介紹
Hipure MIDI系統提供了快速, 簡單的, 和成本效益 質粒DNA 常規分子生物學實驗室應用中的MIDIPREP方法. Hipure Midiprep套件使用二氧化矽膜技術消除與鬆散樹脂或泥漿有關的繁瑣步驟. 用迷你套件純化的質粒DNA立即準備使用. 不需要苯酚提取和乙醇沉澱, 和高質量的質粒DNA用少量的Tris緩衝液或水洗脫.
細節
規格
| 特徵 | 規格 |
| 主要功能 | 從25-50毫升細菌培養物中的隔離高達500µg無內毒素的質粒DNA |
| 應用領域 | 細胞轉染, 動物注射, ETC. |
| 純化方法 | Midi 旋轉柱 |
| 淨化技術 | 二氧化矽技術 |
| 工藝方法 | 手動的 (離心或真空) |
| 樣品類型 | 常規質粒, 質粒小於30kb |
| 樣品量 | 25-50毫升 |
| 屈服 | 10-500微克 |
| 洗脫體積 | ≥0.4ml |
| 每次運行時間 | ≤60分鐘 |
| 每根柱的載液量 | 4毫升 |
| 柱結合率 | 250微克 |
原則
Hipure質粒程序基於細菌細胞的鹼性裂解，然後在高鹽存在下將DNA吸附到二氧化矽上. 套件中使用的獨特二氧化矽膜完全取代了質粒DNA小型玻璃或二氧化矽漿液. 該過程包括 3 基本步驟: 通過鹼方法製備和清除細菌裂解物，然後將上清液轉移到柱中以結合DNA. 洗滌蛋白質及其他雜質後, 核酸最終用低鹽緩衝液洗脫 (10毫米三羥甲基氨基甲烷, 博士學位, 0.5乙二胺四乙酸).
優點
- 高純度 – 純化的質粒可以直接用於測序, 酶消化和 聚合酶鍊式反應, ETC.
- 快速地 – 二氧化矽凝膠柱純化比離子交換快得多
- 高產 – 一列中最多可以粘合250μg質粒
- 低內毒素含量 – 獲得的質粒可直接用於細胞轉染和動物注射
套件內容
| 內容 | P123102 | P123102B |
| 淨化時間 | 50 準備工作 | 50 準備工作 |
| 核糖核酸酶A | 30 毫克 | 30 毫克 |
| 緩衝區E1 | 150 毫升 | 150 毫升 |
| 緩衝區E2 | 150 毫升 | 150 毫升 |
| 緩衝區E3 | 150 毫升 | 150 毫升 |
| 緩衝區E4 | 150 毫升 | 150 毫升 |
| 緩衝區E5 | 150 毫升 | 150 毫升 |
| 緩衝區PW2* | 50 毫升 | 50 毫升 |
| 洗脫緩衝液 | 30 毫升 | 30 毫升 |
| Maxpure EF迷你列 | 50 | 50 |
| 2 毫升收集管 | 50 | 50 |
| 裂解液清除Midi注射器 | 50 | 50 |
| 擴展管 | 50 | 50 |
| 50ML離心管 | 50 | |
| 支撐管 | 50 |
儲存和穩定性
套件組件可以在室溫下乾燥 (15-25℃) 並且至少穩定 18 在這些條件下幾個月. 如果緩衝液中形成任何沉澱物, 37℃溫熱溶解. 添加RNase A和可選的Lyseblue試劑後, 緩衝液P1穩定 6 存儲在2–8°C的月份.
採購指南
| 姓名 | 貓 | 樣品量 | 列類型 | 洗脫體積 | 屈服 | 每次運行時間 | 離心要求 |
| Hipure質粒EF迷你套件 | P1154 | 10-15毫升 | 1.5ML列 | ≥75μl | 10–70µg/15ml | ≤40分鐘 | 小離心機 |
| Hipure質粒EF 96 成套工具 | P1157 | 1-5毫升 | 96 孔板 | ≥75μl | 30µg/1ml | ≤60分鐘 | 96 板離心井 |
| Hipure質粒EF MIDI套件 | P1231 | 30-50毫升 | 15ML列 | ≥0.4ml | 10-500μg/50ml | ≤60分鐘 | 15ML離心機 |
| Hipure質粒EF Maxi套件 | P1156 | 100-200毫升 | 50ML列 | ≥0.8ml | 100–1500µg/200ml | ≤60分鐘 | 50ML離心機 |
| Hipure質粒ef巨型套件 | P1116 | 500毫升 | 50ML列 | ≥0.8ml | 10mg/500ml | ≤70分鐘 | 50ML離心機 |
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