Atribut | Detail |
---|---|
Kucing | G3282 |
Ukuran | 2 x 50ml / 2 x 100ml |
Penyimpanan | RT, menghindari cahaya, berlaku untuk 1 tahun |
Perkenalan
- Karakteristik Hemosiderin:
- Berasal dari kerusakan hemoglobin, Tampaknya kuning keemasan atau kecoklatan karena kandungan besi.
- Terbentuk saat makrofag menelus sel darah merah dan memecah hemoglobin menjadi darah oranye bebas zat besi dan hemosiderin yang mengandung zat besi.
- Perls Prusia Blue Reaction:
- Juga dikenal sebagai pewarnaan hemosiderin.
- Menghasilkan warna biru saat dirawat dengan kalium ferrocyanide dan asam encer.
- Biasa terlihat pada fagosit’ interstitium, menampilkan garam besi besi.
- Reaksi histokimia klasik, peka, dan sangat baik untuk menampilkan besi besi di jaringan.
- Prinsip ini melibatkan pemisahan besi besi dari protein menggunakan larutan kalium ferrocyanide dan asam klorida, membentuk senyawa biru Prusia yang tidak larut.
- Ferrocyanide stabil dari besi besi memungkinkan peremsaan ulang dengan pewarna merah setelah reaksi.
- Penggunaan Pewarnaan Perls:
- Biasa digunakan untuk menampilkan lesi hemoragik, terutama di fagosit.
- Membantu menentukan deposisi hemosiderin dan membedakannya dari pigmen lain.
- Solusi pewarnaan stabil, tahan lama tanpa curah hujan, dan cocok untuk berbagai aplikasi.
- Bisa diwarnai kembali, menjadikannya serbaguna untuk teknik pewarnaan yang berbeda.
Komponen Perangkat
Reagen | Volume | Penyimpanan |
---|---|---|
Reagen(A): Pewarnaan Perls | A1: 25ml <br> A-2: 25ml | 50ml <br> RT, menghindari cahaya |
Reagen(B): Solusi merah netral | 50ml <br> 100ml | RT, menghindari cahaya |
Sebelum digunakan, Campurkan bagian yang sama dari A1 dan A-2 untuk membentuk noda perls. Tidak cocok untuk mempersiapkan terlebih dahulu.
Bahan yang disediakan sendiri
10% fiksatif formalin netral, Serangkaian etanol, Air sulingan, 4% paraformaldehyde
Protokol (hanya untuk referensi)
(1) Untuk pewarnaan bagian parafin
- Perbaiki jaringan 10% fiksatif formalin alami, menjadi kering, dan embed.
- Potong bagian tebal 4μm, Dewax ke air suling, dan bilas 1 menit.
- Rendam bagian dalam pewarnaan perls untuk 15-30 menit. Bilas sepenuhnya di air suling untuk 2-5 menit.
- Noda ringan nukleus dengan larutan merah netral 15-30 detik. Bilas dalam air keran untuk 1-5 detik.
- Dehidrasi secara konvensional, transparan, dan disegel dengan resinene.
(2) Untuk pewarnaan bagian beku
- Tanpa dewaxing, bilas secara langsung dan cepat dengan air suling untuk 2-3 menit.
- Ikuti langkah -langkah lain sebagai bagian parafin.
(3) Untuk pewarnaan sel yang dikultur
- Perbaiki 4% paraformaldehyde untuk 10-20 menit.
- Bilas dalam air keran dua kali 2 menit setiap kali.
- Langkah Pewarnaan, dehidrasi, transparansi, dan penyegelan sama dengan langkah -langkah bagian parafin. Sesuaikan waktu yang sesuai.
Hasil
- Hemosiderin atau besi besi: Biru
- Nukleus dan jaringan lainnya: Merah
Kontrol Negatif
Ambil bagian yang berdekatan yang sama, dewax ke air. Setelah inkubasi masuk 5% asam oksalat untuk 2-6 jam, Ikuti prosedur yang sama seperti di atas. Hasilnya harus negatif.
Catatan
- Pastikan bagian yang bersih dewaxing.
- Menggunakan 10% formalin netral untuk fiksasi jaringan. Fiksasi jangka panjang dengan formalin umum dapat merusak jaringan. Hindari fiksatif asam, sebagai pengobatan kromat menghambat pelestarian besi.
- Jaga wadah tetap bersih dan hindari menggunakan produk besi logam. Gunakan air suling untuk bagian cuci dan wadah untuk mencegah kontaminasi besi.
- Sesuaikan waktu pencelupan pewarnaan perls sesuai dengan sampel.
- Gunakan bagian kontrol positif yang sama untuk semua bagian. Jaringan paru -paru otopsi adalah kontrol yang baik, mengandung banyak makrofag yang positif besi (sel gagal jantung).
- Sering mengganti seri etanol.
- Untuk bagian beku dan pewarnaan sel, Jelajahi kondisi eksperimental berdasarkan kondisi tertentu. Kenakan pakaian eksperimental dan sarung tangan sekali pakai untuk kesehatan dan keselamatan.
Ulasan
Belum ada ulasan.