導入
The HiPure Minipreps system provides a fast, simple, 費用対効果が高い プラスミドDNA miniprep method for routine molecular biology laboratory applications. HiPure Miniprep Kits use silica membrane technology to eliminate the cumbersome steps associated with loose resins or slurries. Plasmid DNA purified with Mini Kits is immediately ready for use. Phenol extraction and ethanol precipitation are not required, and high quality plasmid DNA is eluted in a small volume of Tris buffer or water.
詳細
仕様
| 特徴 | 仕様 |
| 主な機能 | Isolation up to 30μg endotoxin-free plasmid DNA from 1-5ml bacterial culture using 96-well bind plate |
| アプリケーション | Cell transfection, animal injection, 等. |
| 精製方法 | 96 ウェルプレート |
| 精製技術 | シリカ技術 |
| 加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
| サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
| サンプル量 | 1-5ml（x96） |
| 収率 | 30μg |
| 溶出量 | ≥75μl |
| 実行あたりの時間 | 60分以内 |
| カラムあたりの液体搬送量 | 800μl |
| カラムの結合収量 | 70μg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: Preparation and clearing of a bacterial lysate by alkaline method，次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, enzyme digestion and PCR, 等.
- 速い – silica gel column purification is much faster than ion exchange
- Ultra low endotoxin – content of endotoxin is less than 0.05 EU/μg, which can be directly used for cell transfection and animal injection, 等.
キット内容
| コンテンツ | P115701 | P115702 | P115703 |
| 浄化時間 | 1 バツ 96 準備 | 4 バツ 96 準備 | 20 バツ 96 準備 |
| RNase A | 10 mg | 20 mg | 100 mg |
| バッファP1 | 30 ミリリットル | 120 ミリリットル | 550 ミリリットル |
| バッファP2 | 30 ミリリットル | 120 ミリリットル | 550 ミリリットル |
| バッファLEN3 | 15 ミリリットル | 60 ミリリットル | 300 ミリリットル |
| Buffer LN4 | 80 ミリリットル | 270 ミリリットル | 2 バツ 700 ミリリットル |
| Buffer LN5 | 40 ミリリットル | 220 ミリリットル | 1100 ミリリットル |
| バッファPW1 | 40 ミリリットル | 220 ミリリットル | 1100 ミリリットル |
| バッファPW2 | 25 ミリリットル | 100 ミリリットル | 2 バツ 200 ミリリットル |
| 溶出バッファー | 30 ミリリットル | 60 ミリリットル | 250 ミリリットル |
| Lysate Clear Plate | 1 | 4 | 20 |
| HiPure DNA プレート | 1 | 4 | 20 |
| 1.6MLコレクションプレート | 2 | 8 | 40 |
| 0.5MLコレクションプレート | 1 | 4 | 20 |
保管と安定性
キットのコンポーネントは乾燥した状態で室温で保管できます。 (15-25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月. バッファー内に沈殿物が形成された場合, 37℃に温めて溶かす. RNase A添加後，バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 2～8°Cで保管した場合、数か月.
購入ガイド
| 名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
| HiPure プラスミド EF ミニ キット | P1154 | 10-15ミリリットル | 1.5mlカラム | ≥75μl | 10–70µg/15ml | ≤40 minutes | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF 96 キット | P1157 | 1-5ミリリットル | 96 ウェルプレート | ≥75μl | 30µg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF Midi キット | P1231 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | ≥0.4ml | 10-500μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
| HiPure Plasmid EF Maxi Kit | P1156 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | ≥0.8ml | 100–1500µg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
| HiPure プラスミド EF メガ キット | P1116 | 500ミリリットル | 50mlカラム | ≥0.8ml | 10mg/500ml | ≤70 minutes | 50ml遠心分離機 |
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