HiPure プラスミド EF ミニ キット

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Isolation up to 70µg endotoxin-free plasmid DNA from 10-15ml bacterial culture

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説明

導入

HiPure Plasmid EF Mini Kit Overview:

  1. Technology Integration:
    • Combines HiPure technology with Magen’s innovative Endotoxin Removal Technology (ETR) to ensure high-quality plasmid DNA精製.
  2. Endotoxin Management:
    • Features a specially formulated buffer designed to prevent endotoxins from binding to the HiPure matrix, significantly reducing endotoxin levels in the final DNA product.
  3. Application Suitability:
    • Provides plasmid DNA ideal for eukaryotic transfection and in vitro experiments, especially where low endotoxin levels are critical.
  4. Impact of Endotoxin Contamination:
    • Endotoxin contamination can drastically lower transfection efficiencies, particularly in endotoxin-sensitive cell lines.
  5. Clinical Relevance:
    • In contexts such as gene therapy, controlling endotoxin levels is crucial due to the potential for serious adverse effects like fever, endotoxin shock syndrome, and negative impacts on in vitro transfection into immune cells.

詳細

仕様

特徴 仕様
主な機能 Isolation up to 70µg endotoxin-free plasmid DNA from 10-15ml bacterial culture
アプリケーション Cell transfection, animal injection, 等.
精製方法 ミニ スピンカラム
精製技術 シリカ技術
加工方法 マニュアル (遠心分離または真空)
サンプルの種類 従来のプラスミド
サンプル量 High copy plasmid: 10ml culture medium

Low copy number plasmid : 10-15ml culture medium

収率 10-70μg
溶出量 ≥75μl
実行あたりの時間 ≤40 minutes
カラムあたりの液体搬送量 800μl
カラムの結合収量 70μg

原理

HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: Preparation and clearing of a bacterial lysate by alkaline method,次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).

利点

  • 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, enzyme digestion and PCR, 等.
  • 速い – silica gel column purification is much faster than ion exchange
  • 高収量 – up to 70μg plasmid can be binded in one column
  • Low endotoxin contentthe obtained plasmid can be directly used in cell transfection and animal injection

キット内容

コンテンツ P115402 P115403
浄化時間 50 準備 250 準備
RNase A 5 mg 20 mg
バッファP1 30 ミリリットル 140 ミリリットル
バッファP2 30 ミリリットル 140 ミリリットル
バッファLEN3 15 ミリリットル 70 ミリリットル
Buffer LN4 50 ミリリットル 250 ミリリットル
Buffer LN5 30 ミリリットル 140 ミリリットル
バッファPW1 30 ミリリットル 140 ミリリットル
バッファPW2 12 ミリリットル 50 ミリリットル
溶出バッファー 15 ミリリットル 30 ミリリットル
HiPure DNA Mini Columns III 50 250
2 ml 採取管 50 250

保管と安定性

ストレージの指示:

  1. General Storage:
    • Kit components can be stored dry at room temperature (15–25℃).
    • 少なくとも安定しています 18 この状況下で数か月.
  2. Handling Precipitates:
    • バッファー内に沈殿物が形成された場合, warm at 37°C to dissolve.
  3. Specific Storage for Buffer P1 with RNase A:
    • RNase A添加後, バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 months when stored at 2–8°C.

購入ガイド

名前 カタログ番号 サンプル量 列の種類 溶出量 収率 実行あたりの時間 遠心分離機の要件
HiPure プラスミド EF ミニ キット P1154 10-15ミリリットル 1.5mlカラム ≥75μl 10–70µg/15ml ≤40 minutes 小型遠心分離機
HiPure プラスミド EF 96 キット P1157 1-5ミリリットル 96 ウェルプレート ≥75μl 30µg/1ml 60分以内 96 ウェルプレート遠心分離機
HiPure プラスミド EF Midi キット P1231 30-50ミリリットル 15mlカラム ≥0.4ml 10-500μg/50ml 60分以内 15ml遠心分離機
HiPure Plasmid EF Maxi Kit P1156 100-200ミリリットル 50mlカラム ≥0.8ml 100–1500µg/200ml 60分以内 50ml遠心分離機
HiPure プラスミド EF メガ キット P1116 500ミリリットル 50mlカラム ≥0.8ml 10mg/500ml ≤70 minutes 50ml遠心分離機

追加情報

重さ 0.65 kg
サイズ

HiPure プラスミド EF ミニ キット 50 準備, HiPure プラスミド EF ミニ キット 250 準備

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