구강 면봉 게놈 DNA 추출 키트

1. 시약 키트의 구성 요소

명세서	50티	100티
고양이. 아니요.	SN0233	SN0234
DNA 추출 컬럼 (세트)	50 (세트)	100 (세트)
시약 완충액 B	20 밀리리터	2×20 밀리리터
시약 완충액 C	30 밀리리터	2×30 밀리리터
세척 버퍼 1	15 밀리리터	2 × 15 밀리리터
용출 버퍼	20 밀리리터	20 밀리리터
단백질분해효소 K	1밀리리터	1밀리리터
RNase A	1밀리리터	1밀리리터
사용 설명서	1	1

 

2. 저장

이 시약 키트는 실온에서 보관해야 합니다. (15-25℃) 그리고 건조한 환경에서는, 유효기간이 있는 12 개월. DNA 추출 정제 컬럼은 다음 용도로 보관할 수 있습니다. 1 시원하고 건조한 환경에서 1년 동안. 단백질분해효소 K 및 RNase A 방부제 함유, 실온에서 운송 가능, 하지만 장기간 보관을 위해서는, -20℃에 보관해야 합니다.

3. 시약 키트 사용 지침

3.1 이 시약 키트는 분자생물학 연구용이므로 질병 진단이나 치료에 사용해서는 안 됩니다..

3.2 시약 키트의 일부 구성품에는 자극제가 포함되어 있습니다.. 보호복, 고글 착용 등의 보호 조치가 권장됩니다..

3.3 이 시약 키트를 사용하는 동안, 고속 원심분리기, 욕조 (금속 욕조), 소용돌이 믹서, 무수에탄올, 멸균 탈이온수, EP 튜브는 사용자가 준비해야 합니다..

4. 시약 키트 소개

 

구강 면봉 DNA 정제 키트는 구강 면봉에서 DNA를 정제하는 빠르고 효율적인 방법을 제공합니다., 경구 상피와 같은 상피 세포의 추출에 널리 사용.

 

구강 면봉 DNA 급속한 정제 키트는 구강 상피 세포에서 총 DNA를 추출 할 수 있습니다. 30 분. 전체 정제 공정에는 페놀-클로로포름과 같은 독성 시약이 필요하지 않습니다.. 추출된 DNA는 다음과 같은 목적으로 직접 사용될 수 있습니다. PCR, 서던 블로팅, 및 기타 응용 프로그램.

5. 실험 원리 및 절차

6. 추출과정

실험을 시작하기 전에:

ㅏ. 시약 완충 B 및 c 저온 조건에서 침전될 수 있음. 65℃로 가열하는 것을 권장합니다. 5 분. 침전물이 용해된 후, 정상적으로 사용할 수 있어요.

비. 사용하기 전에, 규정량의 무수에탄올을 첨가한다. 세척 버퍼 1병 라벨에 표시된대로. 무수 에탄올 첨가를 나타내기 위해 라벨에 체크 표시를 하십시오..

씨. 용출 완충액은0.1x TE 솔루션최소한의 EDTA 함유. EDTA가 후속 실험에 영향을 미칠 수 있는 경우, Elution Buffer를 멸균 탈이온수로 대체하는 것이 좋습니다..

1. 샘플 취급:
2. 견본 추출: 멸균 된 면봉을 가져 가십시오, 입에 삽입하십시오, 내면의 뺨에 앞뒤로 문지르십시오. 20 타임스.
3. 가위를 사용하여 면봉의 머리를 자릅니다., 그것을 a에 넣으십시오 2 ML 원심 분리 튜브, 그리고 추가 400μl의 시약 버퍼 b.
4. 추가하다10μl 단백질분해효소 K (10 mg/ml) 및 10μL RNase a (10 mg/ml), 철저히 반전, 65°C에서 배양합니다. 20 분, 소용돌이 10 인큐베이션 중에 초.
5. 추가하다 400μl의 시약 버퍼 c용해물에, 와류가 철저히.
6. 추가하다 200μL의 사전 융 화 된 절대 에탄올, 잘 섞다; 강수량이 발생할 수 있습니다, 하지만 후속 실험에는 영향을 미치지 않습니다..
7. 얻어진 액체를 DNA 추출 및 정제 컬럼으로 옮깁니다. (전부) (매번 약 650~700μl), 원심분리기 >8,000 rpm 1 분, 수집된 폐액을 폐기합니다., 수집 튜브를 DNA 추출 및 정제 컬럼으로 다시 삽입하십시오. (전부) 다음 단계를 위해.
8. DNA 추출 및 정제 컬럼을 놓습니다 (전부) 수집 튜브로, 추가하다 300세척 완충액의 μl 1, 원심분리기 >8,000 rpm 1 분, 폐액을 버리다, 및 DNA 추출 및 정제 컬럼을 재 삽입하십시오 (전부) 다음 단계를 위해 튜브에.

(메모: 절대 에탄올이 세척 완충액에 첨가되었는지 확인하십시오. 1.)

7. 추가하다 500세척 완충액의 μl 1DNA 추출 및 정제 컬럼에 (전부), 원심분리기 14,000 rpm (20,000×g) ~을 위한 2 분, 막을 추가로 건조시키기 위해 원심 분리 시간을 적절하게 연장합니다..
8. DNA 추출 및 정제 컬럼을 놓습니다 (전부) 새로운 원심분리 튜브에, 뚜껑을 열어라, 65°C에서 배양합니다. 2 분; 이 단계는 가능한 한 많은 에탄올을 증발시키기 위해 적절하게 확장 될 수 있습니다., 잔류 에탄올이 하류 실험에 영향을 미치는 것을 방지합니다.
9. 용리 100용출 완충액 μl멤브레인 위에, 원심분리기 12,000 rpm 2 분.

(메모: 1. 50μL의 용리 완충제로 DNA를 용리하면 DNA 농도를 증가 시키지만 총 DNA 수율을 감소시킬 수 있습니다.; 2. 용리로 용리 된 DNA는 DNA 추출 및 정제 컬럼에 다시 적용 될 수 있습니다., 다시 원심분리기를 놓는다 12,000 rpm 2 DNA 수율을 높이기위한 분.)