg/ml), invert thoroughly, incubate at 65°C for 20 minuta, vortex for 10 seconds during incubation.
5. Dodati 400μl of Reagens Buffer Cto the lysate, vortex thoroughly.
6. Dodati 200μl of pre-chilled absolute ethanol, Dobro promiješajte; precipitation may occur, but it will not affect subsequent experiments.
7. Transfer the obtained liquid into a DNA extraction and purification column (kit) (approximately 650~700μl each time), centrifuga na >8,000 RPM za 1 minuta, discard the collected waste liquid, and reinsert the collection tube into the DNA extraction and purification column (kit) for the next step.
8. Place the DNA extraction and purification column (kit) into a collection tube, dodati 300μl pufera za pranje 1, centrifuga na >8,000 RPM za 1 minuta, discard the waste liquid, and reinsert the DNA extraction and purification column (kit) into the tube for the next step.

(Bilješka: Ensure that absolute ethanol has been added to Wash Buffer 1.)

7. Dodati 500μl pufera za pranje 1to the DNA extraction and purification column (kit), centrifuga na 14,000 rpm (20,000×g) za 2 minuta, extend the centrifugation time appropriately to dry the membrane further.
8. Place the DNA extraction and purification column (kit) u novu cijev za centrifugu, open the lid, incubate at 65°C for 2 minuta; this step can be extended appropriately to evaporate ethanol as much as possible, preventing residual ethanol from affecting downstream experiments.
9. Elute 100μl pufera za elucijuonto the membrane, centrifuga na 12,000 RPM za 2 minuta.

(Bilješka: 1. Eluting DNA with 50μl of Elution Buffer can increase DNA concentration but decrease total DNA yield; 2. Eluted DNA in the eluate can be reapplied to the DNA extraction and purification column, ponovno centrifugiranje na 12,000 RPM za 2 minutes to increase DNA yield.)