Kit Pewarnaan Leukosit Peroksidase Sperma Solarbio(Metode n-Toluidin)

Informasi Produk

• Kode Produk: G3410
• Spesifikasi: 20T
• Penyimpanan: Simpan pada 2-8 ° C., dengan umur simpan 6 bulan.

Konten Produk:

Deskripsi Produk:

Kebanyakan air mani mengandung sel darah putih, terutama leukosit polimorfonuklear (PMNS, Neutrofil). Kadang-kadang, Sel darah putih dapat dibedakan dari sel sperma dan spermatosit dalam apusan semen menggunakan metode pewarnaan papanicolaou. Membedakan sel darah putih terutama bergantung pada perbedaan pewarnaan, ukuran, dan morfologi nukleus. Leukosit polimorfonuklear secara morfologis mirip dengan sel sperma multinukleasi, Tapi leukosit polimorfonuklear menodai biru muda sementara sel sperma menodai merah muda. Ukuran nukleus juga membantu dalam diferensiasi: Nukleus leukosit mononuklear berfluktuasi secara luas, Mulai dari sekitar 7μm untuk limfosit hingga lebih dari 15μm untuk makrofag. Jumlah sel darah putih dalam semen juga dapat dikuantifikasi menggunakan teknik lain.

Prinsip pewarnaan peroksidase untuk sel darah putih seminal (Metode orthotoluidine) adalah bahwa jenis utama sel darah putih dalam semen adalah granulosit positif peroksidase, yang dapat disaring menggunakan pewarnaan peroksidase. Metode ini cepat, murah, dan praktis untuk penyaringan awal granulosit. Meskipun teknik ini memiliki keuntungan relatif mudah dioperasikan, itu tidak dapat mendeteksi yang berikut ini: ① Leukosit polimorfonuklear yang telah diaktifkan dan dilepaskan butirannya; ② Jenis sel darah putih lainnya yang tidak mengandung peroksidase, seperti limfosit, makrofag, dan monosit. Produk ini dapat digunakan untuk membedakan leukosit polimorfonuklear dari sel sperma multinukleasi yang tidak mengandung peroksidase.

Langkah Operasi (hanya untuk referensi):

1. Siapkan Solusi Kerja Orthotoluidine: Tambahkan 1ml larutan amonium klorida jenuh, 1ML Solusi EDTA, dan 10μl oksidan ke 9ml larutan substrat, campur dengan baik, dan gunakan di dalam 24 jam persiapan.
2. Campur sampel semen secara menyeluruh, Campurkan 0,1ml semen dengan solusi kerja 0,9ml.
3. Vortex suspensi sperma untuk 10 detik dan biarkan berdiri pada suhu kamar untuk 20-30 menit. Atau, Gunakan rocker tabung untuk agitasi berkelanjutan.
4. Setelah 20-30 menit, Campur suspensi sperma lagi dan isi sampel ke dalam kolam penghitungan di kedua sisi hemositometer.
5. Tempatkan hemositometer secara horizontal di ruang lembab pada setidaknya untuk setidaknya setidaknya untuk 4 menit untuk memungkinkan sel menyelesaikan.
6. Gunakan a 200 atau mikroskop kontras fase 400 kali lipat untuk mengamati dan menghitung setidaknya 200 Sel-sel peroksidase-positif.

Spesifikasi:

• Reagen (A): Larutan amonium klorida jenuh 2ml, disimpan pada 2-8 ° C..
• Reagen (B): Solusi EDTA 2ml, disimpan pada 2-8 ° C..
• Reagen (C): Solusi Substrat Orthotoluidine 20ml, simpan pada suhu 2-8°C, menghindari cahaya.
• Reagen (D): Oksidan 1ml, disimpan pada 2-8 ° C..

Hasil Pewarnaan:

Sel-sel positif peroksidase berwarna coklat, sedangkan sel peroksidase-negatif tetap tidak ternoda.

Tindakan pencegahan:

1. Siapkan solusi kerja ortotoluidin sebelum digunakan dan jangan menyimpannya untuk waktu yang lama setelah persiapan.
2. Jika suhu sekitar di ruang pewarnaan rendah, Gunakan inkubator atau penangas air untuk menyelesaikan proses pewarnaan.
3. Saat memeriksa kolam penghitungan, Lanjutkan menghitung setidaknya 200 sel peroksidase-positif per kisi sampai grid lengkap dihitung; Jangan berhenti menghitung di tengah kisi.
4. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, Kenakan mantel lab dan sarung tangan sekali pakai selama operasi.
5. Produk ini hanya untuk tujuan penelitian dan tidak boleh digunakan untuk diagnosis klinis atau tujuan lain.