Einführung
Das Kit wurde speziell für die gleichzeitige Reinigung von genomischer DNA und Gesamt-RNA aus formalinfixierten Proben entwickelt, in Paraffin eingebettet (FFPE) Gewebeschnitte. Gereinigte DNA/RNA eignet sich für den Einsatz in Anwendungen wie Echtzeit PCR und Pyrosequenzierung.
Einzelheiten
Spezifikationen
| Merkmale | Spezifikationen |
| Hauptfunktionen | Co-Isolierung von DNA und RNA aus FFPE-Gewebe |
| Anwendungen | RT-PCR, cDNA-Synthese, PCR und Sequenzierung der zweiten Generation, usw. |
| Reinigungsmethode | Polydisperse Magnetkügelchen auf Siliziumbasis (DNA)
Monodisperse Carbonyl-Magnetkügelchen (RNA) |
| Reinigungstechnologie | Magnetperlen-Technologie |
| Prozessmethode | Manuell oder automatisch |
| Adaptives Instrument | Nukleinsäureextraktor und Pipettierarbeitsplatz |
| Beispielstyp | FFPE-Scheibe, FFPE-Einstichprobe, eingebettetes Gewebe |
| Probenmenge | Nicht mehr als sechs 10 µm-Abschnitte von 150 mm2 Oberfläche oder drei 20µm-Abschnitte davon 150 mm2 Oberfläche |
| Ertrag | DNA: 1 – 10 μg, RNA: 1 – 25 μg |
Prinzip
Die Probe wird unter Einwirkung von Lysat und Protease lysiert und verdaut. DNA/RNA wird in das Lysat freigesetzt. Nach Zugabe von Magnetpartikeln und Bindelösung, DNA wird auf der Oberfläche magnetischer Partikel adsorbiert, Der Überstand enthält RNA, die gesammelt und an MagBind-Partikel gebunden wird. Die adsorbierten Partikel wurden mit Waschlösung gewaschen, um Proteine und Verunreinigungen zu entfernen, mit Ethanol gewaschen, um Salze zu entfernen, und schließlich wurde DNA/RNA durch Elutionspuffer eluiert.
Vorteile
- Gute Qualität – hochreine Gesamt-RNA / DNA kann direkt in verschiedenen nachgelagerten Anwendungen verwendet werden
- Sicher – keine Phenol-Chloroform-Extraktion erforderlich
- Gleichzeitige Extraktion – isolieren gleichzeitig DNA und RNA aus einer Probe
- Sortierung nach dem Aufschluss – höhere DNA- und RNA-Ausbeuten
- Hohe RNA-Ausbeute – monodisperse Carbonyladsorption
Inhalt des Kits
| Inhalt | R632701 | R632702 | R632703 |
| Reinigungszeiten | 48 Vorbereitungen | 96 Vorbereitungen | 5 X 96 Vorbereitungen |
| Partikel binden | 1.1 ml | 2.5 ml | 11 ml |
| MagPure-Partikel N | 1.1 ml | 2.5 ml | 11 ml |
| Proteinase K | 24 mg | 48 mg | 220 mg |
| Protease-Auflösungspuffer | 3 ml | 10 ml | 15 ml |
| Puffer-DPS | 50 ml | 100 ml | 2 X 250 ml |
| Puffer-ATL | 20 ml | 30 ml | 120 ml |
| Puffer BST1 | 20 ml | 40 ml | 200 ml |
| Puffer BXW1* | 44 ml | 110 ml | 3 X 110 ml |
| RNase-freies Wasser | 15 ml | 30 ml | 120 ml |
Lagerung und Stabilität
Proteinase K, MagPure-Partikel N und MagBind-Partikel sollten bei der Ankunft bei 2–8 °C gelagert werden. Jedoch, kurzfristige Lagerung (bis zu 12 Wochen) bei Raumtemperatur (15–25°C) hat keinen Einfluss auf ihre Leistung. Die restlichen Kit-Komponenten können bei Raumtemperatur gelagert werden (15–25°C) und sind mindestens stabil 18 Monate unter diesen Bedingungen.
Experimentdaten
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