筆記: 測試前取兩個或三個不同的樣本進行預測.
操作設備: 分光光度計/酶標儀
目錄編號: BC5175
尺寸: 50時間 | 48S
成分:
試劑一: 25 毫升×1. 2-8℃保存.
試劑二: 6 毫升×1. 2-8℃保存.
產品描述:
直接膽紅素 (直腸BIL) 也稱為結合膽紅素. 間接膽紅素進入肝臟後, 它透過肝臟中葡萄醣醛酸基轉移酶的作用與葡萄醣醛酸結合. 直接膽紅素升高對於阻塞性黃疸的臨床診斷具有重要意義, 肝細胞性黃疸, 肝癌, 胰頭癌, 膽石症, 和膽管癌. 直接膽紅素可被亞硝酸鈉氧化形成膽綠素, 其吸光度為 450 奈米. 透過檢測波長變化可計算出直接膽紅素的含量 450 奈米.
需要但未提供的試劑和設備:
分光光度計/酶標儀, 桌上型離心機, 恆溫培養箱/水浴鍋, 移液器, 微型玻璃比色皿/96孔平底板, 冰, 和蒸餾水.
程式
A. 樣品製備:
血清, 電漿, 或其他液體樣品: 直接檢測樣品. 如果溶液混濁, 測量離心.
乙.決心 程式:
- 預熱分光光度計/酶標儀 30 分鐘, 調整波長至 450 奈米, 並用蒸餾水將分光光度計計數器設為零
- 決心:
試劑 (微升) | 試管 | 空白管 |
樣本 | 8 | – |
蒸餾水 | – | 8 |
試劑一 | 192 | 192 |
攪拌均勻. 37℃反應 5 分分鐘. 測量吸光度 450 奈米, 並將其記錄為A1T, A1B; | ||
試劑二 | 48 | 48 |
攪拌均勻. 37℃反應 5 分分鐘. 測量吸光度 450 奈米, 並將其記錄為A2T, A2B. 計算 ΔAT =A1T-A2T 和 ΔAB =A1B-A2B. 空白管只需測量一兩次. |
C.計算:
96 井平底板
DBIL含量 (微摩爾/公升) =1495.7×(ΔAT-ΔAB)-15.343
微玻璃 比色皿
DBIL含量 (微摩爾/公升) =1099.7×(ΔAT-ΔAB)-10.73
筆記:
- 膽紅素遇光易分解. 期間避光
- 如果 ΔA 較低, 建議在測定前增加樣本量; 若ΔA>5, 建議測定前先稀釋樣品.
範例:
- 取小鼠血清依測定程序操作. 測定與 96 井平底板, 並計算ΔAT=A1T-A2T=0.217-0.170=0.047, ΔAB=A1B-A2B=0.044-0.044=0. 計算內容如下:
DBIL含量 (微摩爾/公升) =1495.7×(ΔAT-ΔAB)-15.343=54.95μmol/L.
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