| Attribut | Détails |
|---|---|
| Chat | G1921 |
| Taille | 3 x 50 ml |
| Stockage | 2-8°C, éviter la lumière, valable 6 mois |
Composants du kit
| Réactif | Volume | Stockage |
|---|---|---|
| Réactif(UN): | ||
| Solution acidifiante Shikata | Al: Oxydant Shikata | 25ml |
| A2: Solution acide Shikata | 25ml | |
| Réactif(B): | Solution de blanchiment Shikata | 50ml |
| Réactif(C): | Solution acide pour taches d'orcéine | 50ml |
Avant utilisation, mélanger Al avec A2 en quantités égales pour former une solution acidifiante Shikata. Il est prêt à l'emploi.
Introduction
- Description de l'hépatite virale:
- L'hépatite virale est une maladie infectieuse caractérisée par la dégénérescence et la nécrose des cellules parenchymateuses hépatiques induites par les virus de l'hépatite..
- Prévalence du virus de l'hépatite B (VHB):
- Virus de l'hépatite B (VHB) est répandu à l'échelle mondiale.
- AgHBs (Antigène de surface de l'hépatite B) est généralement présent dans le cytoplasme du foie.
- Immunohistochimie pour l'AgHBs et l'AgHBc:
- Actuellement, L'AgHBs et l'AgHBc peuvent être affichés via des techniques d'immunohistochimie.
- Méthodes de coloration pour l’AgHBs:
- Il existe diverses méthodes pour afficher l'AgHBs, y compris la méthode de coloration Shikata Orcein, Méthode Aldéhyde Fuchsine, Méthode Victoria Blue, etc..
- Description de la trousse:
- Ce kit offre simplicité et spécificité dans la coloration de l'AgHBs.
- L'effet de coloration peut varier selon les différents lots de matières premières.
- L'orcéine se combine probablement avec la liaison disulfure de la cystine dans l'AgHBs pour produire de la couleur.
Protocole (Notre référence seulement)
- Fixez le tissu dans 10% formol. Déshydrater et intégrer de manière conventionnelle.
- Coupez la section en 4μm. Déparaffiner et réhydrater de manière conventionnelle.
- Oxydez avec l'oxydant Shikata pour 5 minutes. Rincer légèrement à l'eau.
- Eau de Javel avec la solution de blanchiment Shikata pour 2 minutes pour enlever la couleur de la solution acidifiante Shikata.
- Rincer légèrement à l'eau distillée. Plongez avec 70% légèrement l'éthanol.
- Colorer avec une solution de coloration acide à l'orcéine sous couvert pendant 5 heures ou plus.
- Différencier avec 95% éthanol jusqu'à obtention d'une base marron clair claire.
- Déshydrater rapidement avec de l'éthanol absolu, transparentiser avec du xylène, et sceller avec du résinène.
Résultat
- Substance positive pour l'AgHBs: Brun-rouge à brun foncé
- Arrière-plan: Rouge clair à différents niveaux
Note
- La solution acidifiante Shikata doit être utilisée immédiatement; sinon, son pouvoir d'oxydation sera réduit.
- La solution acide de coloration à l'orcéine doit être restaurée à température ambiante avant utilisation., et il peut être réutilisé plusieurs fois.
- Après coloration pendant 5 heures, supprimer la rubrique, laver le 70% éthanol, puis lavez-le à l'eau distillée, et voir au microscope. Si la coloration est légère, trempe-le dedans 70% l'éthanol, puis colorer avec une solution de coloration acide à l'orcéine. Si nécessaire, il peut être taché pendant la nuit.
- Lors d'une coloration avec de l'orcéine, la lipofuscine a une réaction positive. La différence est que la lipofuscine a une couleur plus foncée, présentant de petites particules de taille uniforme dans le cytoplasme; L'AgHBs a une couleur moins profonde, présentant de fines particules.
- Pour la sécurité et la santé, veuillez porter une tenue de laboratoire et des gants jetables.
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