Solarbio Weigert의 그람염색액(수정된 콘)

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설명

사양: 4*50ML

시약 구성
시약 (ㅏ) 크리스탈 바이올렛 염색 솔루션
시약 (비) 산성 에탄올 분화 용액
시약 (씨) 암모늄 옥살 레이트 크리스탈 바이올렛 염색 용액
시약 (디) Refusert의 요오드 솔루션

저장: 실온, 빛을 피하다

제품 설명:

  • 그램 염색:
    • 발명:
      • 덴마크의 의사 Christian Gram에 의해 발명되었습니다 1884.
    • 방법:
      • 세균학에서 널리 사용되는 차등 염색 방법.
      • 카운터 스테인의 형태.
    • 목적:
      • 박테리아를 두 가지 주요 클래스로 구분합니다:
        • 그람 양성 (G*)
        • 그람 음성 (G)
    • 기구:
      • 차이에 기초한 차등 염색:
        • 에탄올에 대한 세포벽의 투과성
        • 탈색에 저항하는 능력
        • 펩티도 글리 칸 층의 두께 및 구조
    • 염색 과정:
      • 크리스탈 바이올렛으로 염색 된 세포 후 요오드 형태의 불용성 복합체로 처리 된 세포.
      • 에탄올에 의해 탈색된다.
    • 등전점:
      • 그람 양성 박테리아: pH에서의 등전점 2.0-3.0
      • 그람 음성 박테리아: pH에서의 등전점 4.0-5.0
    • 바인딩 특성:
      • 그람 양성 박테리아는 더 많은 음전하를 가지고 있습니다.
      • Crystal Violet과 같은 기본 염료에 더 단단히 바인딩.
    • 복합체의 형성:
      • Mordant를 추가 한 후 (요오드) 박테리아 세포로:
        • 물에 불용성이 불용성 된 결정 바이올렛-요오드-단백질 복합체가 형성된다.
        • 그람 양성 박테리아 내부의 리보 핵산 마그네슘 염에 결합합니다.
    • 결과:
      • 염색 된 박테리아는 탈색하기 쉬운 경향이 적습니다.

작동 단계 (참고용으로만):

  1. 조직 고정 10% 포르말린, 일상적인 탈수 임베딩.
  2. 섹션을 4μm의 두께로 절단합니다, 그리고 Dewax는 정기적으로 물에.
  3. 크리스탈 바이올렛 염색 솔루션에서 염색 슬라이스를 떨어 뜨립니다 5 분, 그런 다음 염료를 버립니다.
  4. 산성 에탄올 분화 솔루션에서 차별화 2-5 초.
  5. 흐르는 물로 헹구십시오 3-5 초.
  6. 암모늄 옥살 레이트 크리스탈 바이올렛 염색 용액에서 염색 슬라이스를 떨어 뜨립니다. 5 분, 그런 다음 염료를 버립니다. 종이를 사용하여 슬라이스 주위에 과도한 액체를 부드럽게 흡수하십시오..
  7. Weigert의 요오드 용액으로 슬라이스를 처리하십시오 1 분, 그런 다음 요오드 용액을 버립니다. 필터 종이로 슬라이스 내부의 수분을 반복적으로 흡수하십시오..
  8. 슬라이스에서 자주색 색상 침출이 없을 때까지 오르토-톨루이딘-Xylene 용액과 구별. 자일렌으로 즉시 씻으십시오, 현미경으로 관찰하십시오. 신선한 자일 렌으로 여러 번 세척을 반복하여 오르토 톨루이딘을 철저히 제거하십시오.. 중성 수지로 밀봉하십시오.

염색 결과:

  • 그람 양성 박테리아 및 셀룰로오스: 파란색
  • 그람 음성 박테리아: 빨간색
  • 세포 핵: 빨간색

지침:

  1. 크리스탈 바이올렛 염색 용액에서 염색 후, 조각을 물로 씻지 마십시오. Crystal Violet에 의해 염색 된 색상을 고정하기 위해 산성 에탄올로 직접 구별.
  2. 오르토 톨루이딘-Xylene 용액으로 구분할 때, 균일 한 차별화를 보장하기 위해 슬라이스를 부드럽게 흔들립니다. 필요하다면, 신선한 오르토 톨루이딘-Xylene으로 교체하십시오.
  3. 슬라이스에서 자주색 색상 침출이 없을 때까지 구별, 그런 다음 즉시 Ortho Toluidine-Xylene을 버리고 신선한 자일렌으로 세척하십시오.. 자일렌 세척 후 현미경 아래에서 관찰하십시오.
  4. 차별화가 충분하지 않은 경우, 오르토 톨루이딘-Xylene을 다시 추가하고 그람 양성 박테리아가 명확하게 보일 때까지 분화를 계속하십시오., 그러나 과도하게 분화하지 않도록주의하십시오.
  5. 마지막으로, 자일 렌으로 슬라이스를 반복적으로 씻어 오르토 톨루이딘을 완전히 제거합니다.. 소량의 오르토 톨루이딘이 슬라이스에 남아있는 경우, 그들은 나중에 쉽게 사라질 수 있습니다.
  6. 귀하의 안전과 건강을 위해, 작동 중에 실험실 코트와 일회용 장갑을 착용하십시오.

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