Introduction
The HiPure ADN plasmidique Mega Kits combine the power of HiPure technology with the time-tested consistency of alkaline-FDS lysis of bacterial cells to deliver high-quality DNA. HiPure DNA columns facilitate the binding, washing and elution steps thus enabling multiple samples to be simultaneously processed. Plasmid DNA purified by this system is suitable for automated fluorescent DNA sequencing, restriction endonuclease digestion, transfection of mammalian cells, and other manipulations. Jusqu'à 10 mg high copy number plasmid DNA can be purified from 500 mL overnight culture.
Détails
Caractéristiques
| Caractéristiques | Caractéristiques |
| Fonctions principales | Isolement jusqu'à 10 mg d'ADN plasmidique sans endotoxine à partir de 500 ml de culture bactérienne |
| Applications | Cell transfection, animal injection, etc.. |
| Méthode de purification | Mega colonne de rotation |
| Technologie de purification | Technologie de la silice |
| Méthode de processus | Manuel (centrifugation ou vide) |
| Échantillon type | Plasmide conventionnel, plasmide de moins de 30 Ko |
| Montant de l'échantillon | Plasmide à copie élevée: 500ml de milieu de culture |
| Rendement | 10mg |
| Volume d'élution | ≥0.8ml |
| Temps par course | ≤70 minutes |
| Volume de liquide transporté par colonne | 50ml |
| Rendement de liaison de la colonne | 10mg |
Principe
La procédure HiPure Plasmid est basée sur la lyse alcaline des cellules bactériennes suivie de l'adsorption de l'ADN sur silice en présence de sel élevé.. La membrane de silice unique utilisée dans le kit remplace complètement les suspensions de verre ou de silice pour les mini-préparations d'ADN plasmidique. La procédure consiste à 3 étapes de base: Préparation et clarification d'un lysat bactérien par méthode alcaline,puis transférez le surnageant dans la colonne pour lier l'ADN. Après avoir lavé les protéines et autres impuretés, l'acide nucléique a finalement été élué avec un tampon à faible teneur en sel (10mmTris, pH9,0, 0.5mmEDTA).
Avantages
- Haute pureté – le plasmide purifié peut être directement utilisé dans le séquençage, enzyme digestion and RAP, etc..
- Rapide – silica gel column purification is much faster than ion exchange
- Haut rendement – up to 10mg plasmid can be binded in one column
- Low endotoxin – the obtainedplasmid can be directly used for cell transfection and animal injection, etc..
Contenu du kit
| Contenu | P111602 | P111603 |
| Temps de purification | 10 Préparations | 50 Préparations |
| RNase A | 60 mg | 2 X 150 mg |
| Buffer E1 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Buffer E2 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Buffer E3 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Buffer E4 | 220 ml | 2 X 550 ml |
| Buffer E5 | 120 ml | 550 ml |
| Buffer PW2 | 25 ml | 2 X 100 ml |
| Tampon d'élution | 30 ml | 120 ml |
| HiPure EF Maxi Columns | 10 | 50 |
| Lysate Clear Maxi Syringe | 10 | 50 |
| 50 Tubes de prélèvement ml | 20 | 100 |
Stockage et stabilité
Les composants du kit peuvent être stockés au sec à température ambiante (15-25°C) et sont stables pendant au moins 18 mois dans ces conditions. Si des précipités se forment dans les tampons, réchauffer à 37 ℃ pour dissoudre.
Guide d'achat
| Nom | N° DE CHAT | Montant de l'échantillon | Type de colonne | Volume d'élution | Rendement | Temps par course | Exigences de la centrifugeuse |
| HiPure Plasmide EF Mini Kit | P1154 | 10-15ml | 1.5colonne ml | ≥75μl | 10–70µg/15ml | ≤40 minutes | petite centrifugeuse |
| HiPure Plasmide EF 96 Trousse | P1157 | 1-5ml | 96 bien plaque | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60 minutes | 96 centrifugeuse à plaque à puits |
| Kit HiPure Plasmid EF Midi | P1231 | 30-50ml | 15colonne ml | ≥0.4ml | 10-500μg/50ml | ≤60 minutes | 15ml centrifugeuse |
| HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ml | 50colonne ml | ≥0.8ml | 100–1500µg/200ml | ≤60 minutes | 50ml centrifugeuse |
| HiPure Plasmid EF Méga Kit | P1116 | 500ml | 50colonne ml | ≥0.8ml | 10mg/500ml | ≤70 minutes | 50ml centrifugeuse |






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