| 屬性 | 細節 |
|---|---|
| 貓 | G1492 |
| 尺寸 | 4 ×10毫升, 4 ×20毫升 |
| 貯存 | -20℃, 避光, 有效期限為 3 月 |
套件組件:
| 試劑 | 4x10毫升 | 4x20毫升 | 貯存 |
|---|---|---|---|
| 試劑(A): 陷阱固定劑 | 50毫升 | 100毫升 | 2-8℃, 避光 |
| 試劑(乙): | |||
| 陷阱孵育溶液 | B1: AS-BI緩衝液1ML | 2x1ml | -20℃, 避光 |
| B2: GBC溶液0.1ml | 2×0.2毫升 | -20℃, 避光 | |
| B3: 陷阱緩衝區9ml | 18毫升 | RT, 避光 | |
| 試劑(C): 蘇木精溶液 | 10毫升 | 20毫升 | 2-8℃, 避光 |
| 試劑(D): 甲基綠溶液 | 10毫升 | 20毫升 | RT, 避光 |
介紹:
酸性磷酸酶 (ACP) 廣泛分佈在各種組織中, 主要在溶酶體中, 用作標記酶. 耐銹酸磷酸酶 (陷阱), 主要在人肺泡巨噬細胞和白血病脾細胞中發現, 被釋放到細胞卵泡而不是血液中. 血液中的陷阱主要起源於破骨細胞, 允許評估破骨細胞功能.
耐銹酸磷酸酶 (陷阱) 染色套件原理涉及用AS-BI底物水解酸性磷酸酶, 在酸性pH下釋放磷酸和萘酚. 萘酚與重氮鹽的耦合形成了局部在細胞質中的有色產品. 陽性染色表明抗性酸活性. 它通常用於新鮮的血液塗片, 細胞塗片, 和冷凍部分.
自備材料:
蒸餾水, 孵化器, 滑動, 顯微鏡
協定 (僅供參考):
用於血液或細胞塗片:
- 幹塗片, 在4°C的陷阱固定劑中固定30-3分鐘.
- 用蒸餾水洗滌, 風乾.
- 應用陷阱孵育溶液, 並在黑暗中在37°C下孵育45-60分鐘. 然後洗.
- 用蘇木精溶液或甲基綠色溶液重新染色2-3min.
- 洗滌或密封後在顯微鏡下查看部分.
對於冷凍部分:
- 通過浸入水中1-2分鐘將截面恢復至37°C.
- 風乾, 在4°C下以1-3分鐘的固定固定固定劑.
- 用蒸餾水洗滌, 風乾.
- 應用陷阱孵育溶液, 並在黑暗中在37°C下孵育45-60分鐘. 然後洗.
- 用蘇木精溶液或甲基綠色溶液重新染色2-3min.
- 洗滌或密封後在顯微鏡下查看部分.
用於石蠟部分:
- 分級酒精中的脫水和補液切片.
- 用蒸餾水洗滌, 風乾.
- 應用陷阱孵育溶液, 並在黑暗中在37°C下孵育45-60分鐘. 然後洗.
- 用蘇木精溶液或甲基綠色溶液重新染色2-3min.
結果:
| 結果 | 顏色 |
|---|---|
| 積極的 | 紫紅 |
| 核 | 藍色或綠色 |
臨床意義:
- 陷阱染色有助於診斷毛細胞白血病.
- 在急性白血病的未成熟單核細胞中觀察到陽性染色.
- T淋巴細胞表現出陽性陷阱染色.
- Gaucher細胞顯示出強陽性染色.
筆記:
- 陷阱孵育解決方案可能會迅速失去有效性.
- 減少染色冷凍切片的暴露時間.
- 立即使用新鮮樣品以進行準確的結果.
- 將組織在4°C的固定劑中存放不超過 24 小時.
- 在嵌入過程中控製石蠟溫度以保持酶活性.
- 確保高質量的二甲苯以防止分解.
- 為了安全起見，穿實驗服和一次性手套.
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