Solarbio 전분 함량 분석 키트

전분 함량 분석 키트

메모: 테스트 전에 예측을 위해 2~3개의 서로 다른 샘플을 채취합니다.. 운영장비: 분광 광도계/마이크로플레이트 리더.

고양이 번호: BC0705

크기: 100T/96S

구성요소:

시약 I: 110 밀리리터×1. 4℃에서 보관.

시약 II: 110 밀리리터×1. 4℃에서 보관.

시약 III: 가루×2. 4℃에서 보관.

기준: 가루×1, 10 mg 포도당 (무수의). 4℃에서 보관.

표준 용액: 다음으로 용해됨 1 mL의 증류수를 10 표준액을 사용할 경우 mg/mL 포도당 표준액. 다음을 위해 저장할 수 있습니다. 2 4℃에서 몇 주.

작업 솔루션: 추가하다 2.625 mL의 증류수를 시약 III에, 천천히 추가하세요 14.875 농축된 H2SO4의 mL, 사용하기 전에 계속 저어주고 완전히 녹입니다.. 다음을 위해 저장할 수 있습니다. 1 일주일 동안 4℃.

제품 설명:

전분은 식물에서 설탕의 주요 저장 형태입니다.. 전분 함량의 결정은 식품의 영양가를 평가하고 식물의 당 대사를 연구하는 데 큰 의미가 있습니다..

전분에서 가용성 설탕을 분리하는 방법 80% 에탄올, 그런 다음 산 가수분해에 의해 전분을 포도당으로 분해합니다.. 전분 함량은 안트론 비색법을 사용하여 포도당 함량을 측정하여 계산할 수 있습니다..

필요하지만 제공되지 않는 시약 및 장비:

분광 광도계/마이크로플레이트 리더, 욕조, 조절 가능한 피펫, 마이크로 유리 큐벳/96웰 평면 바닥 플레이트, 모르타르/균질화기, 얼음, 농축 H2SO4 및 증류수.

절차:

나. 샘플 준비:

1. 1. 가져가다 5 샘플 mg, 모르타르에 갈아서 첨가한다 1 mL의 시약 I. 균질화 후, 원심분리 튜브로 옮김, 80℃ 수조에 담가둔다 30 분, 그런 다음 실온에서 원심분리하고 3000 ×g 5 분, 상층액을 버린다, 강수량을 유지하다.
   2. 추가하다 0.5 침전물에 증류수 1mL. 끓는 물 욕조에 넣어 15 분 (물 손실을 방지하기 위해 뚜껑을 단단히 닫으십시오.)
   3. 식힌 후, 추가하다 1 시약 II의 mL, 끓는 물에 15분 동안 담가두세요, 3~5회 흔든다
   4. 식힌 후, 실온에서 원심분리기 및 3000 ×g 15 분, 시험을 위해 상등액을 채취하다.

II. 결정 절차:

1. 분광광도계/마이크로플레이트 리더를 예열합니다. 30 분, 파장을 조정하다 620 nm, 증류수로 0을 설정하다.
2. 수조를 95°C로 조정합니다..
3. 표준 작업 솔루션: 희석하다 10 mg/mL 표준 용액에 증류수를 첨가하여 0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 mg/mL.
4. 표준 테스트: 가져가다 50 μL의 표준 용액 또는 50 증류수 μL (빈 튜브) 그리고 250 EP 튜브에 대한 작업 용액의 μL. 95℃ 수조에 넣어서 10 분 (물 손실을 방지하기 위해 뚜껑을 단단히 닫으십시오.), 실온에서 자연 냉각, 가져가다 200 μL - 마이크로 유리 큐벳/96웰 평면 바닥 플레이트, 표준용액의 흡광도 측정(처럼) 및 블랭크 컨트롤(AB) ~에 620 nm. ΔA=AS — AB를 계산합니다.. 빈 튜브와 표준 곡선은 한두 번만 테스트하면 됩니다..
5. 샘플 테스트: 가져가다 50 μL의 샘플 및 250 μL의 작업 용액을 EP에 넣고 95℃ 수조에 넣습니다. 10 분 (물 손실을 방지하기 위해 뚜껑을 단단히 닫으십시오.), 자연적으로 실온으로 냉각, 가져가다 200 μL - 마이크로 유리 큐벳/96웰 평면 바닥 플레이트, 시험관의 흡광도 결정(에) ~에 620 nm. ΔAˊ= AT — AB를 계산합니다..

III. 계산:

1. 표준곡선 생성

포도당 표준액을 복용한다 (0.4, 0.2, 0.1, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01 mg/mL) x축으로, y축으로서의 ΔA, 표준 곡선을 그리고 선형 회귀 방정식 y=kx+b를 얻으려면, ΔAˊ를 방정식에 대입하면 x가 산출됩니다.(mg/mL).

2. 전분 함량 계산 시료의 질량으로 계산 전분 함량 (mg/g 질량) = x × F × VE ² W ² 1.11=1.351x ² W × F VE: 추출 후 용량, 1.5 밀리리터;

여: 샘플 질량, g;

에프: 희석비율;

1.11: 는 이 방법으로 측정된 포도당 함량을 전분 함량으로 변환하는 상수입니다., 즉, 111

μg의 포도당은 안트론 시약으로 착색됩니다., 이는 다음과 같습니다. 100 안트론 시약에 의한 μg 전분.

메모:

1. 작동유체는 부식성이 강하기 때문에, 작동해주세요
2. 흡광도 값이 선형 범위를 초과하는 경우, 측정 전에 샘플 크기를 늘리거나 희석할 수 있습니다..

실험예:

1. 시료 처리를 위해 옥수수 0.05g을 채취합니다., 상층액을 취하다, 그런 다음 결정 단계에 따라 작동합니다.. 사용 96 ΔA'=AT-AB=를 측정하고 계산하기 위한 웰 플레이트 0.728-0.622 =0.195, 표준 곡선 y = 3.1829x + 0.002, 계산 x = 195. 전분 함량 (mg/g 질량) = 1.351x×F²W= 1.351×0.195 × 128¼0.05 = 674.4 mg/g 질량.

참고자료

• 클레그 KM. 곡물의 전분 추정에 안트론 시약을 적용[제이]. 식품농업과학저널, 1956, 7(1):40-44.
• 바일스 주니어, 실버맨 L. 안트론을 이용한 전분 및 셀룰로오스 측정 [제이]. 분석 화학, 1949, 21(8):950-953.

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