Solarbio 조직 및 혈액 알칼리성 인산분해효소 (AKP/ALP) 활동 분석 키트

조직 및 혈액 알칼리성 인산분해효소 (AKP/ALP) 활동 분석 키트

메모: 테스트 전에 예측을 위해 2~3개의 서로 다른 샘플을 채취합니다..

운영장비: 분광 광도계

카탈로그 번호: BC2140

크기: 50T/24S

구성요소:

추출시약: 액체 30 밀리리터×1병, 4℃에서 보관.

시약 1: 액체 10 밀리리터×1병, 4℃에 보관하고 빛으로부터 보호하세요..

시약 2: 액체 10 밀리리터×1병, 4℃에 보관하고 빛으로부터 보호하세요..

시약 3: 액체 30 밀리리터×1병, 4℃에 보관하고 빛으로부터 보호하세요.. 청록색으로 변하면 사용할 수 없습니다..

기준: 액체 1 밀리리터×1병, 10 μmol/mL 페놀 표준 용액, 4℃에서 보관. 증류수로 희석하여 2.5 사용 전 μmol/mL.

제품 설명:

AKP/ALP는 아연 함유 글리코프로테아제입니다., 알칼리성 조건에서 다양한 천연 및 합성 인지질 모노에스테르 화합물을 가수분해합니다.. AKP / ALP는 인간의 장기에 널리 분포되어 있습니다., 주로 간에.

알칼리성 상태에서, AKP/ALP는 이나트륨 페닐 인산염을 페놀로 가수분해하는 과정을 촉매합니다., 페놀은 4-아미노안티피린 및 페리시안화칼륨과 반응하여 적색 퀴논 유도체를 형성합니다., 흡광도를 검출할 수 있는 510 nm. AKP/ALP 활성은 흡광도 증가율을 측정하여 계산할 수 있습니다. 510 nm.

필요하지만 제공되지 않는 시약 및 장비:

분광 광도계, 책상 원심분리기, 트랜스페터, 1 mL 유리 큐벳, 얼음과 증류수.

절차:

나. 효소 준비:

추가하다 1 mL 추출 시약 0.1 g 티슈, 철저히 갈아서. 4℃에서 원심분리기, 10000 rpm 10 분. 테스트를 위해 얼음 위의 상등액을 채취합니다.. 혈액 샘플을 직접 감지할 수 있습니다.. 농도가 높을 경우 추출시약으로 희석.

II. 결정 절차:

1. 예열 분광 광도계 30 분, 파장을 조정하여 510 nm, 증류수로 카운터를 0으로 설정
2. 시약 추가 1.5 mL 큐벳은 다음과 같습니다:

시약명 (μL)	시험관 A3	컨트롤 튜브 A4	블랭크 튜브 A2	표준 튜브 A1
증류수			20
표준 용액				20
상청액	20
시약 1	200	200	200	200
시약 2	200	200	200	200
잘 섞어주세요, 37℃에 머물다 15 분.
시약 3	600	600	600	600
상청액		20
잘 섞어주세요, 흡광도를 감지하다 510 nm, A1으로 기록, A2, A3, A4.

III. AKP/ALP 활동 계산:

• 단백질 농도:

단위 정의: 효소 활성의 1단위는 다음과 같은 효소의 생성을 촉매하는 효소의 양으로 정의됩니다. 1 단백질 mg당 37℃에서 분당 반응 시스템의 μmol 페놀.

AKP/ALP (U/mg 프로트) =[C×(A3-A4)¶(A1-A2)×대]¶(Cpr×Vs)¼T=0.167×(A3-A4)¶(A1-A2)¼Cpr

• 샘플 중량:

단위 정의: 효소 활성의 1단위는 다음과 같은 효소의 생성을 촉매하는 효소의 양으로 정의됩니다. 1 샘플 g당 37℃에서 분당 반응 시스템의 μmol 페놀.

AKP/ALP (U/g 중량) =[C×(A3-A4)¶(A1-A2)×대]¶(W²Ve×Vs)¼T=0.167×(A3-A4)¶(A1-A2)¼W

• 피:

단위 정의: 효소 활성의 1단위는 다음과 같은 효소의 생성을 촉매하는 효소의 양으로 정의됩니다. 1 혈청 1mL당 37℃에서 분당 반응 시스템의 μmol 페놀.

AKP/ALP (U/mL) =[C×(A3-A4)¶(A1-A2)×대]¼Vs²T=0.167×(A3-A4)¶(A1-A2)

씨: 표준농도, 2.5 μmol/mL;

로프: 총 반응량, 1020 μL=1.02mL; 대: 상청액량, 0.02 밀리리터;

베: 추출량, 1 밀리리터; 여: 샘플 중량, g;

티: 반응 시간, 15 분;

심폐소생술: 샘플 단백질 농도, mg/mL.

메모:

1. 시약 1, 시약 2 및 시약 3 으로부터 보호받아야 한다
2. 시약 3 청록색으로 변경된 경우 사용할 수 없습니다..
3. 시약을 첨가한 후 신속하게 완전히 혼합하십시오. 3 불완전한 것을 피하기 위해

실험예:

1. 마우스 췌장 0.1g을 채취하여 첨가합니다. 1 균질화를 위한 추출 용액 mL. 상등액을 취한 후, 결정 단계에 따라 작동. AT = 계산 0.324, AC = 0.037, AB = 0.022, 그대로 = 0.677. 샘플 질량에 따라 효소 활성을 계산합니다.: AKP/ALP 효소 활성 (U/g 질량) = 0.167×(AT-AC)¶(AS-AB) ¼ W =0.167×(0.324-0.037)¶(0.677-0.022)¼0.1=0.732U/g
2. 토끼 혈청을 복용한 후, 결정 단계에 따라 작업이 수행됩니다., 효소 활성은 다음과 같이 계산됩니다.: 에 = 0.190, AC = 0.015, AB = 0.022, 그대로 = 0.677. 혈액량에 따라, 효소 활성은 다음과 같이 계산됩니다.: AKP/ALP 효소 활성 (U/mL) = 0.167×(AT-AC) ¶ (AS-AB) =0.167×(0.190-0.015)¶(0.677-0.022)=0.0446U/mL.

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