Jaringan Solarbio dan Fosfatase Alkalin Darah (AKP/ALP) Kit Uji Aktivitas

Fosfatase Alkalin Jaringan dan Darah (AKP/ALP) Kit Uji Aktivitas

Catatan: Ambil dua atau tiga sampel berbeda untuk prediksi sebelum pengujian.

Peralatan Operasi: Spektrofotometer

Nomor Katalog: BC2140

Ukuran: 50T/24S

Komponen:

Reagen ekstraksi: Cairan 30 botol ml × 1, penyimpanan pada suhu 4℃.

Reagen 1: Cairan 10 botol ml × 1, penyimpanan pada 4 ℃ dan lindungi dari cahaya.

Reagen 2: Cairan 10 botol ml × 1, penyimpanan pada 4 ℃ dan lindungi dari cahaya.

Reagen 3: Cairan 30 botol ml × 1, penyimpanan pada 4 ℃ dan lindungi dari cahaya. Itu tidak dapat digunakan jika berubah menjadi biru-hijau.

Standar: Cairan 1 botol ml × 1, 10 Larutan standar μmol/ml fenol, penyimpanan pada suhu 4℃. Encerkan dengan air suling ke 2.5 μmol/ml sebelum digunakan.

Deskripsi Produk:

AKP/ALP adalah glikoprotease yang mengandung seng, Hidrolisis yang berbagai senyawa monoester fosfolipid alami dan sintetis dalam kondisi alkali. AKP / ALP didistribusikan secara luas di organ manusia, terutama di hati.

Dalam kondisi alkali, AKP/ALP mengkatalisasi hidrolisis disodium fenil fosfat menjadi fenol, dan fenol bereaksi dengan 4-aminoantipline dan kalium ferricyanide untuk membentuk turunan kuinon merah, yang dapat dideteksi absorbansi di 510 nm. Aktivitas AKP/ALP dapat dihitung dengan mengukur laju peningkatan absorbansi pada 510 nm.

Reagen dan Peralatan Diperlukan tetapi Tidak Disediakan:

Spektrofotometer, mesin sentrifugal meja, TransferPettor, 1 mL kuvet kaca, es dan air suling.

Prosedur:

SAYA. Enzim persiapan:

Menambahkan 1 reagen ekstraksi ml 0.1 g tisu, menggiling dengan seksama. Centrifuge pada 4 ℃, 10000 rpm untuk 10 menit. Ambil supernatan di atas es untuk diuji. Sampel darah dapat dideteksi secara langsung. Encerkan dengan reagen ekstraksi jika konsentrat tinggi.

II. Tekad prosedur:

1. Panaskan spektrofotometer untuk 30 menit, sesuaikan panjang gelombangnya 510 nm, Atur penghitung ke nol dengan suling
2. Tambahkan reagen di 1.5 Cuvette ML sebagai berikut:

Nama reagen (μL)	Uji tabung A3	Tabung kontrol A4	Tabung kosong A2	Tabung standar A1
Air sulingan			20
Solusi standar				20
Supernatan	20
Reagen 1	200	200	200	200
Reagen 2	200	200	200	200
Aduk rata, tetap di 37 ℃ untuk 15 menit.
Reagen 3	600	600	600	600
Supernatan		20
Aduk rata, Mendeteksi absorbansi di 510 nm, merekam sebagai A1, A2, A3, A4.

AKU AKU AKU. Perhitungan aktivitas AKP/ALP:

• Konsentrasi protein:

Definisi satuan: Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim mengkatalisasi generasi 1 fenol μmol dalam sistem reaksi per menit pada 37 ℃ setiap mg protein.

AKP/ALP (U/mg keuntungan) =[C ×(A3-A4)−(A1-A2)× vs.]−(Cpr×Vs)÷ t = 0,167 ×(A3-A4)−(A1-A2)−Cpr

• Berat sampel:

Definisi satuan: Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim mengkatalisasi generasi 1 fenol μmol dalam sistem reaksi per menit pada 37 ℃ setiap g sampel.

AKP/ALP (berat U/g) =[C ×(A3-A4)−(A1-A2)× vs.]−(W ÷ ve × vs.)÷ t = 0,167 ×(A3-A4)−(A1-A2)−W

• Darah:

Definisi satuan: Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim mengkatalisasi generasi 1 fenol μmol dalam sistem reaksi per menit pada 37 ℃ setiap ml serum.

AKP/ALP (U/mL) =[C ×(A3-A4)−(A1-A2)× vs.]÷ vs ÷ t = 0,167 ×(A3-A4)−(A1-A2)

C: Konsentrasi standar, 2.5 mol/mL;

Tali: Volume reaksi total, 1020 μl = 1,02 ml; Vs: Volume supernatan, 0.02 ml;

Ve: Volume ekstraksi, 1 ml; W: Berat sampel, G;

T: Waktu reaksi, 15 menit;

Cpr: Konsentrasi protein sampel, mg/mL.

Catatan:

1. Reagen 1, Reagen 2 dan reagen 3 harus dilindungi dari
2. Reagen 3 tidak dapat digunakan jika telah berubah menjadi toblue-green.
3. Campur dengan cepat setelah menambahkan reagen 3 untuk menghindari tidak lengkap

Contoh eksperimental:

1. Ambil 0,1g pankreas tikus dan tambahkan 1 ML larutan ekstrak untuk homogenat. Setelah mengambil supernatan, beroperasi sesuai dengan langkah penentuan. Hitung AT = 0.324, AC = 0.037, AB = 0.022, Sebagai = 0.677. Hitung aktivitas enzim sesuai dengan massa sampel: Aktivitas enzim AKP/ALP (massa U/g) = 0,167 ×(DI-AC)−(As-ab) ÷ W = 0,167 ×(0.324-0.037)−(0.677-0.022)÷ 0,1 = 0,732 u/g
2. Setelah mengambil serum kelinci, Pengoperasiannya dilakukan sesuai dengan langkah-langkah penentuan, dan aktivitas enzim dihitung sebagai berikut: At = 0.190, AC = 0.015, AB = 0.022, Sebagai = 0.677. Menurut volume darah, Aktivitas enzim dihitung sebagai berikut: Aktivitas enzim AKP/ALP (U/mL) = 0,167 ×(DI-AC) − (As-ab) = 0,167 ×(0.190-0.015)−(0.677-0.022)= 0,0446U/ml.

Produk-produk terkait：

BC2020/BC2025 Acetylcholinesterase(Sakit) Kit Uji Aktivitas

BC2130/BC2135 asam fosfatase(ACP) Kit Uji Aktivitas

BC0840/BC0845 carboxylesterase(Peduli) Kit Uji Aktivitas