Einführung
Das Kit wurde speziell für die gleichzeitige Reinigung von genomischer DNA und Gesamt-RNA aus formalinfixierten Proben entwickelt, in Paraffin eingebettet (FFPE) Gewebeschnitte. Gereinigte DNA/RNA eignet sich für den Einsatz in Anwendungen wie Echtzeit PCR und Pyrosequenzierung.
Einzelheiten
Spezifikationen
| Merkmale | Spezifikationen |
| HauptfunktionenC | Co-Isolierung von Gesamt-RNA und DNA aus FFPE-Gewebe |
| Anwendungen | RT-PCR, cDNA-Synthese, PCR und Sequenzierung der zweiten Generation, usw. |
| Reinigungsmethode | Polydisperse Magnetperlen |
| Reinigungstechnologie | Magnetperlen-Technologie |
| Prozessmethode | Manuell oder automatisch |
| Adaptives Instrument | Nukleinsäureextraktor und Pipettierarbeitsplatz |
| Beispielstyp | FFPE-Scheibe, FFPE-Einstichprobe, eingebettetes Gewebe |
| Probenmenge | Nicht mehr als sechs 10-µm-Abschnitte 150 mm2 Oberfläche oder drei 20µm-Abschnitte davon 150 mm2 Oberfläche. |
Prinzip
FFPE-Proben werden in einem optimierten Lysepuffer inkubiert, Dies führt zur Freisetzung von RNA und zur Ausfällung von DNA. Nach Zentrifugation, Der RNA-haltige Überstand und das DNA-haltige Pellet werden dann getrennt verarbeitet, um RNA und DNA zu reinigen. Nach Zugabe von Magnetpartikeln und Bindelösung, DNA/RNA wird auf der Oberfläche magnetischer Partikel adsorbiert, und Verunreinigungen wie Proteine werden ohne Adsorption entfernt. Die adsorbierten Partikel wurden mit Waschlösung gewaschen, um Proteine und Verunreinigungen zu entfernen, mit Ethanol gewaschen, um Salze zu entfernen, und schließlich wurde DNA/RNA durch RNase Free Water eluiert.
Vorteile
- Sortierung nach dem Aufschluss – höhere DNA- und RNA-Ausbeuten
- Wirtschaftlichkeit – der Preis ist viel niedriger als bei importierten Reagenzien
Inhalt des Kits
| Inhalt | IVD3026 |
| Reinigungszeiten | 200 Vorbereitungen |
| Partikel binden | 9.0 ml |
| Proteinase K | 180 mg |
| Protease-Auflösungspuffer | 10 ml |
| Puffer-DPS | 150 ml |
| Puffer-FRL | 40 ml |
| Puffer-ATL | 40 ml |
| Puffer AL | 80 ml |
| Puffer BXW1* | 110 ml |
| RNase-freies Wasser | 30 ml |
Lagerung und Stabilität
Proteinase K- und MagBind-Partikel sollten bei der Ankunft bei 2–8 °C gelagert werden. Jedoch, kurzfristige Lagerung (bis zu 24 Wochen) bei Raumtemperatur (15-25°C) hat keinen Einfluss auf ihre Leistung. Die restlichen Kit-Komponenten können bei Raumtemperatur gelagert werden (15-25°C) und sind mindestens stabil 18 Monate unter diesen Bedingungen.
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