Sanshibio Taq ADN polimerasa (Mg2+ gratis) 10 x 5000u

ADN polimerasa taq

Artículo No：E001B Especificación：500U/1000U/5000U Storage: Conservar a -20°C

Introducción del producto：

This product is Taq DNA Polymerase, commonly referred to as Taq enzyme, which is one of the most widely used DNA polymerases. It is expressed in Escherichia coli with the cloned gene of Thermus aquaticus DNA Polymerase and then purified through multiple steps. El PCR products amplified using this product have an added A base at the 3′ fin, allowing for cloning into T vectors.

Características del producto:

Sanshibio Taq DNA Polymerase is an improved and screened Taq DNA polymerase. In addition to the characteristics of the traditional enzyme itself, it also has broader advantages after repeated testing.
Primero, Sanshibio’s Taq enzyme is equipped with a basic universal buffer, which has a good amplification effect on common plant, animal, microbial, etc.. DNA or cDNA; it is compatible with the buffers of most mainstream manufacturers on the market; the modified The enzyme combined with the basic universal buffer can achieve stronger resistance, and can tolerate DNA crude extracts containing a large amount of impurities; it has stronger stability and can tolerate multiple freeze-thaw cycles; for some low-abundance templates, it can be used The amount of enzyme added is reduced, and the amount of magnesium ions is appropriately increased to achieve more sensitive detection.

Contenido del producto：

Componentes	E001B-01（500U）	E001B-02（1000U）	E001B-03（5000U）
Taq DNA Polymerase（5U/µL）	100µL	200µL	1mililitros
dNTP Mixture (10mm cada uno)	100µL	200µL	1mililitros
10× PCR Buffer (Mg2+ free)	1mililitros	2× 1mL	10× 1mL
MgCl2 (25milímetro)	1mililitros	2× 1mL	10× 1mL

Almacenamiento:

Conservar a -20°C, con una vida útil mínima de 12 meses.

Activity Definition:

Using activated largemouth bass sperm DNA as a template/primer, the intake of 10 nmol of total nucleotides as acid-insoluble material within 30 minutes at 74°C is defined as 1 unit of activity (Ud.).

Control de calidad:

Este producto ha sufrido pruebas de calidad y está libre de actividad de endonucleasa, actividad de exonucleasa, y contaminación por ribonucleasa. El ADN genómico del huésped residual está debajo 10 copias.

Uso de productos:

Amplificación de ADN utilizando el método de PCR; Determinación de la secuencia de ADN.

Instrucciones de uso:

• Dissolve and mix all required solutions for the PCR reaction and place them on an ice bath or in a cooler. It is recommended to aliquot the PCR reaction mixture to avoid repeated freeze-thaw cycles.
• It is advisable to set up the PCR reaction system on an ice bath or in a cooler, Siguiendo el sistema de reacción recomendado como referencia.
• Excessive template DNA can lead to nonspecific PCR products. Recommended template amounts for different types of templates in a 50µL reaction volume are as follows:

Genomic DNA from Animals and Plants: 0.1-1µg;

Genomic DNA from Escherichia coli: 10-100ng;

ADN plásmido: 0.1-10ng.

Sistema de reacción recomendado:

Reactivos	50µL de volumen del sistema	Concentración final
ADN polimerasa taq	1µL	0.1Ud.
10× PCR Buffer (Mg2+ free)	5µL	1×
MgCl2 (25milímetro)	4µL	2milímetro
dNTP Mixture (10mm cada uno)	1µL	0.2mm cada uno
Primer yo (10µm)	1µL	0.2µm
Primer II (10µm)	1µL	0.2µm
Plantilla ADN	1µL	-
Ddh2oh	To 50µL	-

Nota: The amounts of each component in the reaction system can be adjusted according to actual requirements.

• Pipeta a fondo y mezcle el sistema de reacción preparado con una pipeta, Selle los tubos de PCR con tapas, etiquetarlos apropiadamente, y centrifugarse brevemente a temperatura ambiente.
• Coloque los tubos de PCR preparados en el máquina de PCR, Establecer las condiciones de reacción, e iniciar la reacción de PCR.

Condiciones de reacción:

Método/pasos	Ajuste de tiempo	Ciclos
95℃ (Preenaturación)	2-5mín.	1
95℃ (Desnaturalización)	30segundo	25-35 Ciclos
55℃ -60 ℃ (Recocido)	30segundo
72℃ (Extensión)	1mín.
72℃ (Extensión final)	10mín.	1
4℃（Hold）	∞	-

Nota: Las condiciones de reacción se pueden ajustar y optimizar de acuerdo con los requisitos reales.

Precauciones:

1. El tiempo de extensión se puede ajustar según factores como la longitud y el contenido de GC del producto PCR. El tiempo de extensión por kb del producto está estrechamente relacionado con la complejidad de la plantilla: Las plantillas simples requieren 20 segundos, Las plantillas típicas requieren 30 segundos, y las plantillas complejas requieren 1 minuto.
2. La configuración de la reacción de PCR debe adaptarse a diferentes condiciones, como la plantilla., cebadores, Longitud del producto PCR, y contenido de GC. The final concentration of primers typically falls within the range of 0.1-1.0μM. La concentración de la plantilla de ADN se puede ajustar en consecuencia. Para plantillas complejas o alto contenido de GC, Se recomienda prolongar los tiempos de denaturación/desnaturalización o extensión y aumentar las temperaturas de desnaturalización/recocido.
3. Use áreas y pipetas designados antes y después de la amplificación, usar guantes, y cámbalos con frecuencia. Después de completar la reacción de PCR, No abra los tubos de reacción inmediatamente. Permita que se enfríen lo suficiente a 4 ° C o -20 ° C antes de abrir para minimizar el riesgo de contaminación del producto de PCR al entorno de laboratorio.