導入
The HiPure Midi system provides a fast, 単純, 費用対効果が高い プラスミドDNA midiprep method for routine molecular biology laboratory applications. HiPure Midiprep Kits use silica membrane technology to eliminate the cumbersome steps associated with loose resins or slurries. Plasmid DNA purified with Mini Kits is immediately ready for use. Phenol extraction and ethanol precipitation are not required, and high quality plasmid DNA is eluted in a small volume of Tris buffer or water.
詳細
仕様
| 特徴 | 仕様 |
| 主な機能 | Isolation up to 500µg endotoxin-free plasmid DNA from 25-50ml bacterial culture |
| アプリケーション | 細胞トランスフェクション, 動物注射, 等. |
| 精製方法 | ミディ スピンカラム |
| 精製技術 | シリカ技術 |
| 加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
| サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
| サンプル量 | 25-50ミリリットル |
| 収率 | 10-500μg |
| 溶出量 | ≧0.4ml |
| 実行あたりの時間 | 60分以内 |
| カラムあたりの液体搬送量 | 4ミリリットル |
| カラムの結合収量 | 250μg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: アルカリ法による細菌溶解物の調製と清澄，次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, 酵素消化と PCR, 等.
- 速い – シリカゲルカラム精製はイオン交換よりもはるかに高速です
- 高収量 – up to 250μg plasmid can be binded in one column
- Low endotoxin content – the obtained plasmid can be directly used in cell transfection and animal injection
キット内容
| コンテンツ | P123102 | P123102B |
| 浄化時間 | 50 準備 | 50 準備 |
| RNase A | 30 mg | 30 mg |
| バッファE1 | 150 ミリリットル | 150 ミリリットル |
| バッファE2 | 150 ミリリットル | 150 ミリリットル |
| バッファE3 | 150 ミリリットル | 150 ミリリットル |
| バッファE4 | 150 ミリリットル | 150 ミリリットル |
| バッファE5 | 150 ミリリットル | 150 ミリリットル |
| Buffer PW2* | 50 ミリリットル | 50 ミリリットル |
| 溶出バッファー | 30 ミリリットル | 30 ミリリットル |
| MaxPure EF Mini Column | 50 | 50 |
| 2 ml 採取管 | 50 | 50 |
| ライセートクリアミディシリンジ | 50 | 50 |
| Extend Tubes | 50 | 50 |
| 50ml Centrifuge Tubes | 50 | |
| Support Tubes | 50 |
保管と安定性
キットのコンポーネントは乾燥した状態で室温で保管できます。 (15-25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月. バッファー内に沈殿物が形成された場合, 37℃に温めて溶かす. After addition of RNase A and optional LyseBlue reagent, バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 months when stored at 2–8°C.
購入ガイド
| 名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
| HiPure プラスミド EF ミニ キット | P1154 | 10-15ミリリットル | 1.5mlカラム | 75μl以上 | 10–70μg/15ml | 40分以内 | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF 96 キット | P1157 | 1-5ミリリットル | 96 ウェルプレート | 75μl以上 | 30μg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF Midi キット | P1231 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | ≧0.4ml | 10-500μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF Maxi キット | P1156 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | ≧0.8ml | 100–1500μg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF メガ キット | P1116 | 500ミリリットル | 50mlカラム | ≧0.8ml | 10mg/500ml | 70分以内 | 50ml遠心分離機 |
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