| 属性 | 詳細 |
|---|---|
| 猫 | G1492 |
| サイズ | 4 ×10mL, 4 ×20mL |
| ストレージ | -20℃, 光を避ける, に有効です 3 月 |
キットのコンポーネント:
| 試薬 | 4×10mL | 4×20mL | ストレージ |
|---|---|---|---|
| 試薬(あ): トラップ固定剤 | 50mL | 100mL | 2-8℃, 光を避ける |
| 試薬(B): | |||
| トラップインキュベーションソリューション | B1: AS-BIバッファー1ml | 2x1ml | -20℃, 光を避ける |
| B2: GBCソリューション0.1ml | 2×0.2mL | -20℃, 光を避ける | |
| B3: トラップバッファ9ml | 18mL | RT, 光を避ける | |
| 試薬(C): ヘマトキシリン溶液 | 10mL | 20mL | 2-8℃, 光を避ける |
| 試薬(D): メチルグリーンソリューション | 10mL | 20mL | RT, 光を避ける |
導入:
酸性ホスファターゼ (ACP) さまざまな組織に広く分布しています, 主にリソソームで, マーカー酵素として機能します. 酒石酸耐酸酸性酸ホスファターゼ (トラップ), 主にヒト肺胞マクロファージと白血病脾臓細胞に見られる, 血液ではなく細胞卵胞に放出されます. 血液中のトラップは、主に破骨細胞に由来します, 破骨細胞関数の評価を可能にします.
酒石酸耐酸酸性酸ホスファターゼ (トラップ) ステインキットの原理には、AS-BI基質を伴う酸ホスファターゼの加水分解が含まれます, 酸性pHでリン酸とナフトールを放出します. ナフソールとジアゾ塩の結合は、細胞質に局在する色付き製品を形成します. 陽性染色は、酒石酸耐性活性を示します. 一般的に新鮮な血液塗抹標本に使用されます, 細胞塗抹標本, フローズンセクション.
自己提供の資料:
蒸留水, インキュベータ, 滑り台, 顕微鏡
プロトコル (参照のみ):
血液または細胞塗抹標本用:
- 乾燥塗抹標本, 4°Cで30S〜3分間トラップ固定を修正します.
- 蒸留水で洗う, そして空気乾燥.
- トラップインキュベーションソリューションを適用します, 暗闇の中で37°Cで45〜60分間インキュベートします. 次に洗ってください.
- 2〜3分のヘマトキシリン溶液またはメチルグリーン溶液で再染色.
- 洗浄または密閉後に顕微鏡下のセクションを表示します.
冷凍セクションの場合:
- 1〜2分間、水に浸してセクションを37°Cに復元します.
- 空気乾燥, 4°Cで1〜3分間トラップ固定液を修正します.
- 蒸留水で洗う, そして空気乾燥.
- トラップインキュベーションソリューションを適用します, 暗闇の中で37°Cで45〜60分間インキュベートします. 次に洗ってください.
- 2〜3分のヘマトキシリン溶液またはメチルグリーン溶液で再染色.
- 洗浄または密閉後に顕微鏡下のセクションを表示します.
パラフィンセクションの場合:
- 段階的なアルコールの脱ワックスおよび再水和物セクション.
- 蒸留水で洗う, そして空気乾燥.
- トラップインキュベーションソリューションを適用します, 暗闇の中で37°Cで45〜60分間インキュベートします. 次に洗ってください.
- 2〜3分のヘマトキシリン溶液またはメチルグリーン溶液で再染色.
結果:
| 結果 | 色 |
|---|---|
| ポジティブ | 紫がかった赤 |
| 核 | 青または緑 |
臨床的意義:
- トラップ染色は、毛状細胞白血病の診断に役立ちます.
- 急性白血病の未熟な単球では陽性染色が観察されます.
- Tリンパ球は陽性トラップ染色を示します.
- ゴーチャー細胞は強い陽性染色を示します.
注記:
- トラップインキュベーションソリューションは、すぐに効果を失う可能性があります.
- 凍結切片を染色するための暴露時間を短縮します.
- 正確な結果を得るには、すぐに新鮮なサンプルを使用してください.
- 4°Cの固定液で組織を以下で保存します 24 時間.
- 酵素活性を維持するために、埋め込み中のパラフィン温度を制御します.
- 分解を防ぐために、高品質のキシレンを確保します.
- 安全のために実験的な衣服と使い捨て手袋を着用してください.
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