Introducción
El filtro rápido HiPure ADN plásmido Los kits Midi combinan el poder de la tecnología HiPure con la consistencia comprobada de los alcalinos.-Ficha de datos de seguridad (MSDS) Lisis de células bacterianas para producir ADN de alta calidad.. Las columnas HiPure DNA facilitan la unión, pasos de lavado y elución que permiten procesar múltiples muestras simultáneamente. Este sistema también incluye un cartucho filtrante especial que reemplaza el paso de centrifugación posterior a la lisis alcalina.. El ADN plasmídico purificado por este sistema es adecuado para la secuenciación automatizada de ADN fluorescente., digestión con endonucleasa de restricción, transfección de células de mamíferos, y otras manipulaciones. Hasta 250 µg de ADN plasmídico con alto número de copias o 10-75 Se pueden purificar µg de ADN plasmídico con un número de copias bajo a partir de 15-50 ml de cultivo nocturno.
Detalles
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
| Funciones principales | Aislamiento de hasta 250 μg de ADN plasmídico a partir de 30-50 ml de cultivo bacteriano |
| Aplicaciones | digestión enzimática, secuenciación, PCR y etiquetado, etc.. |
| Método de purificación | midi columna de giro |
| Tecnología de purificación | tecnología de sílice |
| método de proceso | Manual (centrifugación o vacío) |
| Tipo de ejemplo | Plásmido convencional, plásmido de menos de 30 KB |
| Cantidad de muestra | 30-50ml |
| Producir | 50-250µg |
| Volumen de elución | ≥300μl |
| Tiempo por carrera | ≤60 minutos |
| Volumen de transporte de líquido por columna | 4ml |
| Rendimiento de unión de la columna | 250µg |
Principio
El procedimiento HiPure Plasmid se basa en la lisis alcalina de células bacterianas seguida de la adsorción de ADN en sílice en presencia de un alto contenido de sal.. La exclusiva membrana de sílice utilizada en el kit reemplaza completamente las suspensiones de vidrio o sílice para minipreparaciones de ADN plasmídico.. El procedimiento consiste en 3 Pasos básicos: Preparación y aclaración de un lisado bacteriano por método alcalino.，luego transfiera el sobrenadante a la columna para unir el ADN.. Después del lavado de proteínas y otras impurezas., El ácido nucleico finalmente se eluyó con un tampón bajo en sal. (10mm tris, pH9.0, 0.5mmEDTA).
Ventajas
- Alta pureza – El plásmido purificado se puede utilizar directamente en la secuenciación., digestión enzimática y PCR, etc..
- Rápido – solo se necesita 15-60 minutos para completar el aislamiento
- Alto rendimiento – Se pueden unir hasta 70 µg de plásmido en una columna.
Contenido del kit
| Contenido | P101302 | P101303 |
| Tiempos de purificación | 25 preparativos | 100 preparativos |
| ARNasa A | 10 mg | 40 mg |
| Búfer P1 | 80 ml | 300 ml |
| Tampón P2 | 80 ml | 300 ml |
| Búfer LEN3 | 40 ml | 150 ml |
| Búfer GBT | 60 ml | 250 ml |
| Búfer PW1 | 60 ml | 250 ml |
| Búfer PW2 | 20 ml | 100 ml |
| Tampón de elución | 30 ml | 120 ml |
| Columnas Midi HiPure DNA III | 25 | 100 |
| Jeringa midi transparente lisado | 25 | 100 |
| 15 Tubos de recolección de ml | 50 | 200 |
Almacenamiento y estabilidad
Los componentes del kit se pueden almacenar secos a temperatura ambiente. (15-25°C) y son estables durante al menos 18 meses en estas condiciones. Si se forma algún precipitado en los tampones, calentar a 37 ℃ para disolver. Después de la adición de RNasa A，El búfer P1 es estable durante 6 meses cuando se almacena a 2-8°C.
Guía de compra
| Nombre | NO GATO | Cantidad de muestra | Tipo de columna | Volumen de elución | Producir | Tiempo por carrera | Requisitos de centrífuga |
| Mini kit de plásmido HiPure | P1001 | 1-5ml | 1.5columna de ml | 30-50µl | 5–35 µg/5 ml | ≤30 minutos | pequeña centrífuga |
| Mini kit II de plásmido HiPure | P1002 | 5-15ml | 1.5columna de ml | 75-100µl | 20-80µg/15ml | ≤30 minutos | pequeña centrífuga |
| HiPure Plásmido Plus 96 Equipo | P1006 | 1-1.5ml | 96 buen plato | 70-150µl | 1-15µg/1ml | ≤60 minutos | 96 centrífuga de placa de pocillos |
| Kit Midi de plásmido HiPure Fastfilter | P1013 | 30-50ml | 15columna de ml | 0.3-0.8ml | 50–250 µg/50 ml | ≤60 minutos | 15centrífuga ml |
| Kit maxi de plásmido HiPure Fastfilter | P1014 | 100-200ml | 50columna de ml | 0.5-1.5ml | 0.4–1mg/200ml | ≤60 minutos | 50centrífuga ml |
Reseñas
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