Einführung
The Kit is designed for purification of total RNA, including miRNA and other small RNA molecules (18nt), from cultured cells and various animal and human tissues, including difficult-to-lyse tissues samples. Alternatively, a miRNA-enriched fraction and a total RNA (>200nt) fraction can be purified separately. This Kit combines phenol/Guanidin-based lysis of samples and silica membrane–based purification of total RNA. Magzol -Reagenz, included in the kits, is a monophasic solution of phenol and guanidine thiocyanate, designed to facilitate lysis of tissues, to inhibit RNases, and also to remove most of the cellular DNA and proteins from the lysate by organic extraction.
Einzelheiten
Spezifikationen
Merkmale | Spezifikationen |
Hauptfunktionen | Isolation miRNA and other small RNA molecules(18nt), from cultured cells and various animal and human tissues, using MagZol reagent and column |
Anwendungen | RT-PCR, Northern Blot, poly A+purification, Nukleinsäureschutz und In -vitro -Translation |
Reinigungsmethode | Mini Spin-Säule |
Reinigungstechnologie | Silica-Technologie |
Prozessmethode | Handbuch (Zentrifugation oder Vakuum) |
Beispielstyp | Animal tissues, adherent cells, suspension cells, Bakterien, usw |
Probenmenge | Eukaryotic culture cells: ≤ 10^7, Animal tissue:<100mg, Yeast culture cells:<5 x10^7, Bakterien:<10^9 |
Elutionsvolumen | ≥15μl |
Zeit pro Lauf | ≤ 40 Minuten |
Flüssigkeitstransportvolumen pro Säule | 800µl |
Bindungsausbeute der Säule | 100µg |
Prinzip
Die Hipure -Kiesel -Gelsäule basiert auf Glasfaserfiltermembran mit hoher Bindungskraft. Unter dem Zustand einer hohen Konzentration an ionisierender Wirkstoff (such asguanidine hydrochloride or guanidine isothiocyanate), Die Filtermembran kann Nukleinsäure durch Wasserstoffbrückenbindung und elektrostatisch adsorbieren, while protein andother impurities are not adsorbed and removed. Die mit Nukleinsäure adsorbierte Filtermembran wird gewaschen, um das Restprotein und Salz zu entfernen. Endlich, Die auf der Filtermembran adsorbierte Nukleinsäure kann mit niedrigem Salzpuffer ausgewaschen werden (wie Puffer te) oder Wasser. Die erhaltene Nukleinsäure hat eine hohe Reinheit und kann direkt in verschiedenen nachgeschalteten Experimenten verwendet werden.
This kit combines acid/guanidine (MagZol) extraction technology with glass fiber filter membrane purification, which can improve the extraction effect of complex samples and samples with low RNA content. After the sample is treated with MagZol reagent and chloroform, the supernatant is added with ethanol to provide appropriate binding conditions, then transferred to the purification column and centrifuged. Macromolecular RNA can be efficiently bound to the membrane. Collect the filtrate containing small RNA, add more ethanol to adjust the binding capacity of small RNA, the pollutants can be efficiently washed away by second cleaning. Endlich, the purified RNA was eluted by RNase free water.
Vorteile
- Gute Qualität – one step RNA-Extraktion reagent combined with silica gel column can obtain the highest concentration
- Schnell – Es können mehrere Proben entnommen werden 40 Protokoll
- High applicability – samples including animals, Pflanzen, Bakterien, Zellen, usw.
- Hohe Konzentration – efficiently remove macromolecular RNA, enrich small RNA and improve sensitivity
Inhalt des Kits
Inhalt | R431002 | R431003 |
Reinigungszeiten | 50 Vorbereitungen | 250 Vorbereitungen |
HiPure RNA Mini-Säulen | 100 | 2 X 250 |
2ml-Sammelröhrchen | 100 | 2 X 250 |
Magzol -Reagenz | 60 ml | 270 ml |
Buffer RWC | 20 ml | 80 ml |
Puffer RW2* | 20 ml | 2 X 50 ml |
RNase-freies Wasser | 10 ml | 30 ml |
Lagerung und Stabilität
MagZol Reagent should be stored at 2-8°C upon arrival. Jedoch, kurzfristige Lagerung (bis zu 24 Wochen) bei Raumtemperatur (15-25°C) hat keinen Einfluss auf seine Leistung. Die restlichen Kit-Komponenten können bei Raumtemperatur gelagert werden (15-25°C) und sind mindestens stabil 18 Monate unter diesen Bedingungen.
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