| Atributo | Detalles |
|---|---|
| Gato | G1492 |
| Tamaño | 4 x 10 ml, 4 x 20 ml |
| Almacenamiento | -20°C, evitar la luz, valido para 3 meses |
Componentes del kit:
| Reactivo | 4x10ml | 4x20ml | Almacenamiento |
|---|---|---|---|
| Reactivo(A): Fijador de trampas | 50mililitros | 100mililitros | 2-8°C, evitar la luz |
| Reactivo(B): | |||
| Solución de incubación de trampa | B1: AS-Bi Buffer 1 ml | 2x1ml | -20°C, evitar la luz |
| B2: Solución GBC 0.1 ml | 2×0.2mililitros | -20°C, evitar la luz | |
| B3: Trampa búfer 9 ml | 18mililitros | RT, evitar la luz | |
| Reactivo(C): Solución de hematoxilina | 10mililitros | 20mililitros | 2-8°C, evitar la luz |
| Reactivo(D): Solución verde metilo | 10mililitros | 20mililitros | RT, evitar la luz |
Introducción:
Fosfatasa ácida (ACP) se distribuye ampliamente en varios tejidos, principalmente en lisosomas, Sirviendo como enzima marcadora. Fosfatasa ácida resistente al tartrato (TRAMPA), encontrado principalmente en macrófagos alveolares humanos y células de bazo de leucemia, se libera en folículos celulares en lugar de la sangre. La trampa en la sangre se origina predominantemente de los osteoclastos, Permitir la evaluación de la función de osteoclasto.
La fosfatasa ácida resistente al tartrato (TRAMPA) El principio del kit de manchas implica la hidrólisis de la fosfatasa ácida con sustrato AS-BI, liberar ácido fosfórico y naftol a pH ácido. Un acoplamiento de naftol con sales de diazo forma productos de color localizados en el citoplasma. La tinción positiva indica actividad resistente al ácido tártarico. Se usa comúnmente para frotis de sangre fresca, manchas celulares, y secciones congeladas.
Materiales autoprovisados:
Agua destilada, Incubadora, Deslizar, Microscopio
Protocolo (solo por referencia):
Para la mancha de sangre o células:
- Frotis seco, FIJA EN TRAP FIJATIVO A 4 ° C PARA 30S-3MINS.
- Lavar con agua destilada, y al aire seco.
- Aplicar solución de incubación de trampa, e incubar a 37 ° C en la oscuridad durante 45-60 minutos. Luego lavar.
- Reiniciar con solución de hematoxilina o solución verde metílica durante 2-3 minutos.
- Ver secciones bajo el microscopio después de lavar o sellarse.
Para la sección congelada:
- Restaurar la sección a 37 ° C por inmersión en agua durante 1-2 minutos.
- Seco al aire, FIJO EN TRAP FIJATIVO AL 1-3 minutos a 4 ° C.
- Lavar con agua destilada, y al aire seco.
- Aplicar solución de incubación de trampa, e incubar a 37 ° C en la oscuridad durante 45-60 minutos. Luego lavar.
- Reiniciar con solución de hematoxilina o solución verde metílica durante 2-3 minutos.
- Ver secciones bajo el microscopio después de lavar o sellarse.
Para la sección de parafina:
- Secciones de despego y rehidrato en alcohol graduado.
- Lavar con agua destilada, y al aire seco.
- Aplicar solución de incubación de trampa, e incubar a 37 ° C en la oscuridad durante 45-60 minutos. Luego lavar.
- Reiniciar con solución de hematoxilina o solución verde metílica durante 2-3 minutos.
Resultado:
| Resultado | Color |
|---|---|
| Positivo | Rojo púrpura |
| Núcleo | Azul o verde |
Significación clínica:
- Ayuda de manchas de trampa para diagnosticar la leucemia de células peludas.
- Se observa tinción positiva en monocitos inmaduros de leucemia aguda.
- Los linfocitos T exhiben tinción de trampa positiva.
- Las células de Gaucher muestran una fuerte tinción positiva.
Nota:
- La solución de incubación de trampa puede perder efectividad rápidamente.
- Reducir el tiempo de exposición para manchar secciones congeladas.
- Use muestras frescas inmediatamente para obtener resultados precisos.
- Almacenar el tejido en fijador a 4 ° C para no más de 24 horas.
- Controlar la temperatura de parafina durante la incrustación para preservar la actividad enzimática.
- Asegurar xileno de alta calidad para evitar la descomposición.
- Use ropa experimental y guantes desechables para la seguridad.
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