ชุดทดสอบปริมาณแป้ง
บันทึก: ใช้ตัวอย่างที่แตกต่างกันสองหรือสามตัวอย่างเพื่อทำนายก่อนการทดสอบ. อุปกรณ์การดำเนินงาน: เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์/เครื่องอ่านไมโครเพลท.
หมายเลขแมว: BC0705
ขนาด: 100ที/96ส
ส่วนประกอบ:
รีเอเจนต์ I: 110 มล.×1. การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเอเจนต์ II: 110 มล.×1. การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
รีเอเจนต์ III: ผง×2. การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
มาตรฐาน: ผง×1, 10 มก. กลูโคส (ไม่มีน้ำ). การเก็บรักษาที่ 4 ℃.
โซลูชั่นมาตรฐาน: ละลายไปกับ 1 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นถึง 10 สารละลายมาตรฐานของกลูโคส มิลลิกรัม/มิลลิลิตร เมื่อจะใช้สารละลายมาตรฐาน. สามารถเก็บไว้สำหรับ 2 สัปดาห์ที่ 4 ℃.
วิธีแก้ปัญหาการทำงาน: เพิ่ม 2.625 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นเป็นรีเอเจนต์ III, ค่อยๆ เพิ่ม 14.875 H2SO4 เข้มข้น มล, คนอย่างต่อเนื่องและละลายให้หมดก่อนใช้. สามารถเก็บไว้สำหรับ 1 สัปดาห์ที่ 4 ℃.
รายละเอียดสินค้า:
แป้งเป็นรูปแบบการกักเก็บน้ำตาลหลักในพืช. การกำหนดปริมาณแป้งมีความสำคัญอย่างยิ่งในการประเมินคุณค่าทางโภชนาการของอาหารและการวิจัยเกี่ยวกับการเผาผลาญน้ำตาลในพืช.
แยกน้ำตาลที่ละลายน้ำได้ออกจากแป้งด้วย 80% เอทานอล, จากนั้นย่อยสลายแป้งให้เป็นกลูโคสโดยการไฮโดรไลซิสของกรด. ปริมาณแป้งสามารถคำนวณได้โดยการวัดปริมาณกลูโคสโดยใช้วิธีวัดสีแอนโทรน.
รีเอเจนต์และอุปกรณ์ที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้ให้:
เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์/เครื่องอ่านไมโครเพลท, อ่างน้ำ, ปิเปตแบบปรับได้, คิวเวทท์แก้วไมโคร/แผ่นก้นแบน 96 หลุม, ปูน/โฮโมจีไนเซอร์, น้ำแข็ง, H2SO4 เข้มข้นและน้ำกลั่น.
ขั้นตอน:
ฉัน. การจัดเตรียมตัวอย่าง:
-
- เอา 5 มิลลิกรัมของตัวอย่าง, บดในครกแล้วเติม 1 มิลลิลิตรของรีเอเจนต์ I. หลังจากทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน, ถ่ายโอนไปยังหลอดหมุนเหวี่ยง, วางในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 80 ℃เป็นเวลา 30 นาที, จากนั้นปั่นแยกที่อุณหภูมิห้องและ 3000 ×กรัม สำหรับ 5 นาที, ทิ้งส่วนเหนือตะกอน, รักษาปริมาณน้ำฝน.
- เพิ่ม 0.5 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นจนถึงตะกอน. ใส่ในอ่างน้ำเดือดเพื่อ 15 นาที (ขันฝาให้แน่นเพื่อป้องกันการสูญเสียน้ำ)
- หลังจากระบายความร้อนแล้ว, เพิ่ม 1 มล. ของรีเอเจนต์ II, ใส่ในอ่างน้ำเดือดเป็นเวลา 15 นาที, เขย่า 3~5 ครั้ง
- หลังจากระบายความร้อนแล้ว, เครื่องปั่นแยกที่อุณหภูมิห้องและ 3000 ×กรัม สำหรับ 15 นาที, นำส่วนเหนือตะกอนไปทดสอบ.
ครั้งที่สอง. การกำหนด ขั้นตอน:
- เปิดเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์/เครื่องอ่านไมโครเพลทก่อน 30 นาที, ปรับความยาวคลื่นเป็น 620 นาโนเมตร, ตั้งศูนย์ด้วยน้ำกลั่น.
- ปรับอ่างน้ำเป็น 95°C.
- โซลูชั่นการทำงานมาตรฐาน: เจือจาง 10 สารละลายมาตรฐาน มก./มล. ด้วยน้ำกลั่น 0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 มก./มล.
