- Cuantitativo PCR (qPCR) Descripción general:
- qPCR, también conocido como PCR en tiempo real, Es una tecnología ampliamente utilizada para el análisis preciso de la expresión genética..
- Se puede clasificar en métodos basados en colorantes y métodos basados en sondas., siendo los basados en tintes los más populares, conveniente, y rentable.
- La qPCR basada en tintes monitorea la fluorescencia en tiempo real de la unión del tinte al ADN bicatenario para medir la amplificación del ADN indirectamente durante cada ciclo..
- valor ct (valor cq) se determina cuando la señal de fluorescencia se detecta claramente sobre el fondo, que se puede utilizar para evaluar la abundancia objetivo o calcular cantidades absolutas.
- Mezcla maestra SYBR Green 2xqPCR:
- Proporciona una especificidad superior, robusta eficiencia de amplificación, reproducibilidad ideal, y estabilidad en la cuantificación del ADN objetivo o del ADNc.
- Es una premezcla 2X que contiene hot-start. polimerasa taq combinado con un anticuerpo para una especificidad preferible y una alta velocidad de amplificación.
- SYBR Green I en la mezcla emite fluorescencia cuando se une al ADN bicatenario amplificado en cada ciclo., permitiendo la cuantificación indirecta de productos de amplificación en tiempo real.
- Utilice la configuración del modo de escaneo SYBR o SYBR/FAM en el instrumento en tiempo real.
- Limitaciones de la qPCR basada en colorantes:
- SYBR Green I puede intercalarse en cualquier ADN bicatenario, incluyendo dímeros de cebador u otros productos no deseados, causando fluorescencia inespecífica.
- Para confirmar la especificidad, realizar un análisis de la curva de fusión después de la amplificación, donde un pico agudo alrededor de la temperatura de recocido es ideal.
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Mezcla SYBR Green 2xqPCR 1ml *10
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