Introduction
Le système HiPure Mini fournit un, simple, et rentable ADN plasmidique méthode miniprep pour les applications de routine en laboratoire de biologie moléculaire. Les mini kits HiPure Plasmid Mini utilisent la technologie des membranes de silice pour éliminer les étapes fastidieuses associées aux résines ou aux boues en vrac.. L'ADN plasmidique purifié avec les mini kits est immédiatement prêt à l'emploi. L’extraction du phénol et la précipitation de l’éthanol ne sont pas nécessaires, et l'ADN plasmidique de haute qualité est élué dans un petit volume de tampon Tris ou d'eau.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolement jusqu'à 70 μg d'ADN plasmidique à partir de 5 à 15 ml de culture bactérienne |
| Applications | Digestion enzymatique, séquençage, RAP, clonage, etc.. |
| Méthode de purification | Mini colonne de rotation |
| Technologie de purification | Technologie de la silice |
| Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
| Échantillon type | Plasmide conventionnel, plasmide de moins de 30 Ko |
| Montant de l'échantillon | Plasmide à copie élevée: 1-5ml de milieu de culture
Plasmide à faible copie : 5-10ml de milieu de culture |
| Rendement | 20-80µg |
| Volume d'élution | ≥75μl |
| Temps par course | Complet 1-24 des échantillons dans 30 minutes |
| Volume de liquide transporté par colonne | 800µl |
| Rendement de liaison de la colonne | 70µg |
Principe
La procédure HiPure Plasmid est basée sur la lyse alcaline des cellules bactériennes suivie de l'adsorption de l'ADN sur silice en présence de sel élevé.. La membrane de silice unique utilisée dans le kit remplace complètement les suspensions de verre ou de silice pour les mini-préparations d'ADN plasmidique. La procédure consiste à 3 étapes de base: Préparation et clarification d'un lysat bactérien par méthode alcaline，puis transférez le surnageant dans la colonne pour lier l'ADN. Après avoir lavé les protéines et autres impuretés, l'acide nucléique a finalement été élué avec un tampon à faible teneur en sel (10mmTris, pH9,0, 0.5mmEDTA).
Avantages
- Haute pureté – le plasmide purifié peut être directement utilisé dans le séquençage, digestion enzymatique et PCR, etc..
- Rapide – ça prend seulement 2 minutes pour obtenir le surnageant par solution optimisée (10 minutes pour d'autres marques)
- Haut rendement – jusqu'à 70 µg de plasmide peuvent être liés dans une colonne
Contenu du kit
| Contenu | P100202 | P100203 |
| Temps de purification | 50 Préparations | 250 Préparations |
| RNase A | 5 mg | 20 mg |
| Tampon P1 | 30 ml | 140 ml |
| Tampon P2 | 30 ml | 140 ml |
| Tampon P3 | 40 ml | 200 ml |
| Tampon PW1 | 30 ml | 140 ml |
| Tampon PW2* | 12 ml | 50 ml |
| Tampon d'élution | 15 ml | 30 ml |
| HiPure DNA Mini Colonnes III | 50 | 250 ml |
| 2 Tubes de prélèvement ml | 50 | 250 ml |
Stockage et stabilité
Les composants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15-25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. Si des précipités se forment dans les tampons, réchauffer à 37 ℃ pour dissoudre. Après ajout de RNase A，Le tampon P1 est stable pendant 6 mois lorsqu'il est conservé à 2-8°C.
Guide d'achat
| Nom | N° DE CHAT | Montant de l'échantillon | Type de colonne | Volume d'élution | Rendement | Temps par course | Exigences de la centrifugeuse |
| Mini kit plasmidique HiPure | P1001 | 1-5ml | 1.5colonne ml | 30-50µl | 5–35µg/5ml | ≤ 30 minutes | petite centrifugeuse |
| HiPure Plasmide Mini Kit II | P1002 | 5-15ml | 1.5colonne ml | 75-100µl | 20-80µg/15ml | ≤ 30 minutes | petite centrifugeuse |
| HiPure Plasmide Plus 96 Trousse | P1006 | 1-1.5ml | 96 bien plaque | 70-150µl | 1-15µg/1ml | ≤60 minutes | 96 centrifugeuse à plaque à puits |
| Kit Midi Plasmide HiPure Fastfilter | P1013 | 30-50ml | 15colonne ml | 0.3-0.8ml | 50–250µg/50ml | ≤60 minutes | 15ml centrifugeuse |
| Kit Maxi Plasmide HiPure Fastfilter | P1014 | 100-200ml | 50colonne ml | 0.5-1.5ml | 0.4–1mg/200ml | ≤60 minutes | 50ml centrifugeuse |
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