Código de producto: C0030
Especificación: 10ml/50ml
Almacenamiento: Conservar en la oscuridad a -20°C, válido por un año.
Introducción del producto:
- Höchst 33342, también conocido como bisbencimida H 33342 o HOE33342, Es un tinte fluorescente azul capaz de penetrar las membranas celulares con baja toxicidad para las células..
- Se utiliza comúnmente para detectar la apoptosis celular., y después de teñir, Las observaciones se pueden realizar mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo..
- Höchst 33342 También se utiliza para tinción nuclear o tinción de ADN de rutina.. Su longitud de onda de excitación máxima es de 346 nm., y la longitud de onda máxima de emisión es de 460 nm. Cuando se une al ADN bicatenario, la longitud de onda de excitación cambia a 350 nm y la longitud de onda de emisión a 461 nm.
- Este Hoechst 33342 La solución de tinción está lista para usar y es adecuada para la tinción nuclear de células fijas o vivas..
Instrucciones de uso:
Para células o tejidos fijos.:
a. Después de la fijación, lavar para quitar el fijador. Si se requiere tinción por inmunofluorescencia, realizarlo primero antes de Hoechst 33342 tinción. Si no se necesita otra tinción, proceder directamente a Hoechst 33342 tinción.
b. Para células adherentes o secciones de tejido., agregue una pequeña cantidad de Hoechst 33342 solución de tinción para cubrir la muestra. Para células suspendidas, añadir tres veces el volumen de la muestra a teñir, mezclar bien, e incubar a temperatura ambiente durante 3-5 minutos.
C. Retire la solución colorante., y lavar 2-3 veces con TBST, PBS, o solución salina fisiológica para 3-5 minutos cada vez.
d. Observar directamente bajo un microscopio de fluorescencia o después de sellar el portaobjetos.. Los núcleos de las células apoptóticas aparecen densamente teñidos o fragmentados..
Para células o tejidos vivos.:
a. Agregue una cantidad adecuada de Hoechst 33342 solución de tinción, asegurando una cobertura total de la muestra a teñir. Agregar 1 ml por cada pocillo de una placa de seis pocillos o 100 μl por cada pocillo de una placa de 96 pocillos.
b. Incubar a una temperatura adecuada para el cultivo celular durante 20-30 minutos. Descartar la solución, lavar 2-3 veces con PBS o medio de cultivo, y luego proceder a la detección de fluorescencia.
Precauciones:
Los tintes fluorescentes son propensos a apagarse.; se recomienda utilizar un medio de montaje anti-decoloración. Intente completar la detección el mismo día después de la tinción., y observar células o tejidos vivos inmediatamente después de la tinción. Por tu seguridad y salud, Utilice ropa de laboratorio y guantes desechables durante la operación..
Reseñas
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