Introduction
The HiPure Midi system provides a fast, simple, et rentable ADN plasmidique midiprep method for routine molecular biology laboratory applications. HiPure Midiprep Kits use silica membrane technology to eliminate the cumbersome steps associated with loose resins or slurries. L'ADN plasmidique purifié avec les mini kits est immédiatement prêt à l'emploi. L’extraction du phénol et la précipitation de l’éthanol ne sont pas nécessaires, et l'ADN plasmidique de haute qualité est élué dans un petit volume de tampon Tris ou d'eau.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolation up to 500µg endotoxin-free plasmid DNA from 25-50ml bacterial culture |
| Applications | Cell transfection, animal injection, etc.. |
| Méthode de purification | Midi colonne de rotation |
| Technologie de purification | Technologie de la silice |
| Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
| Échantillon type | Plasmide conventionnel, plasmide de moins de 30 Ko |
| Montant de l'échantillon | 25-50ml |
| Rendement | 10-500µg |
| Volume d'élution | ≥0.4ml |
| Temps par course | ≤60 minutes |
| Volume de liquide transporté par colonne | 4ml |
| Rendement de liaison de la colonne | 250µg |
Principe
La procédure HiPure Plasmid est basée sur la lyse alcaline des cellules bactériennes suivie de l'adsorption de l'ADN sur silice en présence de sel élevé.. La membrane de silice unique utilisée dans le kit remplace complètement les suspensions de verre ou de silice pour les mini-préparations d'ADN plasmidique. La procédure consiste à 3 étapes de base: Préparation et clarification d'un lysat bactérien par méthode alcaline，puis transférez le surnageant dans la colonne pour lier l'ADN. Après avoir lavé les protéines et autres impuretés, l'acide nucléique a finalement été élué avec un tampon à faible teneur en sel (10mmTris, pH9,0, 0.5mmEDTA).
Avantages
- Haute pureté – le plasmide purifié peut être directement utilisé dans le séquençage, enzyme digestion and RAP, etc..
- Rapide – silica gel column purification is much faster than ion exchange
- Haut rendement – up to 250μg plasmid can be binded in one column
- Low endotoxin content – the obtained plasmid can be directly used in cell transfection and animal injection
Contenu du kit
| Contenu | P123102 | P123102B |
| Temps de purification | 50 Préparations | 50 Préparations |
| RNase A | 30 mg | 30 mg |
| Buffer E1 | 150 ml | 150 ml |
| Buffer E2 | 150 ml | 150 ml |
| Buffer E3 | 150 ml | 150 ml |
| Buffer E4 | 150 ml | 150 ml |
| Buffer E5 | 150 ml | 150 ml |
| Tampon PW2* | 50 ml | 50 ml |
| Tampon d'élution | 30 ml | 30 ml |
| MaxPure EF Mini Column | 50 | 50 |
| 2 Tubes de prélèvement ml | 50 | 50 |
| Lysate Clear Midi Syringe | 50 | 50 |
| Extend Tubes | 50 | 50 |
| 50ml Centrifuge Tubes | 50 | |
| Support Tubes | 50 |
Stockage et stabilité
Les composants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15-25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. Si des précipités se forment dans les tampons, réchauffer à 37 ℃ pour dissoudre. After addition of RNase A and optional LyseBlue reagent, Le tampon P1 est stable pendant 6 months when stored at 2–8°C.
Guide d'achat
| Nom | N° DE CHAT | Montant de l'échantillon | Type de colonne | Volume d'élution | Rendement | Temps par course | Exigences de la centrifugeuse |
| HiPure Plasmide EF Mini Kit | P1154 | 10-15ml | 1.5colonne ml | ≥75μl | 10–70µg/15ml | ≤40 minutes | petite centrifugeuse |
| HiPure Plasmide EF 96 Trousse | P1157 | 1-5ml | 96 bien plaque | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60 minutes | 96 centrifugeuse à plaque à puits |
| Kit HiPure Plasmid EF Midi | P1231 | 30-50ml | 15colonne ml | ≥0.4ml | 10-500μg/50ml | ≤60 minutes | 15ml centrifugeuse |
| HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ml | 50colonne ml | ≥0.8ml | 100–1500µg/200ml | ≤60 minutes | 50ml centrifugeuse |
| HiPure Plasmid EF Méga Kit | P1116 | 500ml | 50colonne ml | ≥0.8ml | 10mg/500ml | ≤70 minutes | 50ml centrifugeuse |
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