Trigliserida(PT) Kit Pengujian Konten
Catatan: Ambil dua atau tiga sampel berbeda untuk prediksi sebelum pengujian.
Peralatan Operasi: Microplate Reader/Spectrophotometer
Nomor Katalog: BC0625
Ukuran:100T/96S
Komponen:
Reagen I: Reagen yang disediakan sendiri, menambahkan 80 ML n-heptane dan 80 ml alkohol isopropil ke botol kaca kosong. Segel dan aduk rata, penyimpanan pada suhu 4℃.
Reagen II: 3 botol ml × 1. Penyimpanan pada suhu 4℃.
Reagen III: 10 botol ml × 1. Penyimpanan pada suhu 4℃.
Reagen IV: 3 botol ml × 1. Penyimpanan pada suhu 4℃, terlindung dari cahaya. Reagen V: 10 botol ml × 1. Penyimpanan pada suhu 4℃, terlindung dari cahaya. Reagen VI: 10 botol ml × 1. Penyimpanan pada suhu 4℃, terlindung dari cahaya.
Standar: botol bubuk × 1, menambahkan 5 ML reagen saya sebelum digunakan. 1 Solusi standar mg/ml trigliserida, penyimpanan pada suhu 4℃.
Deskripsi Produk:
Trigliserida(PT) adalah molekul lemak yang dibentuk oleh asam lemak rantai panjang dan gliserol, yang bukan hanya komponen utama membran sel, tetapi juga substrat pernapasan yang penting. TG diekstraksi dengan alkohol isopropil, kemudian hidrolisis ke gliserol dan asam lemak setelah saponifikasi TG oleh KOH. Gliserol dioksidasi dengan asam periodik untuk membentuk formaldehida. Kondensasi formaldehida dan asetilaseton untuk membentuk komponen kuning dengan adanya ion klorida. Komponen kuning memiliki penyerapan karakteristik di 420 NM dan sebanding dengan konten TG.
Reagen dan Peralatan Diperlukan tetapi Tidak Disediakan:
Spektrofotometer/pembaca lempeng mikro, kuvet kaca mikro/pelat dasar datar sumur 96, n-heptane, alkohol isopropil, mandi air, pipet yang dapat disesuaikan, air suling dan 125 ML botol kosong.
Prosedur:
SAYA. Persiapan sampel:
- Jaringan:
Homogenitas pematangan es dilakukan sesuai dengan rasio massa jaringan (G): Reagen ⅰ Volume (ml) = 1: 5~10 (disarankan untuk mengambil alih 0.1 g jaringan dan tambahkan 1 mL Reagen I). Sentrifugasi di 8000 g untuk 10 menit pada 4 ℃, Supernatan digunakan untuk tes.
- Bakteri:
Mengumpulkan 5 juta sel atau bakteri ke dalam tabung centrifuge, Kemudian buang supernatan, Tambahkan terakhir 1 mL Reagen I. Membelah bakteri atau sel dengan ultrasonik untuk 1 menit (kekuatan 20%, Waktu kerja 2s, interval 1s). Sentrifugasi di 8000 g untuk 10 menit pada 4 ℃, Supernatan digunakan untuk tes.
- Serum: Deteksi
II. Prosedur:
- Panaskan spektrofotometer untuk 30 menit, sesuaikan panjang gelombangnya 420 nm, atur nol dengan air suling.
- Panaskan pemanasan air hingga 65 ℃.
Nama reagen (μL) | Tabung kosong (AB) | Tabung standar( SEBAGAI) | Tabung reaksi(PADA) |
Air sulingan | 40 | – | – |
Solusi standar | – | 40 | – |
Solusi uji TG | – | – | 40 |
Reagen Ⅰ | 125 | 125 | 125 |
Reagen Ⅱ | 25 | 25 | 25 |
Campur dengan seksama setelah menambahkan reagen i, Tambahkan Reagen II, goyangkan kuat untuk 30 S, Berdiri beberapa menit. Setelah layering, 15 μl larutan lapisan atas diambil dan masukkan ke dalam tabung EP baru. |
- Mendeteksi konten TG:
Nama reagen (μL) | Tabung kosong (AB) | Tabung standar (SEBAGAI) | Tabung reaksi (PADA) |
Solusi Lapisan Atas | 15 | 15 | 15 |
Reagen Ⅲ (ul) | 50 | 50 | 50 |
Reagen Ⅳ (ul) | 15 | 15 | 15 |
Aduk rata, mandi air di 65 ℃ untuk 3 menit. | |||
Reagen ⅴ (ul) | 50 | 50 | 50 |
Reagen ⅵ (ul) | 50 | 50 | 50 |
Aduk rata, mandi air di 65 ℃ untuk 3 menit. |
Setelah dingin, Transfer cairan dari tabung EP ke cuvette kaca mikro/96 pelat alas sumur datar, dan tentukan absorbansi di 420 nm.
Catatan: Tabung kosong dan tabung standar hanya perlu diukur sekali.
AKU AKU AKU. Perhitungan:
1) Serum:
PT(mg/dl)= C ×(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB)× 100 =(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB)× 100
2) Jaringan:
Konsentrasi protein:
PT(mg/mg prot)= C × V ×(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB) −(CPR × V.)=(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB) −Cpr
Berat sampel:
PT(mg/g) = C × V ×(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB) ÷ w =(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB) −W
3 ) Bakteri atau sel:
PT(sel U/104) = C ×(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB) ÷ d =(PADA- AB)−(SEBAGAI- AB) ÷ d 1dl = 100 ml;
V: Volume reagen1, 1 ml;
C: Konsentrasi standar, 1 mg/ ml;
Cpr: Konsentrasi protein sampel (mg/mL); W: Berat sampel(G);
D: Kepadatan bakteri atau sel, 104 sel/ml.
Catatan:
- Ada zat yang mudah menguap dalam kit. Sarung tangan dan topeng harus dikenakan selama percobaan. Tutup botol reagen harus ditutup tepat waktu setelahnya
- Setelah penambahan reagen ⅱ, itu perlu untuk berulang kali dan keras bergetar, sehingga trigliserida dalam larutan uji dapat sepenuhnya diekstraksi, dan amplitudo osilasi, waktu, waktu yang diulang dan menunggu waktu stratifikasi seharusnya
- Untuk memastikan pengulangan tes, waktu pendinginan setelah setiap penangas air seharusnya
- Jika nilai OD tabung reaksi lebih besar dari 1.5, disarankan untuk mencairkan sampel dengan reagen saya dengan benar sebelum pengujian, dan melipatgandakannya dengan kelipatan pengenceran yang sesuai selama perhitungan.
Referensi
- Fletcher M J.. Metode kolorimetri untuk memperkirakan trigliserida serum[J]. Klinik Chimica Acta, 1968, 22(3): 393-397.
- Hercules d m, Sheehan T l. Penentuan chemiluminescent gliserol serum dan trigliserida[J]. Kimia Analitik, 1978, 50(1):22-25.
Produk-produk terkait
BC1890/BC1895 Cholestenone GRATIS (Fc) Kit Pengujian Konten
BC0750/BC0755 acetaldehyde dehydrogenase(Avoch) Kit Uji Aktivitas
BC0410/BC0415 asetil COA karboksilase(ACC) Kit Uji Aktivitas
BC1980/BC1985 Total kolesterol(Tc) Kit Pengujian Konten
Spesifikasi teknis:
Batas deteksi: 0.0372 mg/mL
Rentang linier: 0.0625-3 mg/mL
Ulasan
Belum ada ulasan.