導入
HiPure Plasmid EF Mini Kit Overview:
- Technology Integration:
- Combines HiPure technology with Magen’s innovative Endotoxin Removal Technology (ETR) to ensure high-quality plasmid DNA精製.
- Endotoxin Management:
- Features a specially formulated buffer designed to prevent endotoxins from binding to the HiPure matrix, significantly reducing endotoxin levels in the final DNA product.
- Application Suitability:
- Provides plasmid DNA ideal for eukaryotic transfection and in vitro experiments, especially where low endotoxin levels are critical.
- Impact of Endotoxin Contamination:
- Endotoxin contamination can drastically lower transfection efficiencies, particularly in endotoxin-sensitive cell lines.
- Clinical Relevance:
- In contexts such as gene therapy, controlling endotoxin levels is crucial due to the potential for serious adverse effects like fever, endotoxin shock syndrome, and negative impacts on in vitro transfection into immune cells.
詳細
仕様
特徴 | 仕様 |
主な機能 | Isolation up to 70µg endotoxin-free plasmid DNA from 10-15ml bacterial culture |
アプリケーション | Cell transfection, animal injection, 等. |
精製方法 | ミニ スピンカラム |
精製技術 | シリカ技術 |
加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
サンプルの種類 | 従来のプラスミド |
サンプル量 | High copy plasmid: 10ml culture medium
Low copy number plasmid : 10-15ml culture medium |
収率 | 10-70μg |
溶出量 | ≥75μl |
実行あたりの時間 | ≤40 minutes |
カラムあたりの液体搬送量 | 800μl |
カラムの結合収量 | 70μg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: Preparation and clearing of a bacterial lysate by alkaline method,次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, enzyme digestion and PCR, 等.
- 速い – silica gel column purification is much faster than ion exchange
- 高収量 – up to 70μg plasmid can be binded in one column
- Low endotoxin content – the obtained plasmid can be directly used in cell transfection and animal injection
キット内容
コンテンツ | P115402 | P115403 |
浄化時間 | 50 準備 | 250 準備 |
RNase A | 5 mg | 20 mg |
バッファP1 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
バッファP2 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
バッファLEN3 | 15 ミリリットル | 70 ミリリットル |
Buffer LN4 | 50 ミリリットル | 250 ミリリットル |
Buffer LN5 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
バッファPW1 | 30 ミリリットル | 140 ミリリットル |
バッファPW2 | 12 ミリリットル | 50 ミリリットル |
溶出バッファー | 15 ミリリットル | 30 ミリリットル |
HiPure DNA Mini Columns III | 50 | 250 |
2 ml 採取管 | 50 | 250 |
保管と安定性
ストレージの指示:
- General Storage:
- Kit components can be stored dry at room temperature (15–25℃).
- 少なくとも安定しています 18 この状況下で数か月.
- Handling Precipitates:
- バッファー内に沈殿物が形成された場合, warm at 37°C to dissolve.
- Specific Storage for Buffer P1 with RNase A:
- RNase A添加後, バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 months when stored at 2–8°C.
購入ガイド
名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
HiPure プラスミド EF ミニ キット | P1154 | 10-15ミリリットル | 1.5mlカラム | ≥75μl | 10–70µg/15ml | ≤40 minutes | 小型遠心分離機 |
HiPure プラスミド EF 96 キット | P1157 | 1-5ミリリットル | 96 ウェルプレート | ≥75μl | 30µg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
HiPure プラスミド EF Midi キット | P1231 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | ≥0.4ml | 10-500μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | ≥0.8ml | 100–1500µg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
HiPure プラスミド EF メガ キット | P1116 | 500ミリリットル | 50mlカラム | ≥0.8ml | 10mg/500ml | ≤70 minutes | 50ml遠心分離機 |
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