Sanshibio Taq ADN polymérase (Mg2 + gratuit) 10 X 5000U

Taq ADN polymérase

Numéro d'article：E001B Spécification：500U/1000U/5000U Storage: Stocker à -20 ° C

Présentation du produit：

This product is Taq DNA Polymerase, commonly referred to as Taq enzyme, which is one of the most widely used DNA polymerases. It is expressed in Escherichia coli with the cloned gene of Thermus aquaticus DNA Polymerase and then purified through multiple steps. Le RAP products amplified using this product have an added A base at the 3′ fin, allowing for cloning into T vectors.

Product Features:

Sanshibio Taq DNA Polymerase is an improved and screened Taq DNA polymerase. In addition to the characteristics of the traditional enzyme itself, it also has broader advantages after repeated testing.
D'abord, Sanshibio’s Taq enzyme is equipped with a basic universal buffer, which has a good amplification effect on common plant, animal, microbial, etc.. DNA or cDNA; it is compatible with the buffers of most mainstream manufacturers on the market; the modified The enzyme combined with the basic universal buffer can achieve stronger resistance, and can tolerate DNA crude extracts containing a large amount of impurities; it has stronger stability and can tolerate multiple freeze-thaw cycles; for some low-abundance templates, it can be used The amount of enzyme added is reduced, and the amount of magnesium ions is appropriately increased to achieve more sensitive detection.

Contenu du produit：

Composants	E001B-01（500U）	E001B-02（1000U）	E001B-03（5000U）
Taq DNA Polymerase（5U/µL）	100µL	200µL	1ml
dNTP Mixture (10mM chacun)	100µL	200µL	1ml
10× PCR Buffer (Mg2+ free)	1ml	2× 1mL	10× 1mL
MgCl2 (25mM)	1ml	2× 1mL	10× 1mL

Stockage:

Stocker à -20 ° C, avec une durée de conservation minimale de 12 mois.

Définition de l'activité:

Using activated largemouth bass sperm DNA as a template/primer, the intake of 10 nmol of total nucleotides as acid-insoluble material within 30 minutes at 74°C is defined as 1 unit of activity (U).

Contrôle de qualité:

Ce produit a subi des tests de qualité et est exempt d'activité d'endonucléase, activité exonucléase, et contamination de la ribonucléase. L'ADN génomique hôte résiduel est ci-dessous 10 copies.

Utilisation des produits:

Amplification de l'ADN en utilisant la méthode PCR; Détermination de la séquence d'ADN.

Instructions d'utilisation:

• Dissolve and mix all required solutions for the PCR reaction and place them on an ice bath or in a cooler. It is recommended to aliquot the PCR reaction mixture to avoid repeated freeze-thaw cycles.
• It is advisable to set up the PCR reaction system on an ice bath or in a cooler, Suivant le système de réaction recommandé pour référence.
• Excessive template DNA can lead to nonspecific PCR products. Recommended template amounts for different types of templates in a 50µL reaction volume are as follows:

Genomic DNA from Animals and Plants: 0.1-1µg;

Genomic DNA from Escherichia coli: 10-100de;

ADN plasmidique: 0.1-10de.

Système de réaction recommandé:

Réactifs	50µl Volume du système	Concentration finale
Taq ADN polymérase	1µL	0.1U
10× PCR Buffer (Mg2+ free)	5µL	1×
MgCl2 (25mM)	4µL	2mM
dNTP Mixture (10mM chacun)	1µL	0.2mM chacun
Apprêt je (10µm)	1µL	0.2µm
Amorce II (10µm)	1µL	0.2µm
ADN de modèle	1µL	-
DDH2O	To 50µL	-

Note: The amounts of each component in the reaction system can be adjusted according to actual requirements.

• Pipette soigneusement et mélanger le système de réaction préparé à l'aide d'une pipette, sceller les tubes PCR avec des bouchons, les qualifier de manière appropriée, et centrifugez brièvement à température ambiante.
• Placer les tubes PCR préparés dans le Appareil PCR, Réglez les conditions de réaction, et initier la réaction de PCR.

Conditions de réaction:

Méthode / étapes	Délai de temps	Cycles
95℃ (Pré-dénaturation)	2-5min	1
95℃ (Dénaturation)	30seconde	25-35 Cycles
55℃ -60 ℃ (Recuit)	30seconde
72℃ (Extension)	1min
72℃ (Prolongation finale)	10min	1
4℃（Hold）	∞	-

Note: Les conditions de réaction peuvent être ajustées et optimisées en fonction des exigences réelles.

Précautions:

1. Le temps d'extension peut être ajusté en fonction de facteurs tels que la longueur et le contenu GC du produit PCR. Le temps d'extension par KB du produit est étroitement lié à la complexité du modèle: Les modèles simples nécessitent 20 secondes, Les modèles typiques nécessitent 30 secondes, et les modèles complexes nécessitent 1 minute.
2. La configuration de la réaction de PCR doit être adaptée à différentes conditions telles que le modèle, amorces, durée du produit PCR, et le contenu GC. The final concentration of primers typically falls within the range of 0.1-1.0μM. La concentration de matrice d'ADN peut être ajustée en conséquence. Pour des modèles complexes ou un contenu GC élevé, Il est recommandé de prolonger les temps de pré-dénaturation / dénaturation ou d'extension et d'augmenter les températures de dénaturation / recuit.
3. Utilisez des zones et des pipettes désignées avant et après l'amplification, porter des gants, et les changer fréquemment. Après avoir terminé la réaction de PCR, N'ouvrez pas immédiatement les tubes de réaction. Permettez-leur de refroidir suffisamment à 4 ° C ou -20 ° C avant l'ouverture pour minimiser le risque de contamination des produits de PCR à l'environnement de laboratoire.