導入
The HiPure Mini system provides a fast, simple, 費用対効果が高い プラスミドDNA miniprep method for routine molecular biology laboratory applications. HiPure Plasmid Mini Kits use silica membrane technology to eliminate the cumbersome steps associated with loose resins or slurries. Plasmid DNA purified with Mini Kits is immediately ready for use. Phenol extraction and ethanol precipitation are not required, and high quality plasmid DNA is eluted in a small volume of Tris buffer or water.
詳細
仕様
| 特徴 | 仕様 |
| 主な機能 | Isolation up to 70μg plasmid DNA from 5-15ml bacterial culture |
| アプリケーション | 酵素消化, 順序付け, PCR, cloning, 等. |
| 精製方法 | ミニ スピンカラム |
| 精製技術 | シリカ技術 |
| 加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
| サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
| サンプル量 | High copy plasmid: 1-5ml culture medium
Low copy plasmid : 5-10ml culture medium |
| 収率 | 20-80μg |
| 溶出量 | ≥75μl |
| 実行あたりの時間 | Complete 1-24 samples in 30 分 |
| カラムあたりの液体搬送量 | 800μl |
| カラムの結合収量 | 70μg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: Preparation and clearing of a bacterial lysate by alkaline method，次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, 酵素消化と PCR, 等.
- 速い – それだけが必要です 2 minutes to obtain supernatant by optimized solution (10 minutes for other brands)
- 高収量 – 1つのカラムで最大70µgのプラスミドを結合可能
キット内容
| コンテンツ | P100202 | P100203 |
| 浄化時間 | 50 準備 | 250 準備 |
| RNase A | 5 mg | 20 mg |
| バッファP1 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
| バッファP2 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
| Buffer P3 | 40 ミリリットル | 200 ミリリットル |
| バッファPW1 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
| Buffer PW2* | 12 ミリリットル | 50 ミリリットル |
| 溶出バッファー | 15 ミリリットル | 30 ミリリットル |
| HiPure DNA Mini Columns III | 50 | 250 ミリリットル |
| 2 ml 採取管 | 50 | 250 ミリリットル |
保管と安定性
キットのコンポーネントは乾燥した状態で室温で保管できます。 (15-25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月. バッファー内に沈殿物が形成された場合, 37℃に温めて溶かす. RNase A添加後，バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 2～8°Cで保管した場合、数か月.
購入ガイド
| 名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
| HiPure プラスミド ミニ キット | P1001 | 1-5ミリリットル | 1.5mlカラム | 30-50μl | 5–35μg/5ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド ミニ キット II | P1002 | 5-15ミリリットル | 1.5mlカラム | 75-100μl | 20-80μg/15ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド プラス 96 キット | P1006 | 1-1.5ミリリットル | 96 ウェルプレート | 70-150μl | 1-15μg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
| HiPure Fastfilter プラスミド Midi キット | P1013 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | 0.3-0.8ミリリットル | 50–250μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
| HiPure Fastfilter Plasmid Maxi キット | P1014 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | 0.5-1.5ミリリットル | 0.4–1mg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
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