ソーラーバイオ乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH) 活性アッセイキット
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ソーラーバイオ乳酸デヒドロゲナーゼ (LDH) 活性アッセイキット

$60.00

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説明

品目番号: BC0685

仕様: 100 テスト/48 ストリップ

導入

  • 乳酸脱水素酵素 (LDH) 活性アッセイキットは、生体サンプル中の LDH 酵素の活性を定量します。.
  • LDHは細胞呼吸に重要です, 乳酸をピルビン酸に変換する.
  • 組織または体液中の LDH レベルの上昇は、細胞の損傷または病状を示している可能性があります.
  • このアッセイは、研究および臨床ラボで診断および実験の目的で利用されています。.

コンテンツ

試薬名 仕様 保管条件
抽出液 液体 60 mL× 1 ボトル
試薬 1 液体 7 mL× 1 ボトル
試薬 2 粉 1 バイアル
試薬 3 液体 7 mL× 1 ボトル
試薬 4 液体 25 mL× 1 ボトル
標準ソリューション 液体 1 mL× 1 バイアル
  • 試薬 2: ご使用の前に, 追加 1.3 完全に溶解する蒸留水 mL. 準備ができたら, 小さなチューブに小分けし、-20°C で最長 3 年間保存します。 2 週. 凍結融解サイクルを繰り返さないようにする.
  • 標準ソリューション: 濃度のピルビン酸ナトリウム溶液 20 μmol/mL.

LDH 活性アッセイキットの主要コンポーネント:

  1. 基質溶液: 酵素反応に必要な成分が含まれています, 通常は乳酸と NAD^+ が含まれます (ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド).
  2. 反応バッファー: 酵素反応に最適な条件を提供します.
  3. LDH酵素スタンダード: 標準曲線を作成するための既知の濃度の LDH 活性を持つ参照標準.
  4. LDH測定試薬: LDH 反応の生成物を検出する比色試薬または蛍光試薬, 色の変化や蛍光を引き起こすことがよくあります.

LDH活性測定キットの使用方法:

以下は、LDH 活性アッセイキットの使用方法に関する一般的なガイドです。. 特定のプロトコルはキットごとに異なる場合があります, キットメーカーが提供する指示に従うことが重要です:

  1. サンプルの準備: 生体サンプルを準備する (例えば, 細胞溶解物, 組織ホモジネート, または体液) 必要に応じて、互換性のあるバッファーで適切に希釈します。.
  2. 標準曲線の作成: 付属の LDH 酵素標準物質を使用して、既知濃度の LDH 酵素活性を持つ一連の標準物質を調製します。. これは通常、標準物質を緩衝液またはサンプルマトリックスで希釈することによって実現されます。.
  3. アッセイプレートのセットアップ: 希釈したサンプルと標準をマイクロプレートまたはキュベットのウェルに追加します。.
  4. 基質溶液の追加: サンプルと標準を含む各ウェルまたはキュベットに基質溶液を加えます。. 酵素反応により乳酸がピルビン酸に変換されます.
  5. インキュベーション: 反応混合物を指定された期間インキュベートします, 通常は制御された温度で. 酵素反応が起こります, NADHの生成 (NAD^+ の還元型).
  6. 測定: マイクロプレートリーダーまたは蛍光光度計を使用して、適切な波長で反応混合物の吸光度または蛍光を測定します。.
  7. データ分析: 標準曲線を使用して、吸光度または蛍光値を LDH 酵素活性単位に変換します。.
  8. 品質管理: アッセイのパフォーマンスが許容範囲内にあることを確認して、結果の精度と精度をチェックします。.

実験例:

  1. セダムの葉0.103gの重さを量る, 抽出液1mLを添加, 氷浴中で均質化する, 8000gで遠心分離, 4℃ 10 分, 上清を氷上で測定用に採取しました. それから, アッセイ手順に従ってください, ΔAはA_試験管として計算されました – A_コントロールチューブ = 0.275 – 0.199 = 0.076. 標準曲線式 y = 0.5218x を使用する + 0.0063 (R^2 = 0.9983), x = を取得しました。 0.134 μmol/mL. 乳酸脱水素酵素の計算 (L-LDH) 活動: L-LDH (U/g質量) = 66.67 × × ÷ W = 86.74 U/g
  2. ウサギ肝臓0.109gの重さを量る, 抽出液1mLを添加, 氷浴中で均質化する, 8000gで遠心分離, 4℃ 10 分, 上澄みを希釈して取りました 80 蒸留水で数回洗浄し、氷上に置いて測定します. それから, アッセイ手順に従ってください, ΔAはA_試験管として計算されました – A_コントロールチューブ = 0.795 – 0.132 = 0.663. 標準曲線式 y = 0.5218x を使用する + 0.0063 (R^2 = 0.9983), x = を取得しました。 1.259 μmol/mL. 乳酸脱水素酵素の計算 (L-LDH) 活動: L-LDH (U/g質量) = 66.67 × × ÷ W × 希釈倍率 = 61605.53 U/g
  3. 10μLのウマ血清を採取し、アッセイ手順に従いました。. 96ウェルプレートを使用する, ΔAはA_試験管として計算されました – A_コントロールチューブ = 0.415 – 0.161 = 0.254. 標準曲線式 y = 0.5218x を使用する + 0.0063 (R^2 = 0.9983), x = を取得しました。 0.475 μmol/mL. 乳酸脱水素酵素の計算 (L-LDH) 活動: L-LDH (U/mL) = 66.67 × × = 31.67 U/m

追加情報

重さ 0.65 kg
サイズ

100T/48S
ブランド名

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