Introduzione al prodotto：
- Materiale di supporto: L'agarosio funge da materiale di supporto comune nell'elettroforesi su gel.
- Impatto della purezza: La purezza dell'agarosio influenza direttamente la risoluzione delle bande di DNA e la chiarezza dei risultati dell'elettroforesi.
- Preparazione: Agarosio, una forma di agar ad alta purezza, è in genere preparato come gel con concentrazioni che vanno 0.5% A 2%.
- Applicazioni: L'elettroforesi in gel di agarosio viene utilizzata per la separazione e l'identificazione degli acidi nucleici, compresa la profilazione del DNA e la mappatura degli enzimi di restrizione del DNA.
- Visualizzazione: I coloranti fluorescenti dell'acido nucleico vengono aggiunti al gel, e le bande di DNA vengono visualizzate utilizzando uno scanner di imaging gel post-elettroforesi.
Contenuto del prodotto：
| Componenti | DA003-02 （100G） |
| Agarosio | 100G |
Controllo di qualità:
| Parametro | Specifica |
|---|---|
| Forza gel (1% gel) | > 1200g/cm² |
| Elettroendosmosi (Eeo) | < 0.15 |
| Solfato | ≤ 0.15% |
| Temperatura del gel (1.5% gel) | 35-37℃ |
| Temperatura di scioglimento (1.5% gel) | 87-89℃ |
| Umidità | ≤ 10% |
Assenza di nucleasi.
Istruzioni di utilizzo:
- A seconda delle dimensioni dei frammenti di acido nucleico bersaglio e del tipo di tampone di elettroforesi, Determinare la concentrazione di agarosio richiesta:
| Concentrazione di agarosio | Gamma di risoluzione lineare ideale （BP） | |
| 1× tae | 1×TBE | |
| 0.6% | 1200-15000 | 1200-12000 |
| 0.8% | 1000-10000 | 1000-12000 |
| 1.0% | 200-10000 | 100-10000 |
| 1.2% | 100-8000 | 100-5000 |
| 1.5% | 100-5000 | 50-3000 |
| 2.0% | 50-3000 | 50-3000 |
| 2.5% | 50-3000 | 50-2000 |
- Preparazione del gel di agarosio (Esempio di elettroforesi in gel orizzontale):
- In base alla quantità di gel necessaria e alla concentrazione di agarosio desiderata, Misura un volume appropriato di tampone elettroforesi (Tae o tbe) e versalo in un pallone triangolare.
Nota: Il tampone utilizzato per la preparazione del gel dovrebbe essere lo stesso del tampone di elettroforesi.
- Pesare accuratamente l'agarosio e aggiungerlo con cura al pallone triangolare. Coprire l'apertura del pallone con carta pergamena e scaldarla in un forno a microonde per sciogliere l'agarose. Scaldare la soluzione fino a bollire, quindi indossare guanti resistenti al calore, gira delicatamente il pallone. Ripeti questo processo più volte fino a quando l'agarosio non viene completamente sciolto.
Nota: Utilizzare più brevi passaggi di ebollizione durante lo scioglimento dell'agarosio per evitare il surriscaldamento e il bollire. Assicurarsi che l'agarosio sia completamente sciolto per evitare i risultati dell'elettroforesi sfocata.
- Aggiungi colorante di acido nucleico alla soluzione di agarosio completamente disciolta.
- Versare la soluzione di agarosio nello stampo gel, Quindi inserire il pettine nella posizione appropriata. Lo spessore del gel è generalmente tra 3-5 mm.
- Lascia che il gel si solidifichi a temperatura ambiente (circa 30 minuti a 1 ora) e poi posizionarlo nell'apparato dell'elettroforesi per l'elettroforesi.
Precauzioni:
- Fai attenzione all'ebollizione Durante il processo di dissoluzione dell'agarosio per prevenire la scalpiccio.
- DA003-01 è un marchio proprietario domestico, e DA003-02 è un reagente importato.
- Si prega di indossare i guanti, Soprattutto quando si utilizzano coloranti fluorescenti con proprietà cancerogene (come bromuro di etidio) per la colorazione dell'acido nucleico in gel.
- Se il gel preparato non viene utilizzato immediatamente, conservarlo immerso nel tampone di elettroforesi (Tae o tbe) A evitare che il gel si secchi.
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