介紹
- 快速地, 簡單的, 和成本效益: 提供迅速, 便於使用, 和經濟的方法 質粒DNA 適用於常規分子生物學應用的小型雷普.
- 二氧化矽膜技術: 利用二氧化矽膜技術, 消除對與鬆散樹脂或漿液相關的繁瑣步驟的需求, 簡化淨化過程.
- 直接的可用性: 純化的質粒DNA立即準備下游應用, 節省時間和精力.
- 沒有苯酚提取或乙醇沉澱: 繞過對苯酚提取和乙醇沉澱的需求, 簡化工作流程並減少動手時間.
- 高質量的DNA: 產生在少量Tris緩衝液或水中洗脫的高質量質粒DNA, 確保在下游應用程序中的最佳性能.
規格
| 特徵 | 規格 |
| 主要功能 | 從1-5ml細菌培養物中最多35μg質粒DNA分離 |
| 應用領域 | 酶消化, 定序, 聚合酶鍊式反應, 複製, ETC. |
| 純化方法 | 小型的 旋轉柱 |
| 淨化技術 | 二氧化矽技術 |
| 工藝方法 | 手動的 (離心或真空) |
| 樣品類型 | 常規質粒, 質粒小於30kb |
| 樣品量 | 高複制質粒: 1-5ML培養基低拷貝數質粒: 5-10ML培養基 |
| 屈服 | 5-35微克 |
| 洗脫體積 | ≥30μl |
| 每次運行時間 | 完全的 1-24 樣品中 30 分分鐘 |
| 每根柱的載液量 | 800微升 |
| 柱結合率 | 35微克 |
原則
- 鹼裂解: 從細菌細胞的鹼性裂解開始, 分解細胞膜並將質粒DNA釋放到裂解物中.
- 基於二氧化矽的DNA結合: 在高鹽存在下，釋放的DNA被吸附到二氧化矽膜上, 促進DNA與膜表面的有效結合.
- 三個基本步驟: 該過程涉及三個主要步驟: (1) 使用鹼方法製備和清除細菌裂解物, (2) 將清除的裂解物轉移到DNA結合的色譜柱上, 和 (3) 洗滌以去除蛋白質和其他雜質.
- 二氧化矽膜: 利用套件中的獨特二氧化矽膜, 它完全取代了通常用於質粒DNA小型玻璃或二氧化矽漿液.
- 低鹽緩衝液洗脫: 洗滌後去除雜質, 核酸, 包括質粒DNA, 使用含有10mm Tris的低鹽緩衝液從二氧化矽膜上洗脫, 酸鹼度 9.0, 和0.5mm EDTA.
優點
- 高純度 – 純化的質粒可以直接用於測序, 酶消化PCR, ETC.
- 快速地 – 它只需要 1 通過優化溶液獲得上清液的分鐘 (10 其他品牌的分鐘)
- 高產 – 最多35µg質粒可以結合在一列中
套件內容
| 內容 | P100102 | P100103 |
| 淨化時間 | 100 準備工作 | 250 準備工作 |
| 核糖核酸酶A | 5 毫克 | 10 毫克 |
| 緩衝液P1 | 30 毫升 | 80 毫升 |
| 緩衝液P2 | 30 毫升 | 80 毫升 |
| 緩衝液P3 | 40 毫升 | 100 毫升 |
| 緩衝液PW1 | 60 毫升 | 140 毫升 |
| 緩衝區PW2* | 20 毫升 | 50 毫升 |
| 洗脫緩衝液 | 15 毫升 | 30 毫升 |
| Hipure DNA迷你列II | 100 | 250 |
| 2 毫升收集管 | 100 | 250 |
儲存和穩定性
- 儲存條件: 套件組件可以在室溫下乾燥 (15-25℃) 並保持穩定至少 18 在這些條件下幾個月.
- 緩衝液沉澱: 如果在緩衝液中形成任何沉澱, 在37°C有效溶解的情況下加熱它們.
- 緩衝液P1穩定性: 添加RNase A之後, 緩衝區P1保持穩定 6 存儲在2-8°C的月份.
實驗數據
採購指南
| 姓名 | 貓 | 樣品量 | 列類型 | 洗脫體積 | 屈服 | 每次運行時間 | 離心要求 |
| HiPure 質粒迷你試劑盒 | P1001 | 1-5毫升 | 1.5ML列 | 30-50微升 | 5–35µg/5ml | ≤30分鐘 | 小離心機 |
| Hipure質粒迷你套件II | P1002 | 5-15毫升 | 1.5ML列 | 75-100微升 | 20-80µg/15ml | ≤30分鐘 | 小離心機 |
| Hipure質粒加 96 成套工具 | P1006 | 1-1.5毫升 | 96 孔板 | 70-150微升 | 1-15μg/1ml | ≤60分鐘 | 96-板離心井 |
| Hipure快速濾波器質粒MIDI套件 | P1013 | 30-50毫升 | 15ML列 | 0.3-0.8毫升 | 50–250µg/50ml | ≤60分鐘 | 15ML離心機 |
| Hipure FastFilter質粒最大套件 | P1014 | 100-200毫升 | 50ML列 | 0.5-1.5毫升 | 0.4–1mg/200ml | ≤60分鐘 | 50ML離心機 |
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