Solarbio Alcian Blue Periode Säure Schiff(AB-Pass) Färbung Kit

Kit-Komponenten

Einführung

Die Glykogenfärbung ist eine herkömmliche Färbemethode für die Pathologie. Erstmals von McManus verwendet 1946, Die PAS-Technologie zeigt Mucin und andere Polysaccharide an. Diese Methode wird zur Visualisierung von Glykogen und anderen Polysacchariden eingesetzt. Die Färbelösung kann auch neutrale Schleimstoffe und einige saure Stoffe enthalten.

Die Kombination aus Alcianblau und PAS-Technologie identifiziert neutrales Mucin und saures Mucin im selben Gewebeabschnitt. Diese Technik wird üblicherweise zum Nachweis von Mucinen verwendet. Ein negatives Färbeergebnis weist eindeutig auf das Fehlen von Mucin hin. Typischerweise, Die Schnitte werden zunächst mit normalem Alcianblau gefärbt (pH 2.5) gefolgt von der PAS-Technologie. Alcianblau kann Speichelmucin färben, Hiomucin, und Proteoglykanblau. Die PAS-Technologie kann neutrales Mucin tiefrot oder rotviolett färben und gleichzeitig Gewebe und Zellen, die sowohl neutrales als auch saures Mucin enthalten, in verschiedenen Lilatönen färben, aufgrund der Kombination und Reaktion von Alcianblau und Schiff-Reagenz.

Selbst bereitgestellte Materialien

Destilliertes Wasser, Serie von Ethanol

Protokoll (Nur als Referenz)

1. Mit destilliertem Wasser entparaffinieren, Anschließend in destilliertem Wasser abspülen 2 Protokoll.
2. Färben Sie mit Alcianblau-Färbelösung für 10-20 Protokoll.
3. Jeweils dreimal mit destilliertem Wasser spülen 1-2 Protokoll.
4. Mit Oxidationsmittel behandeln für 5 Protokoll. In Leitungswasser spülen und dann zweimal in destilliertem Wasser spülen.
5. In Schiff-Reagenz einweichen und färben 10-20 Protokoll. Anschließend mit fließendem Wasser waschen 10 Protokoll.
6. Mit Hämatoxylin-Lösung färben 1-2 Protokoll, dann mit Wasser waschen.
7. Differenzieren Sie mit saurer Differenzierungslösung für 2-5 Sekunden, dann mit Wasser waschen.
8. Blau mit Scott Bluing Solution für 3 Minuten einweichen und mit Wasser waschen 3 Protokoll.
9. Mit einer Reihe von Ethanol dehydrieren, transparent mit Xylol, und mit Resinen versiegeln.

Ergebnis

• Glykogen, neutrale Mucine, und verschiedene Glykoproteine: Purpurrot
• Saure Muzine (sulfatiert und carboxyliert): Blau
• Proteoglykane, Hyaluronsäure: Blau

Notiz: Zellen oder Gewebe, die neutrale und saure Mucine enthalten, können in verschiedenen Blau-Lila- bis Violett-Tönen gefärbt werden.

Notiz

1. Stellen Sie sicher, dass der Abschnitt sauber entparaffiniert ist, um eine Beeinträchtigung des Färbeeffekts zu vermeiden.
2. Die Oxidationszeit von Oxidant sollte nicht zu lang sein; Die optimale Temperatur liegt bei 18-22°C.
3. Reagenzien A, B, und C sollten luftdicht bei 4°C gelagert werden, Vermeiden Sie übermäßige Sonneneinstrahlung und Lufteinwirkung. Vor Gebrauch, Lassen Sie sie im Dunkeln Zimmertemperatur erreichen.
4. Die saure Differenzierungslösung sollte regelmäßig ausgetauscht werden, und Differenzierungszeit basierend auf der Abschnittsdicke angepasst, Gewebetyp, und Lösungsalter. Nach der Differenzierung ist eine ausreichende Spülung mit Leitungswasser unerlässlich.
5. Die Einwirkzeit im Oxidationsmittel und Schiff-Reagenz ist entscheidend und hängt von der Schnittdicke und dem Gewebetyp ab.
6. Beim Nachfärben mit Hämatoxylinlösung, Führen Sie eine leichte Färbung durch, um die Farbe von Alcianblau nicht zu überdecken. Das Ziel besteht darin, zu verhindern, dass Zytoplasma- oder Muzinfärbungen die Farbe von Alcianblau überdecken.
7. Die Reihenfolge der Alcianblau-PAS-Färbung kann das Endergebnis beeinflussen. Wenn die PAS-Färbung vor der Alcianblau-Färbung erfolgt, Neutrales Mucin und Glykogen können violett gefärbt werden. Umgekehrt, Alcianblau kann diese Substanzen vor der PAS-Färbung purpurrot färben.
8. Für Sicherheit und Gesundheit, Tragen Sie experimentelle Kleidung und Einweghandschuhe.