Introduction
HiPure Plasmid EF Mini Kit Overview:
- Technology Integration:
- Combines HiPure technology with Magen’s innovative Endotoxin Removal Technology (ETR) to ensure high-quality plasmid Purification de l'ADN.
- Endotoxin Management:
- Features a specially formulated buffer designed to prevent endotoxins from binding to the HiPure matrix, significantly reducing endotoxin levels in the final DNA product.
- Application Suitability:
- Provides plasmid DNA ideal for eukaryotic transfection and in vitro experiments, especially where low endotoxin levels are critical.
- Impact of Endotoxin Contamination:
- Endotoxin contamination can drastically lower transfection efficiencies, particularly in endotoxin-sensitive cell lines.
- Clinical Relevance:
- In contexts such as gene therapy, controlling endotoxin levels is crucial due to the potential for serious adverse effects like fever, endotoxin shock syndrome, and negative impacts on in vitro transfection into immune cells.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolement jusqu'à 70 µg d'ADN plasmidique sans endotoxine à partir de 10 à 15 ml de culture bactérienne |
| Applications | Cell transfection, animal injection, etc.. |
| Méthode de purification | Mini colonne de rotation |
| Technologie de purification | Technologie de la silice |
| Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
| Échantillon type | Plasmide conventionnel |
| Montant de l'échantillon | Plasmide à copie élevée: 10ml de milieu de culture
Low copy number plasmid : 10-15ml de milieu de culture |
| Rendement | 10-70µg |
| Volume d'élution | ≥75μl |
| Temps par course | ≤40 minutes |
| Volume de liquide transporté par colonne | 800µl |
| Rendement de liaison de la colonne | 70µg |
Principe
La procédure HiPure Plasmid est basée sur la lyse alcaline des cellules bactériennes suivie de l'adsorption de l'ADN sur silice en présence de sel élevé.. La membrane de silice unique utilisée dans le kit remplace complètement les suspensions de verre ou de silice pour les mini-préparations d'ADN plasmidique. La procédure consiste à 3 étapes de base: Préparation et clarification d'un lysat bactérien par méthode alcaline,puis transférez le surnageant dans la colonne pour lier l'ADN. Après avoir lavé les protéines et autres impuretés, l'acide nucléique a finalement été élué avec un tampon à faible teneur en sel (10mmTris, pH9,0, 0.5mmEDTA).
Avantages
- Haute pureté – le plasmide purifié peut être directement utilisé dans le séquençage, enzyme digestion and RAP, etc..
- Rapide – silica gel column purification is much faster than ion exchange
- Haut rendement – up to 70μg plasmid can be binded in one column
- Low endotoxin content – the obtained plasmid can be directly used in cell transfection and animal injection
Contenu du kit
| Contenu | P115402 | P115403 |
| Temps de purification | 50 Préparations | 250 Préparations |
| RNase A | 5 mg | 20 mg |
| Tampon P1 | 30 ml | 140 ml |
| Tampon P2 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer LEN3 | 15 ml | 70 ml |
| Buffer LN4 | 50 ml | 250 ml |
| Buffer LN5 | 30 ml | 140 ml |
| Tampon PW1 | 30 ml | 140 ml |
| Buffer PW2 | 12 ml | 50 ml |
| Tampon d'élution | 15 ml | 30 ml |
| HiPure DNA Mini Colonnes III | 50 | 250 |
| 2 Tubes de prélèvement ml | 50 | 250 |
Stockage et stabilité
Instructions de stockage:
- General Storage:
- Kit components can be stored dry at room temperature (15–25°C).
- Stable pour au moins 18 mois dans ces conditions.
- Handling Precipitates:
- Si des précipités se forment dans les tampons, warm at 37°C to dissolve.
- Specific Storage for Buffer P1 with RNase A:
- Après ajout de RNase A, Le tampon P1 est stable pendant 6 months when stored at 2–8°C.
Guide d'achat
| Nom | N° DE CHAT | Montant de l'échantillon | Type de colonne | Volume d'élution | Rendement | Temps par course | Exigences de la centrifugeuse |
| HiPure Plasmide EF Mini Kit | P1154 | 10-15ml | 1.5colonne ml | ≥75μl | 10–70µg/15ml | ≤40 minutes | petite centrifugeuse |
| HiPure Plasmide EF 96 Trousse | P1157 | 1-5ml | 96 bien plaque | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60 minutes | 96 centrifugeuse à plaque à puits |
| Kit HiPure Plasmid EF Midi | P1231 | 30-50ml | 15colonne ml | ≥0.4ml | 10-500μg/50ml | ≤60 minutes | 15ml centrifugeuse |
| HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ml | 50colonne ml | ≥0.8ml | 100–1500µg/200ml | ≤60 minutes | 50ml centrifugeuse |
| HiPure Plasmid EF Méga Kit | P1116 | 500ml | 50colonne ml | ≥0.8ml | 10mg/500ml | ≤70 minutes | 50ml centrifugeuse |






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