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Introducción
Desoxirribonucleasa pancreática bovina (ADNasa I)
- Naturaleza y función:
- La ADNasa I es una enzima endonucleasa extraída del páncreas bovino..
- Actúa principalmente sobre el ADN., escindiendo los enlaces fosfodiéster, especialmente aquellos adyacentes a un nucleósido de pirimidina.
- La escisión da como resultado oligonucleótidos que terminan con un grupo fosfato en el 5′ extremo y un grupo hidroxilo en el 3′ fin.
- Condiciones óptimas y estabilización:
- El pH óptimo para la actividad de la ADNasa I es 7.8.
- Requiere iones metálicos divalentes para su activación.; Los activadores comunes incluyen iones de magnesio y calcio..
- 5 Los iones de calcio mM se utilizan particularmente para estabilizar la ADNasa I., protegiéndolo de la degradación por proteasas.
- Inhibición:
- La actividad de la ADNasa I puede inhibirse mediante agentes quelantes como el EDTA., que se unen y eliminan cationes divalentes esenciales para su actividad..
- Dodecil sulfato de sodio (Ficha de datos de seguridad (MSDS)) También inhibe su actividad., Probablemente a través de la interferencia con la interacción de la enzima con el ADN..
- Purificación:
- La enzima se purifica mediante técnicas cromatográficas para eliminar contaminantes., particularmente otras hidrolasas.
Conjunto de ADNasa libre de ARNasa I (Para la purificación de ARN)
- Objetivo:
- Este kit está diseñado para la eliminación de ADN de preparaciones de ARN en columna o en base de perlas magnéticas. extracción de ARN protocolos.
- Procedimiento:
- Las muestras biológicas se lisan inicialmente., y se añade etanol para optimizar las condiciones para la unión del ARN a la columna o a las perlas magnéticas..
- Después de atar, la muestra se somete a un paso de lavado para eliminar impurezas.
- Digestión del ADN:
- ADNasa I, junto con un buffer específico, se aplica a la membrana o perlas unidas a ARN.
- La mezcla se incuba a temperatura ambiente. (25-37 °C) por aproximadamente 15 minutos, permitiendo que la DNasa I digiera y elimine cualquier ADN presente.
- Procesamiento posterior a la digestión:
- Después de la digestión, la columna, o las perlas se lavan para eliminar la ADNasa y los fragmentos de ADN degradados.
- Finalmente, El ARN se eluye utilizando agua tratada con DEPC para evitar cualquier contaminación por ARNasa..
Detalles
Especificaciones
| Características | Especificaciones |
| Peso molecular | 32kda |
| punto isoeléctrico | 8.9 |
| rango de pH | 4.0–10,0 |
| Actividad específica | 10 unidades kunitz/μl |
Ventajas
- Proteína natural pura, de páncreas bovino
- Alta actividad y pureza., >10 unidades kunitz/μl
- Rendimiento de alto costo
- Elimina completamente la contaminación por ARNasa
- Tipo líquido listo para usar.
- Dosis ultraalta (10μl/tiempo,100m/tiempo) para eliminar más ADN genómico
Información sobre pedidos
| Contenido | C12133 | C12134 |
| ADNasa I libre de ARNasa (10 unidades/μl)
Además de tampón de ADNasa |
500 preparativos (Más 60 ml de tampón ADNasa) | 5000 preparativos (Más 600 ml de tampón ADNasa) |
Almacenamiento y estabilidad
Magen RNase-Free DNase I es estable hasta 1 año después de la entrega cuando se almacena en -20 °C.





Reseñas
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