Virus Nucleic Acid Purification Reagent Kit

1. ส่วนประกอบของชุดรีเอเจนต์

2. คำแนะนำสำหรับการใช้งาน:

1. The Virus Genome Purification Reagent Kit is intended for molecular biology research and should not be used for the prevention and treatment of diseases.
2. Prior to chemical handling, it is recommended to wear protective clothing, disposable gloves, and safety goggles.
3. Before using Rinse Buffer 1, เพิ่ม (96%~100%) เอทานอล.
4. The color change to yellow in Reagent Buffer C does not affect normal use.
5. Maintain the centrifugation environment at room temperature (15℃ ~ 25 ℃).

3. Reagent Kit Introduction:

The Virus Genome Purification Reagent Kit provides a rapid and effective solution for virus genome purification, widely applied to various viral nucleic acid purifications, such as Hepatitis B virus, และอื่น ๆ.

The purification process can be completed within 1 ชั่วโมง, and the purified nucleic acids can be directly used for พีซีอาร์, การซับใต้, ฯลฯ. The entire purification process does not require toxic reagents such as phenol and chloroform, making the nucleic acid purification kit suitable for various other samples.

The purified RNA, washed with a low-salt solution or water, is suitable for downstream experiments. The A260/A280 ratio of the purified RNA is around 1.9, indicating high purity and a well-defined peak at 260 นาโนเมตร.

The high-efficiency membrane effectively removes inhibitors or other interfering substances, making it widely applicable to downstream experiments such as PCR, RAPD, เอเอฟแอลพี, รฟล, SNP, และอื่น ๆ.

4. Self-provided Equipment and Consumables:

High-speed centrifuge, หลอด EP, vortex oscillator, เอทานอลแน่นอน, hot water bath or metal bath

5. Extraction Steps:

Preparation before starting:

ก. Heat Elution Buffer to 65℃ before use (recommended);

บี. Add ethanol toล้างกันชน 1 ก่อนใช้งาน.

1. การจัดเตรียมตัวอย่าง: Transfer 200μl of serum or other body fluids to a centrifuge tube. If insufficient, top up with PBS.
2. เพิ่ม 400μlของสารรีเอเจนต์บัฟเฟอร์ C, กระแสน้ำวน, let it stand at room temperature for 10 นาที, กระแสน้ำวน 4-5 ครั้งในช่วงเวลานี้.
3. เพิ่ม 450μl of pre-cooled absolute ethanol, vortex immediately.
4. Transfer the obtained liquid to the การสกัดอาร์เอ็นเอ purification column (ชุด) (ประมาณ 650~700μl ในแต่ละครั้ง), let it stand at room temperature for 2 นาที, ปั่นแยกที่มากกว่า 8,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 นาที, ทิ้งขยะที่รวบรวมไว้, and re-insert the collection tube into the purification column for the next step
5. Place the RNA extraction purification column (ชุด) ในหลอดคอลเลกชันใหม่, เพิ่ม 300ไมโครลิตรของ ล้าง กันชน 1, ปั่นแยกที่มากกว่า 8,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 นาที, ทิ้งขยะ, and re-insert the RNA extraction purification column (ชุด) ลงในท่อเพื่อขั้นตอนต่อไป.

(บันทึก: ยืนยันว่าได้เติมเอทานอลสัมบูรณ์ลงไปแล้ว ล้าง กันชน 1.)

6. เพิ่ม 700μl ของบัฟเฟอร์ล้าง 1 to the RNA extraction purification column (ชุด), เครื่องหมุนเหวี่ยงที่ 14,000 รอบต่อนาที (20,000×ก) สำหรับ 2 นาที, extend the centrifugation time appropriately to ensure the membrane is more dry.

(บันทึก: การมีอยู่ของเอทานอลมีผลกระทบร้ายแรงต่อการทดลองครั้งต่อไป, ดังนั้นการทำให้เมมเบรนแห้งจึงเป็นสิ่งสำคัญ. หลังจากการปั่นแยก, ตรวจสอบให้แน่ใจว่าไม่มีเอทานอลอยู่ก่อนทำการชะล้าง, then discard the waste and collection tube.)

7. Place the RNA extraction purification column (ชุด) ลงในหลอดหมุนเหวี่ยงใหม่, หยด 100μl ของบัฟเฟอร์การชะล้าง ลงบนเมมเบรน, ฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที (15℃ ~ 25 ℃), ปั่นแยกที่มากกว่า 8,000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 นาที.

(บันทึก: Eluting with 50μl of elution buffer can increase nucleic acid concentration but reduces total nucleic acid yield.)

8. ทำซ้ำขั้นตอนก่อนหน้า.

(บันทึก: A new centrifuge tube can be used to collect the nucleic acid eluted in the second round, or continue using the original collection tube to collect nucleic acid.)