導入
ハイピュア プラスミドDNA メガキットは、HiPure テクノロジーの力と、長年にわたって実証されてきたアルカリ性の一貫性を組み合わせたものです。-SDS 細菌細胞を溶解して高品質の DNA を提供します. HiPure DNA カラムは結合を促進します, 洗浄と溶出のステップにより、複数のサンプルを同時に処理できるようになります。. このシステムで精製されたプラスミド DNA は自動蛍光 DNA シーケンスに適しています, 制限エンドヌクレアーゼ消化, 哺乳類細胞のトランスフェクション, およびその他の操作. まで 10 mg の高コピー数プラスミド DNA を精製できます。 500 mLの一晩培養.
詳細
仕様
| 特徴 | 仕様 |
| 主な機能 | 500mlの細菌培養物から最大10mgのエンドトキシンフリーのプラスミドDNAを分離 |
| アプリケーション | 細胞トランスフェクション, 動物注射, 等. |
| 精製方法 | メガ スピンカラム |
| 精製技術 | シリカ技術 |
| 加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
| サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
| サンプル量 | 高コピープラスミド: 500培養液 ml |
| 収率 | 10mg |
| 溶出量 | ≧0.8ml |
| 実行あたりの時間 | 70分以内 |
| カラムあたりの液体搬送量 | 50ミリリットル |
| カラムの結合収量 | 10mg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: アルカリ法による細菌溶解物の調製と清澄,次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, 酵素消化と PCR, 等.
- 速い – シリカゲルカラム精製はイオン交換よりもはるかに高速です
- 高収量 – 1つのカラムで最大10mgのプラスミドを結合可能
- 低エンドトキシン – 得られたプラスミドは細胞トランスフェクションや動物への注射に直接使用できます。, 等.
キット内容
| コンテンツ | P111602 | P111603 |
| 浄化時間 | 10 準備 | 50 準備 |
| RNase A | 60 mg | 2 バツ 150 mg |
| バッファE1 | 220 ミリリットル | 2 バツ 550 ミリリットル |
| バッファE2 | 220 ミリリットル | 2 バツ 550 ミリリットル |
| バッファE3 | 220 ミリリットル | 2 バツ 550 ミリリットル |
| バッファE4 | 220 ミリリットル | 2 バツ 550 ミリリットル |
| バッファE5 | 120 ミリリットル | 550 ミリリットル |
| バッファPW2 | 25 ミリリットル | 2 バツ 100 ミリリットル |
| 溶出バッファー | 30 ミリリットル | 120 ミリリットル |
| HiPure EF Maxi カラム | 10 | 50 |
| ライセートクリアマキシシリンジ | 10 | 50 |
| 50 ml 採取管 | 20 | 100 |
保管と安定性
キットのコンポーネントは乾燥した状態で室温で保管できます。 (15-25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月. バッファー内に沈殿物が形成された場合, 37℃に温めて溶かす.
購入ガイド
| 名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
| HiPure プラスミド EF ミニ キット | P1154 | 10-15ミリリットル | 1.5mlカラム | 75μl以上 | 10–70μg/15ml | 40分以内 | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF 96 キット | P1157 | 1-5ミリリットル | 96 ウェルプレート | 75μl以上 | 30μg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF Midi キット | P1231 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | ≧0.4ml | 10-500μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF Maxi キット | P1156 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | ≧0.8ml | 100–1500μg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF メガ キット | P1116 | 500ミリリットル | 50mlカラム | ≧0.8ml | 10mg/500ml | 70分以内 | 50ml遠心分離機 |






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