- การทดสอบมาตรฐาน: เอา 50 ไมโครลิตรของสารละลายมาตรฐานหรือ 50 น้ำกลั่น ไมโครลิตร (หลอดเปล่า) และ 250 μL ของสารละลายในการทำงานกับท่อ EP. วางในอ่างน้ำอุณหภูมิ 95°C เพื่อ 10 นาที (ขันฝาให้แน่นเพื่อป้องกันการสูญเสียน้ำ), เย็นตามธรรมชาติจนถึงอุณหภูมิห้อง, เอา 200 ไมโครลิตรเป็นคิวเวตต์แก้วขนาดเล็ก/แผ่นก้นแบน 96 หลุม, กำหนดค่าการดูดกลืนแสงของสารละลายมาตรฐาน(เช่น) และการควบคุมที่ว่างเปล่า(เอบี) ที่ 620 นาโนเมตร. คำนวณ ΔA=AS — AB. ท่อเปล่าและส่วนโค้งมาตรฐานจะต้องได้รับการทดสอบหนึ่งหรือสองครั้งเท่านั้น.
- การทดสอบตัวอย่าง: เอา 50 ไมโครลิตรของตัวอย่างและ 250 μL ของสารละลายสำหรับ EP Place ในอ่างน้ำอุณหภูมิ 95°C 10 นาที (ขันฝาให้แน่นเพื่อป้องกันการสูญเสียน้ำ), เย็นตามธรรมชาติถึงอุณหภูมิห้อง, เอา 200 ไมโครลิตรเป็นคิวเวตต์แก้วขนาดเล็ก/แผ่นก้นแบน 96 หลุม, กำหนดค่าการดูดกลืนแสงของหลอดทดลอง(ที่) ที่ 620 นาโนเมตร. คำนวณ ΔAˊ= AT — AB.
สาม. การคำนวณ:
- สร้างเส้นโค้งมาตรฐาน
ใช้สารละลายมาตรฐานของกลูโคส (0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 มก./มล) เป็นแกน x, ΔA เป็นแกน y, เพื่อวาดเส้นโค้งมาตรฐานและรับสมการถดถอยเชิงเส้น y=kx+b, การแทนที่ ΔAˊ ลงในสมการจะได้ค่า x(มก./มล).
- การคำนวณปริมาณแป้ง คำนวณโดยมวลของปริมาณแป้งตัวอย่าง (มวลมิลลิกรัม/กรัม) = x×F×VE۞W۞1.11=1.351x۞W×FVE: ปริมาณหลังจากการสกัด, 1.5 มล;
ว: มวลตัวอย่าง, ก;
เอฟ: อัตราส่วนการเจือจาง;
1.11: คือค่าคงที่ของการแปลงปริมาณกลูโคสที่วัดโดยวิธีนี้ให้เป็นปริมาณแป้ง, นั่นคือ, 111
กลูโคส μg จะถูกแต่งสีด้วยรีเอเจนต์แอนโทรน, ซึ่งเทียบเท่ากับ 100 แป้ง μg โดยรีเอเจนต์แอนโทรน.
บันทึก:
- เนื่องจากสารทำงานมีฤทธิ์กัดกร่อนสูง, กรุณาดำเนินการด้วย
- หากค่าการดูดกลืนแสงเกินช่วงเชิงเส้น, ขนาดตัวอย่างสามารถเพิ่มหรือเจือจางได้ก่อนทำการพิจารณา.
ตัวอย่างการทดลอง:
- นำข้าวโพด 0.05 กรัมไปบำบัดตัวอย่าง, เอาส่วนเหนือตะกอนไป, แล้วดำเนินการตามขั้นตอนที่กำหนด. ใช้ 96 แผ่นหลุมเพื่อวัดและคำนวณ ΔA′=AT-AB= 0.728-0.622 =0.195, เส้นโค้งมาตรฐาน y = 3.1829x + 0.002, คำนวณ x =195. ปริมาณแป้ง (มวลมิลลิกรัม/กรัม) = 1.351x×F-W= 1.351×0.195 × 128-0.05 = 674.4 มวลมิลลิกรัม/กรัม.
อ้างอิง
- เคล็ก เค เอ็ม. การใช้สารแอนโทรนรีเอเจนต์ในการประมาณค่าแป้งในธัญพืช[เจ]. วารสารวิทยาศาสตร์อาหารและการเกษตร, 1956, 7(1):40-44.
- วิเลส จูเนียร์, ซิลเวอร์แมน แอล. การหาปริมาณแป้งและเซลลูโลสด้วยแอนโทรน [เจ]. เคมีวิเคราะห์, 1949, 21(8):950-953.
สินค้าที่เกี่ยวข้อง
BC0610/BC0615 ดิน β-กลูโคซิเดส (ข- GC) ชุดทดสอบกิจกรรม
ชุดทดสอบกิจกรรมของ β-อะไมเลส BC2040/BC2045
BC1850/BC1855 แป้งสังเคราะห์ที่ละลายน้ำได้(สสส) ชุดทดสอบกิจกรรม
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์