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介紹
核糖核酸酶A 是一種核糖核酸內切酶，可特異性降解單鏈 RNA 的 C 和 U 殘基. 它斷裂5個之間的磷酸二酯鍵′-核苷酸的核糖和連接到 3 的磷酸基團′-相鄰嘧啶核苷酸的核糖. 由此產生的2′,3′-環狀磷酸酯水解成相應的3′-核苷磷酸. 單鏈 RNA 表現出最高活性. RNase A 是一種單鏈多肽，含有 4 二硫橋.
RNase A 的一個主要應用是從製劑中去除 RNA 質粒DNA. 該酶在多種反應條件下均具有活性. 低鹽濃度下 (0 到 100 毫摩爾氯化鈉), RNase A 切割單鍊和雙鏈 RNA 以及 RNA-DNA 雜交體中的 RNA 鏈. 然而, 氯化鈉濃度為 0.3 M或更高, RNase A 特異性切割單鏈 RNA.
細節
規格
| 特徵 | 規格 |
| 純度 | ≥60% RNase A 基礎 (安全資料表-頁) |
| 酶活性 | >50 庫尼茨單位/毫克蛋白質 |
| 最適反應溫度 | 60℃ (有效活性溫度為15-70°C) |
| 運輸條件 | 常溫運輸 |
| 保存條件 | -20-8℃, 幹儲存, 長期存儲應放置在-20°C下. |
| 應用 1: 在提取過程中添加 | 1. 質粒提取: 添加RNA酶A (25毫克/毫升) 緩衝液P1終濃度為100-300μg/ml.
2. DNA萃取: 添加RNA酶A (25毫克/毫升) 消解液終濃度為100-400μg/ml, 充分混合併置於室溫下 10-15 分分鐘. 當SDS/CTAB 裂解液中超過 2%, RNase活性會明顯受到抑制; 胍 鹽(>4M鹽酸胍或 >3異硫氰酸M胍) 還顯著抑制 RNase A. 當 RNase A 添加到裂解液中時, 適當稀釋降低SDS濃度即可提取RNase消化效果, CTAB和胍鹽. |
| 應用 2: | 1. 去除粗基因組 DNA 產品中的 RNA 污染: 添加無 DNase 的 RNase A (10毫克/毫升) 粗DNA產物的終濃度為10-100μg/ml. 混合後, 放在室溫下 10 分分鐘.
2. 去除質粒 DNA 產品中的 RNA 污染: 添加無 DNase 的 RNase A (10毫克/毫升) 粗DNA產物的終濃度為10μg/ml. 混合後, 可直接用於室溫測序 10 分分鐘. |
訂購資訊
| 內容 | C12123 | C12124 | C12128 | C12129 |
| 核糖核酸酶 A 溶液 (25毫克/毫升) | 10 毫升 | 100 毫升 | ||
| 無 DNase RNase A 溶液 (10毫克/毫升) | 10 毫升 | 100 毫升 |
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