導入
The HiPure FastFilter プラスミドDNA Maxi Kits combine the power of HiPure technology with the time-tested consistency of alkaline-SDS 細菌細胞を溶解して高品質の DNA を提供します. HiPure DNA カラムは結合を促進します, 洗浄と溶出のステップにより、複数のサンプルを同時に処理できるようになります。. This system also includes a special filter cartridge which replaces the centrifugation step following alkaline lysis. このシステムで精製されたプラスミド DNA は自動蛍光 DNA シーケンスに適しています, 制限エンドヌクレアーゼ消化, 哺乳類細胞のトランスフェクション, およびその他の操作. まで 1000 μg の高コピー数プラスミド DNA または 50-500 µg low copy number plasmid DNA can be purified from 200mL overnight culture.
詳細
仕様
| 特徴 | 仕様 |
| 主な機能 | Isolation up to 1mg plasmid DNA from 200ml bacterial culture |
| アプリケーション | 酵素消化, 順序付け, PCR そしてラベル付け, 等. |
| 精製方法 | マキシ スピンカラム |
| 精製技術 | シリカ技術 |
| 加工方法 | マニュアル (遠心分離または真空) |
| サンプルの種類 | 従来のプラスミド, 30KB未満のプラスミド |
| サンプル量 | 100-200ミリリットル |
| 収率 | 0.4-1mg |
| 溶出量 | ≥500μl |
| 実行あたりの時間 | 60分以内 |
| カラムあたりの液体搬送量 | 20ミリリットル |
| カラムの結合収量 | 1mg |
原理
HiPure Plasmid の手順は、細菌細胞のアルカリ溶解と、それに続く高濃度の塩の存在下での DNA のシリカへの吸着に基づいています。. このキットで使用されている独自のシリカ膜は、プラスミド DNA ミニプレップ用のガラスまたはシリカ スラリーを完全に置き換えます。. 手順は次のとおりです。 3 基本的な手順: Preparation and clearing of a bacterial lysate by alkaline method，次に上清をカラムに移して DNA を結合させます。. タンパク質やその他の不純物を洗浄した後, 核酸は最終的に低塩緩衝液で溶出されました (10mmトリス, pH9.0, 0.5mm EDTA).
利点
- 高純度 – 精製されたプラスミドは配列決定に直接使用できます, 酵素消化と PCR, 等.
- 速い – それだけが必要です 15-60 隔離が完了するまでに数分
- 経済 – high cost performance
キット内容
| コンテンツ | P101402 | P101403 |
| 浄化時間 | 10 準備 | 50 準備 |
| RNase A | 20 mg | 40 mg |
| バッファP1 | 140 ミリリットル | 2 バツ 350 ミリリットル |
| バッファP2 | 140 ミリリットル | 2 バツ 350 ミリリットル |
| バッファLEN3 | 70 ミリリットル | 350 ミリリットル |
| バッファGBT | 120 ミリリットル | 550 ミリリットル |
| バッファPW1 | 60 ミリリットル | 300 ミリリットル |
| Buffer PW2* | 50 ミリリットル | 4 バツ 100 ミリリットル |
| 溶出バッファー | 20 ミリリットル | 120 ミリリットル |
| HiPure DNA Maxi Columns III | 10 | 50 |
| Lysate Clear Maxi Syringe | 10 | 50 |
| 50 ml 採取管 | 20 | 100 |
保管と安定性
キットのコンポーネントは乾燥した状態で室温で保管できます。 (15-25℃) 少なくとも一定期間は安定しています 18 この状況下で数か月. バッファー内に沈殿物が形成された場合, 37℃に温めて溶かす. RNase A添加後，バッファ P1 は次の期間安定しています。 6 2～8°Cで保管した場合、数か月.
購入ガイド
| 名前 | カタログ番号 | サンプル量 | 列の種類 | 溶出量 | 収率 | 実行あたりの時間 | 遠心分離機の要件 |
| HiPure プラスミド ミニ キット | P1001 | 1-5ミリリットル | 1.5mlカラム | 30-50μl | 5–35μg/5ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド ミニ キット II | P1002 | 5-15ミリリットル | 1.5mlカラム | 75-100μl | 20-80μg/15ml | 30分以内 | 小型遠心分離機 |
| HiPure プラスミド プラス 96 キット | P1006 | 1-1.5ミリリットル | 96 ウェルプレート | 70-150μl | 1-15μg/1ml | 60分以内 | 96 ウェルプレート遠心分離機 |
| HiPure Fastfilter プラスミド Midi キット | P1013 | 30-50ミリリットル | 15mlカラム | 0.3-0.8ミリリットル | 50–250μg/50ml | 60分以内 | 15ml遠心分離機 |
| HiPure Fastfilter Plasmid Maxi キット | P1014 | 100-200ミリリットル | 50mlカラム | 0.5-1.5ミリリットル | 0.4–1mg/200ml | 60分以内 | 50ml遠心分離機 |
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