การแนะนำ
ระบบการทำให้บริสุทธิ์ MagPure Plasmid ใช้เทคโนโลยีเม็ดบีดพาราแมกเนติกสำหรับการเตรียมปริมาณงานสูงสำหรับสำเนาสูงหรือสำเนาต่ำ พลาสมิดดีเอ็นเอ จาก E. เซลล์โคไล. ชุดนี้ยังสามารถใช้กับโครงสร้างแบบเวกเตอร์ fosmid และ BAC ได้ด้วย. ระบบใช้การสลายอัลคาไลน์ตามด้วยการทำให้บริสุทธิ์ MagPure เพื่อแยกพลาสมิด DNA กับเม็ดบีดพาราแมกเนติก. ขณะที่ดีเอ็นเอจับกับเม็ดบีด, สารปนเปื้อนสามารถชะล้างออกไปได้โดยใช้ขั้นตอนการซักง่ายๆ. เนื่องจาก MagPure ใช้เทคโนโลยีการแยกแม่เหล็ก, โปรโตคอลไม่จำเป็นต้องมีการกรองแบบสุญญากาศ. สิ่งนี้ทำให้ชุดอุปกรณ์ตอบสนองต่อระบบอัตโนมัติได้อย่างมาก. พลาสมิด DNA ที่ถูกทำให้บริสุทธิ์ด้วยระบบนี้ มักใช้ใน Sanger Sequencing และ พีซีอาร์ การขยายเสียง.
รายละเอียด
ข้อมูลจำเพาะ
คุณสมบัติ | ข้อมูลจำเพาะ |
ฟังก์ชั่นหลัก | แยกพลาสมิด DNA ได้มากถึง 20µg จากการเพาะเลี้ยงแบคทีเรีย 1-3 มล |
การใช้งาน | การย่อยอาหารของเอนไซม์, การเรียงลำดับ, PCR และการติดฉลาก, ฯลฯ. |
เทคโนโลยีการทำให้บริสุทธิ์ | เทคโนโลยีลูกปัดแม่เหล็ก |
วิธีการประมวลผล | ด้วยตนเองหรืออัตโนมัติ |
ประเภทตัวอย่าง | พลาสมิดธรรมดา, พลาสมิด≤30KB |
จำนวนตัวอย่าง | 1-3มล |
ปริมาณการชะล้าง | ≥50ไมโครลิตร |
หลักการ
ผลิตภัณฑ์นี้ใช้วิธีการทำให้บริสุทธิ์ของอนุภาคแม่เหล็กที่มีการยึดเกาะสูง. ตัวอย่างจะถูกสลายและย่อยภายใต้การกระทำของไลซีนและไลโซไซม์. DNA ถูกปล่อยเข้าไปในไลซีน. หลังจากเติมอนุภาคแม่เหล็กและสารละลายยึดเกาะแล้ว, DNA จะถูกดูดซับบนพื้นผิวของอนุภาคแม่เหล็ก, และสิ่งสกปรกเช่นโปรตีนจะถูกกำจัดออกไปโดยไม่มีการดูดซับ. อนุภาคที่ถูกดูดซับถูกล้างด้วยน้ำยาล้างเพื่อกำจัดโปรตีนและสิ่งเจือปน, ล้างด้วยเอทานอลเพื่อขจัดเกลือ, และในที่สุด DNA ก็ถูกชะล้างด้วย Elution Buffer.
ข้อดี
- มีความบริสุทธิ์สูง – พลาสมิดบริสุทธิ์สามารถนำมาใช้ในการเรียงลำดับได้โดยตรง, การย่อยเอนไซม์และ PCR, ฯลฯ.
- ให้ผลผลิตสูง – พลาสมิดสูงถึง20μgสามารถใช้ในคอลัมน์เดียวได้
เนื้อหาชุด
สารบัญ | p181102 | p181103 | P181104 |
เวลาการทำให้บริสุทธิ์ | 100 การเตรียมการ | 500 การเตรียมการ | 5000 การเตรียมการ |
อาร์เนส เอ | 10 มก | 50 มก | 2 x 250 มก |
บัฟเฟอร์ P1 | 30 มล | 150 มล | 2 x 750 มล |
บัฟเฟอร์ P2 | 30 มล | 150 มล | 2 x 750 มล |
บัฟเฟอร์ N3 | 30 มล | 150 มล | 2 x 750 มล |
บัฟเฟอร์ PW1 | 35 มล | 180 มล | 2 x 900 มล |
Magpure Particle NB* | 2.2 มล | 11 มล | 2 x 60 มล |
การจัดเก็บและความเสถียร
RNase A และ Magpure อนุภาค NB ควรเก็บไว้ที่ 2-8 ° C เมื่อมาถึง. อย่างไรก็ตาม, การจัดเก็บระยะสั้น (จนถึง 24 สัปดาห์) ที่อุณหภูมิห้อง (15-25องศาเซลเซียส) ไม่ส่งผลกระทบต่อประสิทธิภาพการทำงาน. ส่วนประกอบชุดอุปกรณ์ที่เหลือสามารถเก็บไว้ให้แห้งได้ที่อุณหภูมิห้อง (15-25องศาเซลเซียส) และมีเสถียรภาพเป็นอย่างน้อย 18 เดือนภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้. หลังจากเพิ่ม RNase a, บัฟเฟอร์ P1 มีความเสถียรสำหรับ 6 เดือนเมื่อเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8°C.
ข้อมูลการทดลอง
รีวิว
ยังไม่มีบทวิจารณ์