| Attribut | Einzelheiten |
|---|---|
| Katze | G1480 |
| Größe | 4 x 2ml, 4 x 10 ml, 4 x 20 ml |
| Lagerung | -20°C, Vermeiden Sie Licht, gültig für 6 Monate |
Kit-Komponenten:
| Reagens | 4x2ml | 4x10 ml | 4x20 ml | Lagerung |
|---|---|---|---|---|
| Reagenz A: ALP -Fixiermittel | 2ml | 10ml | 20ml | RT, Vermeiden Sie Licht |
| Reagenz b: ALP -Inkubationslösung | B1: AS-BI-Lösung 1ml | 5ml | 10ml | -20°C, Vermeiden Sie Licht |
| B2: FBB -Lösung 1ml | 5ml | 10ml | -20°C, Vermeiden Sie Licht | |
| Reagenz c: Nuklear schnell rote Lösung | 2ml | 10ml | 20ml | 2-8°C, Vermeiden Sie Licht |
| Reagenz d: Methylgrünlösung | 2ml | 10ml | 20ml | RT, Vermeiden Sie Licht |
Einführung:
Alkalische Phosphatase (ALP oder AKP) ist in Säugetiergeweben weit verbreitet, hauptsächlich an aktiven Substanzaustauschstellen wie Zellmembranen, endoplasmatisches Retikulum, Golgi -Komplex, Lysosomen, Neutrophile Granulat, und glatte Muskelzellmembranen. Das ALP -Färbungs -Kit (Kaplow -Methode) Verwendet eine AZO -Kopplungsmethode, um die ALP -Aktivität zu demonstrieren, Bereitstellung zuverlässiger Ergebnisse im Vergleich zu Metallsalzausfällen mit Methoden.
Selbst bereitgestellte Materialien:
Glasrutsche, Nasskiste, Optisches Mikroskop
Protokoll (Nur als Referenz):
Für Abstrich oder Abschnitt Fleck:
- Fixen Sie Abstriche oder Abschnitte in ALP -Fixiermittel für 3 Minuten, Dann mit destilliertem Wasser waschen.
- ALP -Inkubationslösung anwenden, in einer nassen Schachtel im Dunkeln 15-20 Minuten inkubieren, Dann mit destilliertem Wasser waschen.
- Dye mit nuklearen schnellen roten Lösung oder Methylgrün-Lösung für 3-5 min.
- Sehen Sie Abschnitte unter einem Mikroskop nach dem Waschen oder Versiegeln mit Glyceringelatine an.
Für anhaftende Zellen färben:
- Spülen Sie kultivierte Zellen mit PBS aus, Dann reparieren Sie sie mit ALP Fixativ oder 4% PFA, gefolgt von Waschen mit PBS.
- ALP -Inkubationslösung anwenden, in einer nassen Schachtel im Dunkeln 15-20 Minuten inkubieren, Dann mit PBS waschen.
- Dye mit nuklearen schnellen roten Lösung oder Methylgrün-Lösung für 3-5 min.
- Waschen Sie mit PBS und sehen Sie Abschnitte unter einem Mikroskop an.
Ergebnis:
| Ergebnis | Farbe |
|---|---|
| Positive Stelle von ALP | Blau |
| Kern | Rot oder grün |
Kriterien für Blut- und Knochenmarkabstriche beurteilen:
| Positiver Ebene | Färbeneigenschaften |
|---|---|
| 0 | Kein Granulat |
| 1 | Leicht Granula |
| 2 | Mittelgroße Granula |
| 3 | Mehrheitsmesser |
| 4 | Vollkornige Granula |
Notiz:
- Verwenden Sie frische Proben und Fixabschnitte umgehend, um die Enzymaktivität zu erhalten.
- Behandeln Sie kultivierte Zellen sanft während der Färbung, um Schäden oder Verluste zu vermeiden.
- Alp -Inkubationslösung kann schnell die Wirksamkeit verlieren, sofort verwenden.
- Wiederfassen mit nuklearer schneller roter Lösung oder Methylgrün-Lösung.
- Fügen Sie eine positive Kontrolle für jede Probe ein.
Referenz:
Yu Jiang, Dantian Zhu, Wenfeng Liu, et al. Die Hemmung des Igelwegwegs verursacht die primäre Follikelatresie und verringert die Proliferationskapazität oder Stammkeimlinie der weiblichen Keimbahnstammzellen. Stammzellforschung & Therapie. Juli 2019. (WENN 4.627)
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