Kit de tinte para hierro Solarbio azul de Prusia(con solución de rojo neutro)

Introducción

• Características de la hemosiderina:
  • Derivado de la descomposición de la hemoglobina., Tiene un color amarillo dorado o amarillo parduzco debido al contenido de hierro..
  • Se forma cuando los macrófagos fagocitan los glóbulos rojos y descomponen la hemoglobina en sangre de naranja sin hierro y hemosiderina que contiene hierro..
• Reacción del azul de Prusia de Perls:
  • También conocida como tinción de hemosiderina..
  • Produce un color azul cuando se trata con ferrocianuro de potasio y ácido diluido..
  • Comúnmente visto en fagocitos.’ intersticio, mostrando sales de hierro férrico.
  • Reacción histoquímica clásica., sensible, y excelente para exhibir hierro férrico en tejidos..
  • El principio consiste en separar el hierro férrico de las proteínas utilizando una solución de ferrocianuro de potasio y ácido clorhídrico., formando un compuesto insoluble de azul de Prusia.
  • El ferrocianuro estable de hierro férrico permite volver a teñir con tinte rojo después de la reacción.
• Uso de tintes Perls:
  • Comúnmente utilizado para mostrar lesiones hemorrágicas., especialmente en fagocitos.
  • Ayuda a determinar la deposición de hemosiderina y a distinguirla de otros pigmentos..
  • La solución de tinción es estable., duradero sin precipitaciones, y adecuado para una amplia gama de aplicaciones.
  • Se puede volver a teñir, haciéndolo versátil para diferentes técnicas de tinción.

Componentes del kit

Antes de usar, mezcle partes iguales de A1 y A-2 para formar Perls Stain. No conviene prepararse con antelación.

Materiales proporcionados por uno mismo

10% fijador neutro de formalina, Serie de etanol, Agua destilada, 4% paraformaldehído

Protocolo (solo por referencia)

(1) Para tinción de secciones con parafina

1. Fijar el tejido en 10% fijador natural de formalina, deshidratar, e incrustar.
2. Cortar secciones de 4 µm de espesor, desparafinado a agua destilada, y enjuagar para 1 minuto.
3. Remoje la sección en Perls Stain durante 15-30 minutos. Enjuague completamente en agua destilada durante 2-5 minutos.
4. Tiñe ligeramente el núcleo con una solución de rojo neutro para 15-30 segundos. Enjuague con agua del grifo durante 1-5 segundos.
5. Deshidratar convencionalmente, transparente, y sellar con resineno.

(2) Para tinción de secciones congeladas

1. Sin desparafinar, enjuague directa y rápidamente con agua destilada durante 2-3 minutos.
2. Sigue los demás pasos como cortes en parafina..

(3) Para tinción de células cultivadas

1. Arreglar 4% paraformaldehído para 10-20 minutos.
2. Enjuague con agua del grifo dos veces durante 2 minutos cada vez.
3. Los pasos de la tinción., deshidración, transparencia, y el sellado son los mismos que los pasos de la sección de parafina. Ajustar el tiempo en consecuencia.

Resultado

• Hemosiderina o hierro férrico: Azul
• Núcleo y otros tejidos: Rojo

Control negativo

Tome la misma sección adyacente., desparafinar al agua. Después de la incubación en 5% ácido oxálico para 2-6 horas, siga el mismo procedimiento que el anterior. El resultado debe ser negativo..

Nota

1. Garantizar una desparafinación de secciones limpias..
2. Usar 10% formalina neutra para la fijación de tejidos. La fijación prolongada con formalina común puede dañar los tejidos. Evite los fijadores ácidos, ya que el tratamiento con cromato dificulta la conservación del hierro.
3. Mantener limpios los contenedores y evitar el uso de productos metálicos de hierro.. Utilice agua destilada para lavar secciones y contenedores para evitar la contaminación con hierro..
4. Ajuste el tiempo de teñido de Perls Stain según la muestra..
5. Utilice la misma sección de control positivo para todas las secciones.. El tejido pulmonar de la autopsia es un buen control, que contiene muchos macrófagos positivos para hierro (células de insuficiencia cardiaca).
6. Reemplace la serie de etanol con frecuencia..
7. Para cortes congelados y tinción celular., explorar condiciones experimentales basadas en condiciones específicas. Use ropa experimental y guantes desechables por motivos de salud y seguridad..