산시비오 2× SYBR 그린 qPCR 믹스

제품 번호： EH003 사양：1mL 저장: -20°C에서 보관

제품소개：

• 실시간을위한 특수 시약 PCR 이용 SYBR 녹색 I 염료 기반 형광 방법.
• 저온 조건 하에서 프라이머 이량 체화 또는 프라이머의 비특이적 어닐링으로 인한 비특이적 증폭을 억제하기 위해 항체-차단 된 뜨거운 시작 효소를 함유한다..
• 증폭 반응의 특이성을 향상시킵니다.
• 높은 증폭 효율을 특징으로합니다, 강한 탐지 특이성 및 감도, 좋은 안정성, 그리고 쉬운 운영 사용.
• 광범위한 정량 범위 내에서 강력한 표준 곡선을 생성합니다., 정확한 정량화 가능.
• 다양한 형광 정량적 PCR 기기와 호환됩니다, Applied Biosystems의 것들을 포함합니다, Eppendorf, 바이오 라드, 로슈, 그리고 다른 국내 브랜드.

상품 내용：

메모：

• ROX 참조 염료는 특정 실시간 PCR 증폭 기기에서 웰 간 형광 신호 오차를 수정합니다..
• ROX 참조 염료 I은 ABI PRISM 7000/7700/7300/7900HT 및 1 단계 플러스 실시간 PCR 시스템에 적합합니다..
• ROX Reference Dye II는 호환됩니다 7500 실시간 PCR 시스템, 7500 빠른 실시간 PCR 시스템, 스트라타겐 MX3000p, MX3005P, 및 MX4000.
• ROX 참조 염료 I 및 II는 반응에서 1x의 최종 농도에서 사용되어야합니다..
• LightCycler와 같은 악기, 열 사이클러 주사위 실시간 시스템 II, 그리고 스마트 사이클러 시스템은 ROX 참조 염료를 사용할 필요가 없습니다..

저장:

-20°C에서 보관, 최소 유효 기간이 있습니다 12 개월.

활동 정의:

템플릿/프라이머로 활성화 된 Mahi-Mahi 정자 DNA를 사용합니다, 활동은 다음과 같이 정의됩니다 1 단위 (유) 산이적 불용성 물질의 통합, 차지함으로써 10 내부 뉴클레오티드의 NMOL 30 74 ° C에서 분.

품질 관리:

이 제품은 품질 테스트를 거쳤으며 Deoxyribonuclease endonuclease 활성이 없습니다., 데 옥시 리보 뉴 클레아 제 Exonuclease 활성, 리보 뉴 클레아 제 오염. 숙주 게놈 DNA 잔류 함량은 다음과 같습니다 10 사본.

제품 사용:

실시간 형광 정량 QPCR (염료 방법) DNA 또는 cDNA를 증폭시킵니다; 절대 정량적 qpcr; 상대 정량적 qpcr.

사용 지침:

• 필요한 시약이 완전히 녹을 때까지 실온으로 평형화하도록합니다., 부드럽게 철저히 섞으십시오 (와류가 아닙니다), 과도한 거품 형성 및 반복 동결-해동 사이클을 피하기 위해 간단한 원심 분리 후 사용. 자주 사용하는 경우, 4 ° C에 저장하십시오. 눌린 구성 요소에 따라 PCR 반응 믹스를 준비하십시오. (아이스 박스에서 반응 믹스를 준비하십시오):

메모：실제 요구에 따라 각 구성 요소의 양을 조정할 수 있습니다.. ROX 참조 염료의 추가는 사용중인 특정 모델을 기반으로 사용자가 결정해야합니다..

• 일반적으로, 반응에 2 단계 방법을 사용할 수 있습니다. 증폭이 2 단계 방법에 만족하지 않은 경우, PCR 반응 프로그램을 설정하기 위해 3 단계 방법을 사용할 수 있습니다..

메모： 실제 요구에 따라 반응 조건을 조정하고 최적화 할 수 있습니다.. 용융 곡선 프로그램은 사용중인 증폭 기기의 프로그램을 기반으로 선택하고 적응해야합니다..

• 반응이 완료된 후, 증폭 곡선 및 용융 곡선 결과를 분석하십시오. 자세한 분석 방법은 실시간 PCR Instrument의 사용자 설명서를 참조하십시오..

지침:

1. 적절한 어닐링을 선택하십시오 (확대) 프라이머 설계를 기반으로 한 온도, 프라이머 TM은 전형적으로 약 60 ° C입니다. 어닐링 온도가 낮은 프라이머의 경우, 3 단계 방법이 권장됩니다. 사용 된 프라이머의 최종 농도는 0.2-1.0μm 범위 내에서 조정될 수 있습니다.. DNA 주형 농도는 농도에 따라 조정될 수 있습니다..
2. Sybr Green I Dye는 이중 가닥 DNA에 결합 할 때 형광을 방출하는 비특이적 염료입니다. (dsDNA). 하지만, 강한 빛으로 쉽게 저하됩니다. 그러므로, 프라이머를 설계 할 때, 프라이머 이량 체 형성을 최대한 피하는 것이 중요합니다.. 사용 중, 결과 정확도를 높이기 위해 강한 빛에 대한 장기 노출을 피해야합니다., 감광도, 그리고 특이성.
3. 마그네슘 이온 농도를 증가 시키면 PCR 반응에 대한 SYBR 녹색 I의 억제 효과를 감소시킬 수 있습니다.. 이 생성물을 사용하여 형광 PCR 반응을 최적화 할 때, 마그네슘 이온 농도를 약간 증가시키는 것이 좋습니다. (0.5-3.0표준 PCR 반응보다 높은 mm).
4. 증폭 전후에 전용 영역과 피펫을 사용하십시오, 장갑을 착용하십시오, 그리고 자주 바꾸십시오. PCR 반응을 완료 한 후, PCR 제품으로 테스트 환경의 오염을 최소화하기 위해 반응 튜브를 열지 마십시오..