Solarbio Coomassie (bradford) Kit de ensayo de proteínas 50T

Gato no.: PC0015

Tamaño: 50t

Almacenamiento: Conservación del sello después de la apertura., este kit a partir de la fecha del pedido es válido por nueve meses.

Descripción

El colorante Coomassie G-250 es un reactivo colorimétrico utilizado para la detección y cuantificación de proteínas totales.. En un medio ácido, el colorante Coomassie se une a las proteínas provocando un cambio inmediato en la absorción máxima de 465 nm a 595 nm con un cambio de color concomitante de verde a azul.. En un cierto rango de concentración, el valor de absorbancia A595 medido es directamente proporcional a la concentración de proteína.

Protocolo

• MicroplataLector
  1. Disolver completamente el estándar BSA, diluir 10ul a 250ul, la concentración final de 0,2 mg/ml. El tampón de dilución dependía de la muestra de proteína medida.. Por simplicidad, Se sugiere utilizar NaCl al 0,9% o PBS..
  2. 5×G250mezclar bien antes de 1ml 5×G250 diluido con 4ml de ddH2O. 1×La solución G250 puede ahorrar una semana a 4 ℃.
  3. El estándar según 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, y 20 ul respectivamente añadidos a placas de 96 pocillos, y dilución de PBS para complementar.
  4. Diluir la muestra(preparar algunos gradientes, como 2 veces, 4 veces, 8 Dilución de veces), y agregue 20ul de muestra a 96 Bueno. Para evitar errores, Los puntos de muestra deben establecerse después de la línea estándar de 1/2.
  5. Añadir 200ul diluidos 1×G250 a cada pocillo, temperatura ambiente para 3-5 minutos.
  6. Determinación de la absorbancia.
  7. Según la curva estándar, calcule la proteína de la muestra.

• UV-Visespectrofotómetro

1. 8*10Ml tubo de centrífuga(o más) y etiquetado con 1~8.
2. Diluir 100 ul de BSA con 2,4 ml de PBS a 2 mg/ml.
3. 5×G250 mezclar bien antes de usar. 1ml 5×G250 diluido con 4ml ddH2O. 1×La solución G250 puede ahorrar una semana a 4℃.
4. Añadir reactivos según la siguiente tabla. (cada pocillo 5ml, el sobrante se utiliza para limpiar la cubeta)

5. Mida el valor OD después 3 minutos de reacción. Para garantizar la precisión del experimento., mida el valor OD cada 2 minutos

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