該套件集成了苯酚/胍-基於總RNA的裂解和矽膠膜純化. MagZol試劑, 包含在套件中, 是苯酚和硫氰酸胍的單相溶液, 旨在促進樣品裂解並抑制 RNases. 該試劑的高裂解效率以及隨後透過有機相萃取去除污染物能夠從少於 100mg 的動物中提取高達 200μg 的總純化 RNA, 植物, 真菌樣本,細菌, 細胞和其他樣品.
細節
規格
特徵 | 規格 |
主要功能 | 分離總RNA (包括 miRNA) 來自 100mg 脂質組織, 組織, 細胞, 植物, 使用管柱和 MagZol 試劑分析體液 |
應用領域 | RT-聚合酶鍊式反應, 實時螢光定量PCR, 北方雜交, 二代定序 |
純化方法 | 小型的 旋轉柱 |
淨化技術 | 二氧化矽技術, 酸性苯酚 / 胍萃取技術 (MagZol預處理技術) |
工藝方法 | 手動的 (離心或真空) |
樣品類型 | 動物組織, 含有肌纖維的組織,脂肪組織, 培養細胞, 淋巴球, 簡單的植物和其他生物樣本 |
樣品量 | 動物組織樣本: 1-60毫克 (脾臟≤10mg)
培養細胞: 5 X 106 植物葉子: 50-100毫克 |
屈服 | 2-200微克 |
洗脫體積 | ≥50μl |
每次運行時間 | ≤30分鐘(1-24個樣本) |
每根柱的載液量 | 800微升 |
柱結合率 | 100微克 |
原則
組織樣本 (10-100毫克) 在 MagZol 試劑中均質化. 加入氯仿後, 以離心法將勻漿分離成水相和有機相. 上層, 萃取水相, 添加乙醇以提供適當的結合條件. 然後將樣品施加到旋轉柱上, 其中總RNA (高達 100 微克) 與膜結合,苯酚和其他污染物被有效洗掉. 然後用 30-100μl 無 RNase 的水洗脫高品質 RNA.
優點
- 高效 DNA 去除 – 一步 RNA萃取 可有效去除基因組DNA
- 高品質 – 一步RNA萃取試劑結合矽膠柱可獲得最高濃度
- 快速地 – 可以提取多個樣本 30 分分鐘
- 適用性高 – 樣本包括動物, 植物, 細菌, 細胞, ETC.
- 高輸出 – 可處理大樣品,產量可達200μg
套件內容
內容 | R413002 | D413003 |
淨化時間 | 50 準備工作 | 250 準備工作 |
HiPure RNA 迷你柱 | 50 | 250 |
2毫升收集管 | 50 | 250 |
MagZol試劑 | 60 毫升 | 270 毫升 |
緩衝器RW1 | 50 毫升 | 200 毫升 |
緩衝器 RW2* | 20 毫升 | 50 毫升 |
無核糖核酸酶水 | 10 毫升 | 30 毫升 |
儲存和穩定性
MagZol 試劑到達後應儲存於 2-8°C 下. 然而, 短期儲存 (取決於 12 週) 在室溫下 (15-25℃) 不影響其性能. 其餘試劑盒成分可在室溫下保存 (15-25℃) 並且至少穩定 18 在這些條件下幾個月.
實驗數據
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