Kit Uji Glikogen

Catatan: Ambil dua atau tiga sampel berbeda untuk prediksi sebelum pengujian.

Peralatan Operasi: Spektrofotometer/pembaca pelat mikro

Nomor Katalog: BC0345

Ukuran:100T/96S

Komponen:

Ekstrak reagen: 100mL×1, penyimpanan pada suhu 4℃.

Bupati I: Bedak×1, penyimpanan pada 4℃.10 mg glukosa, menambahkan 1 mL air suling untuk melarutkannya sebelum digunakan. Diencerkan dengan air suling hingga 0.1 mg/mL larutan glukosa untuk siaga, siap digunakan. 0.1 mg/mL larutan standar glukosa, penyimpanan pada suhu 4℃.

Bupati Ⅱ: Bedak×1, penyimpanan pada suhu 4℃.

Solusi kerja: Menuangkan 6 mL air suling ke dalam Reagen Ⅱ dan tuangkan perlahan 24 mL asam sulfat pekat. Larutkan dan aduk rata sebelum digunakan. Reagen yang tidak terpakai berlaku di 4 °C selama satu minggu.

Deskripsi Produk

Glikogen adalah polisakarida molekul tinggi yang terdiri dari unit glukosa. Ini adalah salah satu bentuk penyimpanan utama gula. Hal ini terutama disimpan di hati dan otot sebagai energi cadangan, dan disebut glikogen hati dan glikogen otot, masing-masing. Glikogen dapat mengatur konsentrasi glukosa darah. Glikogen dapat disintesis di hati ketika glukosa darah meningkat. Ketika gula darah menurun, glikogen hati dipecah menjadi glukosa untuk menambah gula darah. Karena itu, glikogen hati penting untuk menjaga keseimbangan relatif gula darah. Glikogen otot adalah bentuk penyimpanan glikogen di otot. Ketika banyak gula darah dikonsumsi saat berolahraga berat, glikogen otot tidak dapat dipecah langsung menjadi gula darah. Pertama-tama harus dipecah untuk menghasilkan asam laktat, yang diedarkan ke hati bersama darah, dan diubah menjadi glikogen hati melalui glikogen glukosa.

Prinsip penentuan: metode anthrone. Glikogen diekstraksi dengan ekstrak basa kuat, dan kandungan glikogen diukur menggunakan metode anthrone dalam kondisi asam kuat.

Reagen dan Peralatan Diperlukan tetapi Tidak Disediakan.

Spektrofotometer/pembaca pelat mikro, mesin sentrifugal meja, pipet transfer, Piring Cuvette Kaca Mikro/96-Well, mortir, asam sulfat pekat (H2SO4) dan air suling.

Prosedur:

SAYA. Ekstraksi sampel:

1. Sel atau bakteri: Mengumpulkan 5-10 juta bakteri atau sel ke dalam tabung centrifuge, buang supernatan setelah sentrifugasi; tambahkan 0,75mL reagen ekstraksi untuk menghancurkan bakteri atau sel secara ultrasonik (kekuatan 20% atau 200W, ultrasonik 3s, 10interval s, mengulang 30 waktu) ); Pindahkan ke tabung 10mL, rebus dalam penangas air mendidih selama 20 menit (tutup rapat untuk mencegah hilangnya air), kocok tabungnya setiap kali 5 menit agar tercampur sempurna; keluarkan tabungnya dan dinginkan, ambil hingga 5mL dengan air suling dan aduk. Centrifuge pada 8000g dan 25℃ selama 10 menit, ambil supernatannya untuk diuji.

2. Jaringan: Timbang 0,1~0,2g sampel dan masukkan ke dalam a 10 tabung ml, menambahkan 0.75 mL larutan Ekstraksi, rebus dalam penangas air mendidih selama 20 menit (tutup rapat untuk mencegah hilangnya air), kocok tabung reaksi setiap kali 5 menit agar tercampur sempurna. Setelah semua tisu larut, keluarkan tabungnya dan dinginkan, lalu berbaikan 5 ML dengan air suling. Centrifuge pada 8000g dan 25℃ untuk 10 menit, ambil supernatannya untuk diuji.

II. Tekad prosedur:

1. Panaskan terlebih dahulu Spektrofotometer/pembaca pelat mikro untuk 30 menit, sesuaikan panjang gelombang ke 620 nm, atur nol dengan sulingan
2. Tabel pengambilan sampel (tambahkan bupati berikut di EPtube)

Aduk rata, tempatkan dalam penangas air mendidih untuk 10 menit (tutup rapat untuk mencegah hilangnya air), Dingin, dan ambil 200 μL ke dalam kuvet kaca mikro/pelat 96-sumur untuk membaca serapan tabung kosong, tabung standar, dan tabung ukur di 620 nm, dan catat sebagai A1, A2, dan A3. Tabung kosong dan tabung standar hanya perlu diuji satu kali.

AKU AKU AKU. Perhitungan:

1. Berat sampel

Sorbitol (mg/g berat segar) =(Cs×V1)×(A3-A1)−(A2-A1)−(L×V1 Mbps V2)1.11

= 0,450×(A3-A1)−（A2-A1)−W

2. Konsentrasi protein

Sorbitol (mg/mg prot) = (Cs×V1)×(A3-A1) −(A2-A1) −(V1×Cpr) 1.11

=0,09×(A3-A1) −（A2-A1) −Cpr

3. Jumlah bakteri atau sel:

Sorbitol（mg/104 sel）= (Cs×V1)×(A3-A1)−(A2-A1)−(jumlah bakteri atau sel×V1±V2) 1.11

= 0,450×(A3-A1)−（A2-A1)jumlah bakteri atau sel

1.11: Ini adalah konstanta bahwa kandungan glukosa diubah menjadi kandungan glikogen, Yaitu, warna dari 111 μg glukosa dengan reagen anthrone setara dengan 100 μg glikogen dengan reagen anthrone.

Cs: konsentrasi standar, 0.1 mg/mL V1: volume sampel, 0.06 ml;

V2: Volume sampel total, 5 ml;

Cpr: Konsentrasi protein sampel, mg/mL; W: Berat sampel, G

Jumlah bakteri atau sel: 104 sebagai satuannya, sepuluh ribu

Catatan:

Jika A lebih besar dari 1.4, encerkan sampel dengan air suling dan kalikan dengan faktor pengenceran yang sesuai dalam rumus perhitungan.

Produk-produk terkait

BC2450/BC2455 Kit Uji Kandungan Fruktosa Jaringan Tanaman

BC2540/BC2545 Selulase(Cl) Kit Uji Aktivitas

BC0330/BC0335 Kit Uji Kandungan Trehalosa

Kit Uji Aktivitas Trehalase BC2510/BC2515

Kit Pengujian Kandungan Sorbitol BC2520/BC2525

BC2530/BC2535 Sorbitol Dehidrogenase(SDH) Kit Uji Aktivitas

BC0230/BC0235 Gula Reduksi(RS) Kit Pengujian Konten

Kit Uji Kadar Glukosa Darah BC2490/BC2495

Spesifikasi Teknis:

Batas deteksi: 0.002 mg/mL

Rentang linier: 0.003125-0.25 mg/mL